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猪苓酮A通过调节Bcl-2/Bax信号通路诱导雌激素受体阴性的乳腺癌细胞凋亡研究
目的 研究猪苓酮A对雌激素受体(ER)阳性或阴性人乳腺癌细胞的凋亡作用及其可能的作用机制.方法 选择2株ER阳性人乳腺癌细胞(MCF-7细胞、BT474细胞)和1株ER阴性人乳腺癌细胞(MDA-MB-453细胞),用不同浓度的猪苓酮A分别处理24 h,或以50 μmol/L的猪苓酮A分别处理6、12、24、48 h后,分别采用噻唑蓝(MTT)法测定3株乳腺癌细胞的增殖情况;采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;采用Western blottig法检测与细胞凋亡密切相关的Bcl-2家族蛋白表达情况.结果 猪苓酮A可以时间和剂量依赖性地抑制ER阴性MDA-MB-453细胞的增殖;而对于ER阳性MCF-7、BT474细胞增殖均无明显影响;细胞周期检测显示猪苓酮A可以使MDA-MB-453细胞的生长阻滞在G1或G2/M期;50 μmol/L猪苓酮A作用于MDA-MB-453细胞24h后,细胞出现明显凋亡,而MCF-7、BT474细胞则没有出现明显凋亡;Western blotting检测发现50 μmol/L猪苓酮A处理组ER阴性MDA-MB-453细胞中促凋亡蛋白Bax、Bad表达量升高,而抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-w表达量降低.结论 猪苓酮A能抑制ER阴性乳腺癌细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制与调控Bcl-2家族蛋白的表达量有关.
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外源性胰岛素样生长因子结合蛋白7抑制人乳腺癌MDA-MB-453细胞的增殖
为了探究外源性胰岛素样生长因子结合蛋白7 (insulin-like growth factor binding protein 7,IGFBP7)对人乳腺癌MDA-MB-453细胞增殖的影响及其分子生物学机制,本研究通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验揭示外源性IGFBP7对人乳腺癌MDA-MB-453细胞增殖有显著的抑制作用(IGFBP7的IC50=8.49 μg/mL),并呈剂量和时间的双重依赖性,该作用可被p38MAPK阻断剂SB203580抑制.流式细胞术检测结果表明,外源性IGFBP7可有效阻止MDA-MB-453细胞从G1期进入S期.Western blot进一步检测了外源性IGFBP7对p38MAPK、p-p38MAPK、p21CIP1/WAF1、Rb和p-Rb蛋白水平的影响.外源性IGFBP7可促进p38MAPK磷酸化和p21CIPI/WAFI蛋白的表达,抑制Rb磷酸化,而SB203580能够抑制外源性IGFBP7对人乳腺癌MDA-MB-453细胞p21CIPI/WAFI蛋白表达和Rb磷酸化的影响.以上结果表明,外源性IGFBP7可通过激活p38MAPK信号通路,上调p21CIPI/WAFI蛋白表达和抑制Rb磷酸化,以阻滞人乳腺癌MDA-MB-453细胞于G1期.
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IVIG对乳腺癌细胞株MDA-MB-453体外增殖抑制作用的实验研究
静脉注射丙种球蛋白(IVIG), 来源于健康志愿者捐献的血浆经灭菌、分离得到,因此是一种源自人体的安全的生物制品.IVIg主要适用于血小板减少性紫癜(ITP)、自体免疫疾病以及免疫介导的疾病的治疗[1-2].近年来,有文献报道IVIG还可用于治疗各种肿瘤,有一定的临床效果[3-4].乳腺癌是严重威胁人类健康的常见病和多发病,乳腺癌新发病人数每年有增加的趋势.本实验是利用目前较为先进的ATP-荧光发光法检测抑瘤率并结合流式细胞仪检测肿瘤细胞周期、凋亡指数,来探索IVIG体外对乳腺癌细胞增殖的影响.
关键词： IVIG(静脉注射丙种球蛋白) MDA-MB-453 乳腺癌 -
川楝素对乳腺癌细胞的生长抑制作用
[目的]探讨川楝素对人乳腺癌MDA-MB-453细胞作用及其机制.[方法]取对数生长期的MDA-MB-453细胞,0、6.25、12.50、25.00、50.00、100.00nmol/L川楝素处理,绘制生长曲线.川楝素0、12.5、50nmol/L处理72h后,MTS法检测川楝素对乳腺癌细胞增殖的影响,流式细胞仪检测川楝素对乳腺癌细胞凋亡和细胞周期的影响.[结果]川楝素对乳腺癌细胞有增殖抑制作用,并呈时间剂量依赖性(P＜0.01).MDA-MB-453细胞48h、72h、96h的IC50分别为17.25、22.20和135.69nmol/L.流式细胞分析表明,川楝素诱导乳腺癌细胞的凋亡呈浓度依赖性(P＜0.01),且阻滞细胞在S期(P＜0.01),以0、12.50、50.00nmo]/L川楝素处理乳腺癌细胞72h后,MDA-MB-453细胞早期凋亡率分别为3.21％、9.64％和20.19％,MDA-MB-453细胞处于细胞周期S期细胞占20.98％、35.92％和45.02％.[结论]川楝素对乳腺癌MDA-MB-453细胞增殖具有抑制作用,其作用机制可能与诱导细胞凋亡和引起S期阻滞有关.
关键词： 川楝素 乳腺癌 MDA-MB-453 细胞增殖 细胞凋亡 -
B细胞淋巴因子9基因在人乳腺癌细胞株的表达
目的 观察B细胞淋巴因子9基因(BCL9)在不同人乳腺癌细胞株中的表达.方法 实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot法检测人乳腺癌细胞株MDA-MB-231、MCF-7和MDA-MB-453中BCL9的mRNA及蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞周期,计算增殖指数,比较不同细胞株之间增殖能力.结果 Real-time PCR检测细胞株BCL9的mRNA表达在MDA-MB-231 (0.016 ±0.004)中表达量高,MCF-7(0.008±0.002)次之,MDA-MB-453(0.004±0.002)表达水平低,差异有统计学意义(MDA-MB-231与MCF-7比较,P=0.000;MDA-MB-231与MDA-MB-453比较,P=0.000;MCF-7与MDA-MB-453比较,P=0.021).BCL9蛋白在细胞间表达量为MDA-MB-231 (0.629 ±0.101)＞ MCF-7 (0.204±0.990)＞MDA-MB-453 (0.397 ±0.196),差异有统计学意义(MDA-MB-231与MCF-7比较,P=0.012;MDA-MB-231与MDA-MB-453比较,P=0.000;MCF-7与MDA-MB-453比较,P=0.030).流式细胞术增殖指数显示MDA-MB-231 (0.483±0.010)细胞高于MDA-MB-453 (0.358±0.032;P=0.009)和MCF-7 (0.397 ±0.061;P =0.040),差异有统计学意义.另BCL9基因的表达与BCL9蛋白的表达呈正相关;BCL9基因与细胞增殖指数呈正相关.结论 BCL9在人乳腺癌不同细胞株间表达水平不同,而对于三阴性乳腺癌的典型代表MDA-MB-231细胞株细胞增殖能力比较强,BCL9的表达水平也较高,两者呈正相关.
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桑葚花色苷的提取及对人乳腺癌细胞株MDA-MB-453生长的抑制
目的 以超声辅助乙醇浸提法提取桑葚花色苷,观察其对人乳腺癌细胞株MDA-MB-453体内外生长的抑制作用.方法 将桑葚冷冻干燥,冷冻干粉于常温下用70%乙醇以1∶15的料液比超声提取1 h,提取液采用Amberlite TM XAD7HP型大孔吸附树脂以1 ml/min的吸附流速和1 ml/min的洗脱流速在pH 3.0酸性环境下纯化,得到桑葚花色苷提 取物.利用CCK-8法检测不同浓度桑葚花色苷提取物(50、100、150、200 ms/ml)对人乳腺癌细胞MDA-MB-453增殖活力的影响;以24只雌性BALB/c裸鼠建立MDA-MB-453细胞移植瘤模型,随机分为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,分别以0、50、100、200 mr/(kg·d)的桑葚花色苷提取物膳食干预,检测其对肿瘤生长的影响.结果 获得花色苷含量为(41.8±4.8)%的桑葚花色苷提取物;CCK-8法检测发现桑葚花色苷提取物可显著降低乳腺癌细胞活力,并显示剂量-效应关系[50、100、150、200 ms/ml桑葚花色苷提取物处理组抑制率分别为(14.8±1.8)%、(29.8±2.2)%、(33.0 ±2.7)%、(44.3±3.8)%];体内实验发现,高剂量组和中剂量组移植瘤体积和质量均显著低于对照组[体积抑制率分别为(55.5±4.8)%、(39.3±3.2)%;质量抑制率分别为(51.6±4.2)%、(38.9±3.1)%],表明桑葚花色苷提取物膳食干预可有效抑制移植瘤的生长.结论 桑葚花色苷提取物能够显著抑制人乳腺癌细胞株MDA-MB-453的生长.
关键词： 桑葚花色苷 乳腺癌 移植瘤 MDA-MB-453 -
染料木黄酮对人乳腺癌细胞株MDA-MB-453、MCF-7、MCF-7/HER2增殖能力的影响
目的 探讨染料木黄酮(Genistein)对人乳腺癌细胞株MDA-MB-453(ER-,HER2-high)、MCF-7/HER2(ER+,HER2-high)、和MCF-7(ER+,HER2-low)增殖能力的影响,并观察HER2在染料木黄酮抑制肿瘤增殖中的作用.方法 通过基因转染技术建立HER2/neu高表达的人乳腺癌MCF-7细胞,免疫荧光细胞化学法鉴定;不同浓度的Genistein分别处理3种乳腺癌细胞,MTT法分别检测Genistein对肿瘤细胞增殖能力的影响.结果 Genistein对MDA-MB-453细胞的增殖抑制作用随处理浓度增加而增大,IC50约为100 μmol/L;Genistein对MCF-7/HER2和MCF-7细胞在低浓度表现为增殖促进作用,分别在大于40 μmol/L和10μmol/L时表现为增殖抑制作用.结论 Genistein可通过ER依赖和非依赖两种途径,在一定浓度范围内抑制肿瘤细胞增殖,且HER2高表达能够降低染料木黄酮对ER+乳腺癌的增殖抑制作用.
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三羟异黄酮对HER2/neu高表达人乳腺癌细胞辐射敏感性的影响
目的 探讨三羟异黄酮对人乳腺癌细胞株MDA-MB-453(ER-,HER2-high)、MCF-7/HER2(ER+,HER2-high)和MCF-7(ER+,HER2-low)辐射敏感性的影响,并观察三羟异黄酮对HER2/neu高表达人乳腺癌细胞辐射敏感性的作用.方法 通过基因转染技术建立HER2/neu高表达的人乳腺癌MCF-7细胞,免疫荧光细胞化学法鉴定;经100 mol/L三羟异黄酮联合或单独10 Gyγ射线处理MDA-MB-453、MCF-7/HER2和MCF-7三种乳腺癌细胞24h后,采用流式细胞仪检测三羟异黄酮对乳腺癌细胞辐射敏感性的影响.结果 与对照组相比,MDA-MB-453、MCF-7/HER2细胞的射线组凋亡率无显著差异(P＞0.05),三羟异黄酮联合射线组的凋亡率,与射线组和对照组相比,分别增加25.51％(P＜0.05)、56.16％ (P ＜0.05);MCF-7细胞射线组凋亡率比对照组增加4.62％ (P ＜0.05),而三羟异黄酮联合射线组与射线组比较没有显著差异(P＞0.05).结论 HER2/neu高表达的乳腺癌细胞对射线诱导的凋亡有抵抗作用,但三羟异黄酮可增强γ射线诱导HER2/neu 高表达乳腺癌细胞MDA-MB-453细胞、MCF-7/HER2细胞的凋亡作用.
关键词： 三羟异黄酮 人乳腺癌细胞 辐射敏感性 MCF-7/HER2 MDA-MB-453
