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毛钩藤和无柄果钩藤的ITS序列分析研究
目的 以核糖体转录间隔区(rDNA ITS)序列为分子标记,对钩藤属的2种常用中药材毛钩藤Uncariahirsute和无柄果钩藤U.sessili fructu:进行遗传分析,阐明钩藤属内不同种间的分子系统发育关系.方法 通过改良CTAB法对毛钩藤和无柄果钩藤进行总DNA提取,利用通用引物对rDNA ITS序列进行PCR扩增,RFLP分析和序列测定,用PAUP软件进行系统发育分析,构建大简约树.结果 获得毛钩藤和无柄果钩藤的限制性内切酶(Msp I&Hae III)酶切图谱以及rDNA ITS区的完整序列,其序列长度均为718 bp,结论 通过基于rDNAITS序列进行RFLP分析、序列测定和系统发育树构建的分子生物学方法,能够对钩藤属植物进行准确的分子鉴定,为钩藤属中药材的种类鉴定和种间的分类地位提供分子生物学依据.
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华钩藤与无柄果钩藤显微结构对比研究
目的:为两种钩藤的药材鉴别和质量标准制定提供理论依据。方法:采用显微结构特征鉴别法。结果:无柄果钩藤钩的木质化程度较高,而且髓部略呈“十”字形,而华钩藤木质部不发达;无柄果钩藤的茎和钩髓部都有明显厚壁细胞散在,而华钩藤无此特征;无柄果钩藤叶表面非腺毛近无,而华钩藤叶表面有少量单细胞非腺毛。粉末中华钩藤的非腺毛极少,而无柄果钩藤较多;华钩藤粉末木化程度较高,以具缘纹孔导管为主。结论:上述特征可作为该药材显微鉴别的依据。
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无柄果钩藤植物不同部位钩藤碱含量分析
目的 分析广西不同产地无柄果钩藤植物不同部位钩藤碱含量,为充分利用无柄果钩藤植物资源提供试验依据方法 应用HPLC分别对10批不同产地无柄果钩藤植物的带钩茎枝、无茎枝钩、无钩茎枝、主杆和叶的钩藤碱进行含量测定.色谱柱:Gemini C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:甲醇-水(含0.002 mol·L-1三乙胺,冰乙酸调pH至7.5)(64:36),流速:1.0 ml·min-1,检测波长:254 nm.结果 10批无柄果钩藤植物中的上述各部位均可检出钩藤碱成分,整体上带钩茎枝、无茎枝钩、无钩茎枝和主杆各部位含量相近,叶的含量低于上述4个部位的含量.结论 无柄果钩藤植物的不同部位均具有进一步开发利用的价值,应当物尽其用.
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广西不同产地及不同时期无柄果钩藤中钩藤碱含量分析
目的:评价广西不同产地无柄果钩藤药材质量和确定药材佳采收期.方法:应用HPLC测定15批不同产地和3个产地不同时期无柄果钩藤钩藤碱的含量.色谱柱:Gemini C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相:甲醇-水(含0.002 mol/L三乙胺,冰乙酸调pH至7.5)(64∶36),流速:1.0 mL/min,检测波长:254 nm.结果:广西不同产地无柄果钩藤药材中钩藤碱含量有一定差异;不同时期无柄果钩藤中钩藤碱的动态积累差异不大.结论:广西不同产地无柄果钩藤药材大部分质量较好,但质量仍参差不齐;无柄果钩藤药材一年四季均可采收可能是合理的.