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  • 酵母前体饲喂验证植物次生代谢产物功能基因方法学初探

    作者:刘金凤;黄鹏;卿志星;刘秀斌;柳亦松;唐其;曾建国

    目的 筛选效率高的酵母前体饲喂方式,为在酵母中进行基因功能验证提供方法学指导.方法 首先构建含PsP6H基因和PsCPR基因重组酵母工程菌,然后用4种不同的方法进行前体饲喂,后质谱检测下游产物二氢血根碱来确定优方案.结果 优的前体饲喂方法是将酵母工程菌经过半乳糖诱导31h后在pH 8.0的Tris EDTA溶液中孵育24 h.结论 不同的前体饲喂方式对酵母工程菌下游产物产生不同影响,经优化后的酵母前体饲喂方法较稳定,重复性好.

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