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PCR定性检测转基因大豆的探讨
目的 应用定性PCR方法检测大豆中转基因成分.方法 以大豆凝集素(lection)基因为内源参照基因,设计合适引物,对转基因植物中常用的CaMV 35S启动子进行PCR扩增.结果 在转基因大豆中扩增出195 bp的CaMV 35S启动子片断.结论 定性PCR技术是进行转基因食品检测的有效手段.
关键词： 转基因大豆 定性PCR camv 35S启动子 Lection基因 -
HBV-DNA定量和定性聚合酶链反应及其临床实用性的探讨
探讨HBV-DNA定量和定性聚合酶链反应的意义及其临床实用性.检测283例临床血清标本,其中125例用实时荧光定量PCR测HBV-DNA含量并比较不同乙型肝炎(乙肝)病型;另158例用定性PCR测HBV-DNA并用ELISA法规HBV血清标志物(HBVM),同时进行DNA定量及定性的对比研究.结果示HBV-DNA含量与乙肝病型无明显关系;DNA阳性率与乙肝病型及HBVM有关;HBV-DNA定量与定性相关性良好.FQ-PCR可真实反映HBV-DNA复制水平,有广泛的应用前景;定量与定性HBV-DNA检测相关性良好,在仅需了解HBV-DNA的复制与否的诊断中,可用定性PCR;对HBVM的意义应重新认识.
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几种CMV相关物检测对诊断肾移植患者CMV感染的评价
目的 比较血中pp65抗原、DNA和IgM抗体检测对肾移植患者巨细胞病毒(CMV)活动性感染的诊断价值,为临床上对CMV感染的诊断和治疗提供参考.方法 收集83位肾移植患者的血标本(共302份),分离血浆和多型核白细胞,血浆用于CMV-DNA(定性PCR)和IgM抗体(ELISA)检测,白细胞用于pp65抗原血症检测(荧光免疫法).结果 CMV-DNA阳性率为36.1%,CMV IgM抗体阳性率20.2%,CMV pp65抗原阳性率为38.5%.pp65抗原阳性细胞数与病人的临床症状密切相关.结论 pp65抗原阳性细胞数能反应CMV的数量,可监测早期活动性CMV感染及疗效观察,检测方法特异,灵敏,操作简单,适合临床实验室应用.
关键词： 巨细胞病毒(CMV) pp65抗原 IgM抗体 DNA 定性PCR -
大豆和玉米加工产品中外源转基因成分检测技术的建立
目的:建立检测大豆和玉米加工产品中转基因成分的PCR技术.方法:采用PCR技术检测CaMV 35S启动子,并进一步通过PCR检测RoundUp Ready Soybean(RRS)和Bt176 Maximaizer的特异性DNA片段,判断大豆和玉米加工产品中是否含相应转基因成分.结果:在1份豆粕和豆腐样品中检测到了RoundUp Ready大豆特异性的498bp片段,而在玉米粒样品中检测到了Bt176特异性转基因成分.PCR检测的灵敏度达到0.1%,稳定性良好.结论:PCR技术检测外源基因是灵敏和准确的,可以广泛地应用到转基因作物及其加工产品的转基因成分检测中.
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多重PCR检测食品中转基因成分研究
[目的]建立检测转基因食品的多重PCR-聚丙烯酰胺凝胶电泳快速检测体系.[方法]针对转基因大豆、玉米、油菜的多个相对稳定的转基因元件,包括35S、NOS、EPSPS、Cry1A、NPTⅡ等基因,同时选定植物本身固有的大豆Lectin、玉米IVR、油菜Napin基因作为内源参照指示基因,设计、筛选出9对引物分别组成多重PCR,结合高灵敏度的聚丙烯酰胺凝胶电泳组成快速检测体系,对转基因食品进行检测,1～2天能完成整个检测过程.对珠海地区市售的大豆、玉米、油菜及其加工产品共185个样品中的转基因成分进行了初步调查.[结果]建立的多重PCR检测体系稳定可靠、特异性好,灵敏度高.调查的185份可疑食品样品中,转基因阳性率达27.6%.[结论]该检测体系快速可靠、灵敏准确、特异性好,且操作简便、成本低廉,是一种进行转基因食品检测的良好的技术模式.对珠海地区的转基因食品状况有了一定了解.
