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金线莲化学成分的研究
目的 研究金线莲Anoectochilus roxburghii的化学成分.方法 利用正相硅胶、D101大孔吸附树脂、聚酰胺树脂、ODS C18、重结晶及制备高效液相色谱进行分离纯化,根据波谱数据及理化性质进行结构鉴定.结果 从金线莲全草中分离得到19个化合物,分别鉴定为(22E,24ζ)-24-异丙烯基-22-脱氢胆甾醇(1)、anoectosterol (2)、豆甾醇(3)、β-谷甾醇(4)、赫尔西酚(5)、moscatin (6)、5,3'-二羟基-3,7,4'-三甲氧基黄酮(7)、亚油酸(8)、8,9-环氧-1,11,14-三烯(9)、香草乙酮(10)、对羟基苯甲醛(11)、对羟基苯乙酮(12)、5-羟基-3',4',7-三甲氧基黄酮醇-3-O-β-D-芸香糖苷(13)、异鼠李素-3-O-刺槐双糖苷(14)、β-腺苷(15)、异鼠李素-3-O-β-龙胆双糖苷(16)、loroglossin (17)、corchoinoside C(18)、对羟基苯甲醇(19).结论 化含物1、16、19为首次从兰科植物中得到,化合物5～7、10、12为首次从开唇兰属植物中得到,化合物9、15、18为首次从该植物中得到.
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热毒宁注射液化学成分研究(Ⅳ)
目的 对中药复方热毒宁注射液的解热抗炎活性成分进行研究.方法 采用脂多糖(LPS)诱导小鼠内毒素休克模型对热毒宁注射液解热抗炎活性部位进行筛选,综合应用HP-20大孔树脂、硅胶、MCI、ODS和Sephadex LH-20柱色谱以及反相MPLC、HPLC等各种现代色谱技术对解热抗炎活性部位进行系统地分离纯化,根据化合物的光谱数据和理化性质进行结构鉴定.结果 经活性筛选,热毒宁注射液经大孔吸附树脂95％乙醇洗脱部位为解热抗炎活性部位,从中分离鉴定了14个化合物,分别鉴定为邻苯二甲酸二丁酯(1)、异香草酸(2)、香草乙酮(3)、苯丙酸(4)、京尼平苷(5)、jasmigeniposide B(6)、京尼平苷酸(7)、京尼平龙胆二糖苷(8)、6"-O-反-对香豆酰基京尼平龙胆二糖(9)、6"-O-反-5可魏酰基京尼平龙胆二糖苷(10)、6"-O-反-芥子酰基京尼平龙胆二糖苷(11)、jasmigeniposide A (12)、6"-O-反-桂皮酰基京尼平龙胆二糖苷(13)、2'-O-反-咖啡酰基栀子新苷(14).结论 化合物1～4、13均为首次从热毒宁注射液中分离得到;经UPLC定性分析及文献对照,化合物5、7～13均为来源于栀子中的化学成分.
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香草乙酮改善葡聚糖硫酸钠诱发溃疡性结肠炎小鼠的炎症反应与NOXs-ROS-p38MAPK信号通路的关系
本文旨在探讨香草乙酮(apocynin)治疗葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠的分子机制.以饮用水配制5％ DSS诱发UC动物模型,2％香草乙酮治疗UC小鼠,采样并应用HE染色进行结肠组织病理学评估.采用鲁米诺化学发光方法检测结肠组织活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)生成及DPI抑制后的NADPH消耗率分析NADPH氧化酶(NADPH oxidases,NOXs)活性,Western blot法检测p38MAPK磷酸化水平,Griess方法分析NO,酶联免疫法检测前列腺素E2 (prostaglandin E2,PGE2),real time PCR及Westem blot法检测iNOS、COX2的表达,酶联免疫吸附实验测定细胞因子TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-1β的水平.体外实验采用分离的结肠组织中性粒细胞,检测其ROS生成、NOXs活性、NO、PGE2的变化,并应用Western blot检测其NOX1、p-p38MAPK的表达.结果显示,香草乙酮治疗后UC小鼠结肠组织NOXs活性及ROS生成被抑制(P＜0.01),p38MAPK磷酸化水平降低,NO、PGE2及相关细胞因子生成减少(P＜0.01),UC炎症反应得到缓解.在炎症部位的中性粒细胞中,香草乙酮抑制ROS生成及NOX活性(P＜0.01),并降低NOX1的表达、p38MAPK的磷酸化及NO、PGE2的生成(P＜0.01).因此,香草乙酮可能通过NOXs-ROS-p38MAPK信号通路缓解DSS诱发UC小鼠的炎症反应,中性粒细胞是参与其保护机制的主要炎症细胞.
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SFOD-LPME-HPLC测定金线莲中对羟基苯乙酮和香草乙酮
目的:建立漂浮有机液滴凝固液相微萃取-高效液相色谱(SFOD-LPME-HPLC)法测定金线莲中对羟基苯乙酮和香草乙酮含量的方法.方法:利用SFOD-LPME技术对中药材金线莲中低峰度组分对羟基苯乙酮和香草乙酮进行富集,后运用HPLC进行分析.优化后的萃取实验条件:60μL的十二醇为萃取溶剂,1 000 μL的四氢呋喃为分散溶剂,15 mL样液加入氯化钠4.50 g,pH为4.0,40℃水浴,以1 500 r·min-1转速搅拌萃取40 min.色谱条件:色谱柱:Agilent TC-C18 (4.6 mm×250mm,5 μn);流动相:甲醇-0.1％乙酸(25∶75);流速:1.0 mL·min-1;柱温:31.5℃;检测波长:275nm.结果:对羟基苯乙酮和香草乙酮的线性范围均为2～24ng·mL-1,检测限分别为0.06 ng·mL-1和0.17 ng·mL-1,富集倍数分别为166和140,测得福建南靖组培金线莲中对羟基苯乙酮和香草乙酮的含量分别为1.69 μg·g-1和0.72μg·g-1,回收率在95.29％～104.30％之间.结论:该法具有集富集、净化于一体的特点,可成为简单、可靠、快速的中药质量控制前处理和测定方法.
