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五田保肝液对酒精性肝病大鼠肝组织Fas、Fasl、Caspase-8蛋白表达的影响
[目的]研究五田保肝液对酒精性肝病大鼠肝细胞凋亡以及肝组织中Fas、Fasl、Caspase-8蛋白表达的影响.[方法]100只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组10只,阳性药对照组、模型组、五田保肝液低、中、高剂量组各18只.采用白酒灌胃的方法制备动物模型,造模12周乙醚麻醉后断头处死大鼠,取肝组织,采用TUNEL法检测肝细胞凋亡指数,采用免疫组化法法检测肝组织Fas、Fasl、Caspase-8蛋白的表达.[结果]模型组凋亡指数高于其他各组,中药中、高剂量组和阳性药对照组凋亡指数低于模型组,中药低剂量组凋亡指数和模型组无显著性差异;各组Fas蛋白表达差异没有显著性.模型组Fasl、Caspase-8蛋白表达高于其它各组;五田保肝液中、高剂量和阳性药组大鼠肝组织Fasl、Caspase-8的表达较模型组降低,五田保肝液低剂量组Fasl的表达与模型组相比,虽然从数据趋势上有下降的趋势,但差异无统计学意义.五田保肝液低剂量组Caspase-8的表达和模型组差异无统计学意义.[结论]五田保肝液可能通过下调Fasl、Caspase-8的表达,减少酒精引起的大鼠肝细胞的凋亡,从而达到防治酒精性肝病的功效.
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五田保肝液对酒精性肝纤维化大鼠肝组织MMP-2及其抑制剂表达的影响
[目的]研究五田保肝液对酒精性肝纤维化大鼠肝组织中Ⅳ型胶原以及基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其抑制因子TIMP-2表达的影响,探讨五田保肝液对大鼠酒精性肝纤维化的治疗效果和可能机制.[方法]随机将100只Wistar大鼠分成6组:正常组、五田保肝液低、中、高剂量组、模型组、阳性药对照组,其中正常组10只,其他各组均18只.采用白酒加少量玉米油、吡唑的混合物灌胃,制备大鼠酒精性肝纤维化模型,造模12周后处死大鼠,以免疫组化法检测大鼠肝组织Ⅳ型胶原蛋白的表达,实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠肝组织MMP-2、TIMP-2mRNA的表达.[结果]各组Ⅳ型胶原蛋白的表达均比正常组显著升高,但五田保肝液各剂量组和阳性药组Ⅳ型胶原蛋白的表达比模型组降低;模型组大鼠肝组织MMP-2、TIMP-2的mRNA表达比正常组显著升高,但TIMP-2的mRNA表达升高幅度更大;五田保肝液和阳性药组MMP-2mRNA的表达较模型组升高,但TIMP-2mRNA的表达较模型组降低,且五田保肝液以中、高剂量效果更明显.[结论]五田保肝液可能通过上调MMP-2的表达、下调TIMP-2的表达,从而抑制大鼠酒精性肝纤维化的发生发展.
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ILK、TNFα在酒精性肝纤维化大鼠肝组织中的表达及五田保肝液的干预作用
[目的]探讨整合素连接激酶(ILK)、肿瘤坏死因子α[(TNFα)在酒精性肝纤维化大鼠肝组织中的表达及五田保肝液的干预作用.[方法]将100只Wistar大鼠随机分成6组:正常对照组10只,模型组、五田保肝液低、中、高剂量组、易善复组各18只,采用白酒辅以吡唑、玉米油的混合食料灌胃的方法建立大鼠酒精性肝纤维化模型,12周末处死大鼠,以苏木精-伊红(HE)染色观察各组大鼠肝组织纤维化情况,以实时定量反转录-聚合酶链式反应( RT-PCR)法检测大鼠肝组织ILK、TNFα mRNA的表达.[结果]五田保肝液(尤其是中、高剂量)和易善复各组大鼠肝纤维化程度轻于模型组,模型组大鼠肝组织ILK、TNFα mRNA的表达比正常对照组明显升高；五田保肝液和易善复可降低大鼠肝组织ILK、TNFα mRNA的表达,且以五田保肝液中、高剂量效果更显著.[结论]ILK、TNFα mRNA的表达升高可能是大鼠酒精性肝纤维化发生发展的机制之一,而五田保肝液可能通过下调ILK、TNFα mRNA的表达,对大鼠酒精性肝纤维化的发生发展起到抑制作用.
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护肝中药“五田保肝液”急性毒性实验研究
[目的]明确护肝中药“五田保肝液”的用药安全剂量范围,为临床用药安全提供实验依据.[方法]依据中药、天然药物急性毒性实验研究技术指导原则设计实验,观察小鼠急性毒性反应,并记录其死亡情况,确定急性毒性实验中五田保肝液半数致死量(LD50)或大给药量.[结果]半数致死量实验中未测得LD50,大给药量实验获得小鼠大给药量折合生药228 g/(kg·d),相当于成人临床用药量的120倍.[结论]护肝中药“五田保肝液”急性毒性反应低,临床常用药物剂量安全可靠.
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清肝利湿方“五田保肝液”长期毒性试验研究
目的:明确清肝利湿方“五田保肝液”长期用药安全剂量范围,为临床用药提供试验依据.方法:依据中药、天然药物长期毒性试验研究技术指导原则,设计试验,观察大鼠长期毒性试验反应.结果:给药组与对照组比较,动物一般状况、血液学常规指标、血清生化指标等无统计学差异,主要脏器解剖及病理学检查未见明显异常.结论:中药复方“五田保肝液”毒性低,临床可长期用药.
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五田保肝液对酒精性肝病大鼠肝组织SOD、MDA、GSH-PX影响的实验研究
目的:研究五田保肝液对酒精性肝病大鼠肝组织SOD、MDA、GSH-PX的影响.方法:用白酒辅以吡唑、玉米油的混合食料灌胃的方法建立大鼠酒精性肝病模型,随机分为正常组、模型组、中药低剂量组、中剂量组、高剂量组、易善复组(正常组10只,其余组各18只).12周后处死,HE、Masson染色观察肝组织变化;制备肝匀浆后测定SOD、MDA、GSH-PX含量.结果:模型组大鼠肝组织SOD、GSH-PX水平较正常组显著降低(P<0.01),MDA水平较正常组显著升高(P<0.01).各治疗组大鼠肝组织SOD、GSH-PX水平较模型组升高(P<0.05),其中中、高剂量组P<0.01;MDA水平较模型组降低(P<0.05),其中中、高剂量组P<0.01.结论:五田保肝液可提高肝组织SOD、GSH-PX活性、降低MDA含量,抑制脂质过氧化反应,这可能是它防治酒精性肝病的机制之一.
