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RetroNectin对急性白血病患者自然杀伤细胞增殖和活性的影响
目的 观察重组人纤维连接片段(RetroNectin)包被培养对自然杀伤(NK)细胞体外增殖和杀伤活性的影响,以期获得扩增效率和活性更为理想的免疫活性细胞.方法 选取2008年7月至2011年3月收治的17例初诊急性髓细胞白血病患者,完全缓解后单采外周血单个核细胞,分别采用25、50 μg/ml的RetroNectin包被及传统方法培养获得NK,检测各组NK细胞增殖、表型、上清液细胞因子含量、细胞表面CD25和NK细胞的活化型受体NKG2D的表达、增殖的凋亡以及对自体急性白血病(AL)细胞的杀伤活性情况.结果 培养13 d RetroNectin 50 μg/ml组NK细胞计数高于25μg/ml 组[ (79±16) ×106比(51 ±9) ×106,P＜0.05]；二者均高于传统方法的对照组[(37±11) ×106,均P＜0.05].各组细胞免疫表型差异无统计学意义(P＞0.05)；但两个包被组培养上清液白细胞介素(IL)2、IL-12、肿瘤坏死因子α、干扰素γ分泌均高于对照组(均P＜0.05).两个包被组NK细胞CD25表达均高于对照组(38.2％±4.1％和37.5％±5.1％比24.2％±5.8％)；NKG2D表达亦均高于对照组(81.6％±17.9％和85.7％±20.1％比63.6％±21.9％)；G1期细胞低于对照组(50％±10％和49％±11％比71％±15％),而S期细胞高于对照组(36％±14％和37％±8％比19％±10％)(均P ＜0.05)；两个包被组间差异无统计学意义(均P＞0.05).两个包被组细胞周期调节基因p21、p27的表达下降.两个包被组细胞凋亡率均低于对照组(10.7％±2.1％和9.4％±3.1％比29.6％±10.3％)；NK细胞对自体AL细胞的杀伤活性(效靶比20:1)均高于对照组(82％±21％和80％±18％比61％±14％)(均P＜0.05)；两个包被组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 RetroNectin包被技术应用于NK细胞体外培养可获得增殖率和活性更高的免疫活性细胞,是一种值得推荐的培养方法.
