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多重耐药菌E.coli K12(RP4)对颗粒污泥生物处理系统氨氧化细菌的影响
目的 研究多重耐药菌对颗粒污泥生物处理系统硝化过程中氨氧化细菌的影响,为降低耐药基因对生物处理系统的风险提供理论依据.方法 向正常运行的颗粒污泥序批式反应器(GSBR)中投加携带多重耐药质粒RP4的E.coli K12(RP4),监测GSBR氨氮去除效率,利用变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)和实时荧光定量PCR技术对不同粒径颗粒污泥中氨氧化细菌的菌群结构和丰度进行分析比较,以探讨多重耐药菌对氨氧化细菌的影响.结果 接种E.coli K12(RP4)后,GSBR氨氮去除率从94.7％降低至32.8％,恢复12 d后,去除率达95％以上.颗粒污泥中,粒径越大,氨氧化细菌菌群结构越稳定.在各粒径污泥中,亚硝化单孢菌均占据优势地位,是降解氨氮的主要菌群.反应初期,氨氧化细菌的丰度并未因E.coli K12(RP4)的投加而发生较大变化,直至运行后期絮状污泥和小粒径颗粒污泥新生氨氧化细菌丰度呈现明显上升趋势,其与氨氮去除效果恢复呈现相关性.结论 耐药菌E.coli K12(RP4)影响了氨氧化细菌的代谢活性,从而导致污水生物处理系统硝化效果下降.
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三江源地区高寒草甸土壤氨氧化细菌多样性研究
目的:利用16S rDNA-PCR-DGGE方法首次对青藏高原核心区三江源自然保护区的高寒草甸样地的土壤氨氧化细菌进行了多样性研究.方法:从土壤中抽提微生物总DNA,运用巢式PCR扩增氨氧化细菌16S rRNA基因的V3可变区,结合DGGE(denaturing gradient gel electrophoresis)技术分析样品氨氧化细菌群落组成,并利用相关性分析探讨了群落结构多样性与环境因子的联系.结果:4个样地(玉树S1；囊谦S2；治多S3和S4)共检测到14个多态性条带,多样性指数为1.69～2.00.相关性分析显示多样性指数与海拔、C/N呈负相关,与NO3-呈显著正相关.结论:海拔、C/N及NO3-可能是影响土壤氨氧化细菌多样性的重要因子.
关键词： 氨氧化细菌 变形梯度凝胶电泳(DGGE) 环境变化 三江源自然保护区 -
活性污泥中硝化细菌16S rDNA鉴定方法研究
目的以活性污泥为材料,研究其中硝化细菌的分离及16S rDNA 鉴定方法.方法采用氨氧化细菌与亚硝酸氧化细菌富集、分离技术从武汉某啤酒厂曝气池活性污泥中分离得到2株纯培养菌株N1和N2.分别提取2株细菌的总DNA,利用氨氧化细菌与亚硝酸氧化细菌的16S rDNA特异性引物进行多聚酶链反应(PCR)扩增;扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳和Sanger末端终止法测序分析,用NCBI-Blast软件将测序结果在Genbank等数据库中进行同源性检索.结果 N1和N2的DNA扩增产物片断大小分别为526 bp和391 bp,测序结果经检索证实N1、N2分别与标准菌株Nitrosomonas sp. DYS317和Nitrobacter sp. R6的保守性片段有99%、100%的同源性.结论可以判定所分离得到的N1和N2菌株分别为亚硝化单胞菌属和硝化杆菌属.
