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p73和GADD45α蛋白在邻苯二甲酸单（2-乙基己基）酯致人正常肝细胞L02和人肝癌细胞Hep3B周期阻滞中的作用
目的 研究抑癌基因p73和生长抑制及DNA损伤诱导基因45α(GADD45α)蛋白对邻苯二甲酸单（2-乙基己基）酯[di( 2-ethylhexyl )phthalate,MEHP]染毒人正常肝细胞L02和人肝癌细胞Hep3B周期的影响。方法 将处于对数生长期的L02细胞和Hep3B细胞分别暴露于终浓度为0（溶剂对照,DMSO终浓度＜1‰）、6.25、12.50、25.00、50.00、100.00 μmol/L的MEHP溶液染毒细胞12h。采用四甲基氮唑蓝（methyhhiazoletetrazolium，MTT）比色法检测细胞增值率，采用流式细胞仪检测细胞的周期时相，采用Western blot法检测细胞周期调控蛋白p53、p73和GADD45α的表达量。结果 与溶剂对照组相比，仅50 μmol/L MEHP染毒L02细胞的增殖率升高(P＜0.05)，各浓度MEHP染毒Hep3B细胞的增殖率均下降(P＜0.01)，差异有统计学意义。与溶剂对照组相比，仅100μmol/LMEHP染毒L02细胞的G1期和G2期细胞构成比下降，S期细胞构成比上升，差异均有统计学意义(P＜0.05)；而100 μmol/L MEHP染毒Hep3B细胞的G1期和25.00、50.00、100.00μmol/L MEHP染毒Hep3B细胞的S.期细胞构成比下降,50.00和100.00 μmol/L MEHP染毒Hep3B细胞的G2期细胞构成比上升，差异均有统计学意义（P＜0.01）。与溶剂对照组相比，各浓度MEHP染毒L02细胞均未见p53、p73和GADD45α蛋白表达量明显增加，差异无统计学意义；而各浓度MEHP染毒Hep3B细胞p73蛋白表达量和50.00、100.00 μmol/L MEHP染毒Hep3B细胞GADD45α蛋白表达量均升高，差异有统计学意义（P＜0.05，P＜0.01）。结论 一定浓度MEHP(50 μmol/L和100 μmol/L)可能通过独立于p53途径诱导p73和GADD45α蛋白表达增加而导致p53基因缺失的Hep3B细胞阻滞在G2期。
