首页 > 文献资料
-
小鼠心室乳头肌承载机械负荷后的SOCS1表达研究
目的 研究细胞因子信号抑制物1(SOCS1)在超负荷心室乳头肌中的表达,了解其在心室乳头肌承载负荷后结构重建中的表达特点以及在影响细胞信号转导的立方水母毒素-1(CfTX-1)预处理作用下的生物力学特性.方法 昆明小鼠腹主动脉-静脉穿刺造瘘(n=5),2周后取心室乳头肌匀浆后提取总蛋白,另设正常组(n=5)施假手术作对照.离体培养则采用正常小鼠左心室乳头肌(n=20),负荷培养组心室乳头肌倍比牵拉固定于硅胶板,松弛培养组不予牵拉负荷,两组内均另设一个组添加SOCS1质粒转染.上述各组心室乳头肌均于培养液中37℃培养3 d后,匀浆并提取总蛋白,10％十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离总蛋白,以含SOCS1的23 ku条带为目标条带,计算机图像法测其积分光密度(IOD)值.采用蛋白质印迹法(Western Blot)检测SOCS1蛋白的表达,并测其印迹IOD值.采用微分定位器牵拉造瘘小鼠心室乳头肌至初始负荷为1 g,待稳定后顺序瞬间牵拉15 mm,观察第1次及第5次牵拉时的被动张力特性曲线,计算心室乳头肌在任氏液及CfTX-1预处理后的大被动张力(PTmax)和大被动张力下降速度(DV).结果 造瘘组心室乳头肌总蛋白中23 ku条带及SOCS1印迹IOD值均高于正常组,差异均具有统计学意义(均P<0.01).松弛转染培养组心室乳头肌总匀浆液中23 ku条带的IOD值显著高于负荷转染及负荷非转染培养组,差异均具有统计学意义(均P<0.01),且后两组间差异无统计学意义(P>0.05).负荷转染培养组心室乳头肌总匀浆液以及胞核匀浆液中SOCS1印迹IOD平均值均高于负荷非转染培养组和松弛转染培养组,差异均具有统计学意义(均P<0.01).造瘘组心室乳头肌的PTmax和极限PTmax均低于正常组,DV高于正常组,而极限DV低于正常组,差异均具有统计学意义(均P<0.01).结论 SOCS1的表达对长度负荷较为敏感,其作为超负荷敏感信号在改善心肌适应性、保护心肌结构及维护舒缩功能方面具有更深层的积极作用.CfTX-1对改善心室乳头肌顺应性也具有积极作用.
关键词： 机械负荷 心室乳头肌 牵拉培养 转染表达 细胞因子信号抑制物1
