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激活蛋白-1与p53基因启动子结合的染色质免疫沉淀技术分析
目的 检测肺腺癌A549细胞内的转录因子激活蛋白-1(AP-1)与p53基因调控区的结合情况.方法 采用染色质免疫沉淀技术,用c-jun特异性抗体沉淀DNA,聚合酶链反应(PCR)技术检测p53基因5'端特异性序列.结果 在c-jun特异性抗体免疫沉淀的DNA片段中扩增出p53 5'端的特异性序列.结论 AP-1在A549细胞内结合于p53基因的调控区,参与该基因的表达调控.
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汉滩病毒诱导乳鼠组织热休克蛋白表达及其与病毒抗原蛋白的相关性
目的探讨汉滩病毒(HV)感染诱导乳鼠组织热休克蛋白(HSPs)表达及热休克蛋白与病毒蛋白的相互关系.方法出生后2～3 d的昆明乳鼠,每只脑内接种100个半数致死量的HV 0.03 ml,8 d后乳鼠发病死亡,取其脑组织一部分固定,石蜡包埋切片,用免疫组织化学法结合共聚焦显微镜检测组织中病毒抗原及HSP70的表达,一部分组织制匀浆液,用ELISA、免疫共沉淀方法分析病毒抗原和HSP70的表达及关系.结果 HV感染诱导了乳鼠脑组织神经细胞高表达热休克蛋白(HSP)70,细胞内病毒抗原与HSP70有共定位关系;免疫共沉淀结果显示用HSP70mAb可以共沉淀感染乳鼠脑组织匀浆中的汉滩病毒核心抗原(HV-NP),用HV-NP mAb 1A8可沉淀感染乳鼠脑组织匀浆中的HSP70,对照实验阴性,所用两种蛋白抗体间无交叉反应,因而HSP70与HV-NP结合形成复合物,结果是特异的.结论 HV感染诱导HSP70的表达,后者与HV-NP结合形成HSP70-病毒抗原肽复合物,该复合物可能在病毒感染和复制过程中发挥作用.
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运用聚乙二醇6000沉淀筛检巨催乳素血症患者
目的：运用聚乙二醇6000沉淀筛检血清催乳素（ PRL）水平升高患者中巨催乳素血症并进行临床样本验证。方法：运用聚乙二醇6000沉淀去除PRL升高患者血清中的巨催乳素分子（MPRL）。采用Sephacryl S-100HR层析柱联合化学发光免疫分析法、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳联合蛋白质印迹法检测聚乙二醇6000沉淀血清MPRL的效果。采用聚乙二醇6000沉淀及化学发光免疫分析法检测PRL升高患者血清样本中的MPRL并筛查巨催乳素血症。分析真性高催乳素血症、高催乳素血症＋巨催乳素血症、真性巨催乳素血症患者不同临床表现。结果：聚乙二醇6000沉淀后，血清样本中MPRL峰或MPRL杂交信号明显降低，但对大分子催乳素（ BPRL）和小分子催乳素（ SPRL）无明显影响。1538例血清PRL升高患者中，16．1％（247/1538）为巨催乳素血症，其余83．9％（1291/1538）为真性高催乳素血症。247例巨催乳素血症样本中，93．5％（231/247）为真性巨催乳素血症，6．5％（16/247）为巨催乳素血症＋高催乳素血症。508例真性高催乳素血症患者中86．2％（438/508）有月经不调、停经/闭经、不孕不育或垂体瘤疾病，85．7％（6/7）高催乳素血症＋巨催乳素血症患者有上述临床表现，真性巨催乳素血症患者仅15．5％（11/71）有上述临床表现。结论：血清PRL升高患者中有一定比例的真性巨催乳素血症（假性高催乳素血症），运用聚乙二醇6000沉淀检测能简便有效地区分真性或假性高催乳素血症患者。
关键词： 沉淀素试验 聚乙烯二醇类/诊断应用 高催乳素血症/诊断 催乳素 普查 -
IHA和Slide诊断旋毛虫病的研究
目的:检测感染旋毛虫病豚鼠血清,寻求新的诊断旋毛虫病的方法.方法:采用间接红细胞凝集试验(IHA)和玻片法环蚴沉淀试验(Slide).结果:阳性率分别为100%和97.1%.用此两种血清学方法检测正常豚鼠、血吸虫病兔、肺吸虫病大白鼠、蛔虫病人和鞭虫病人血清,除1例肺吸虫病大白鼠血清IHA出现阳性反应外,其它血清两种方法均为阴性反应.结论:提示两种免疫血清学方法对旋毛虫病特异性抗体的检测均具有较好的敏感性和特异性.
