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硒、锌干预对体外淀粉样前体蛋白酶解通路的影响
目的:研究硒、锌干预对体外淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)酶解通路的影响。方法用0.1μmol/L的硒、锌处理胚鼠皮层神经元细胞,采用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测γ-内切酶活性;另用脂质体转染构建 APP695高表达 CHO 细胞系,用 G418(500mg/L)对转染后细胞进行筛选,终获得表达人CHO-APP695细胞模型,Western-blot法检测APP-N端片段蛋白的表达。用0.1μmol/L的硒、锌处理转染细胞,48h 后,ELISA 法检测细胞培养上清中 Aβ1-40含量,Western-blot 法检测细胞裂解液 APP-N 端片段蛋白的表达。结果 Western-blot法检测显示CHO-APP695细胞高表达APP-N端片段蛋白;与对照组比较,硒、锌处理组抑制内源性γ-内切酶的活性,且硒、锌联合使用,抑制作用增强;Aβ1-40的含量也减少;单纯硒、锌和硒锌联合处理组, APP-N端片段蛋白表达水平增加。结论硒、锌抑制内源性γ-内切酶对APP蛋白的剪切,减少Aβ1-40的生成,可能对阿尔茨海默病的发病及进展有一定的预防保护作用。