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负载纳米粒子的壳聚糖单向缓释膜的制备及理化性质研究
目的 将壳聚糖纳米粒子与壳聚糖单向缓释膜结合,制备得到负载纳米粒子的壳聚糖单向缓释膜,并对其理化性质及体外释放性能进行研究.方法 采用反相乳化法制备壳聚糖纳米粒子,采用流延法制备壳聚糖单向缓释膜,通过透射电镜、扫描电镜和粒度分析仪检测纳米粒子的形态、大小及壳聚糖单向缓释膜表面形貌,MTT法检测其生物相容性,荧光显微镜观察纳米粒子在壳聚糖单向缓释膜中的分布,体外释放实验检测单向缓释膜的缓释性能.结果 4种水溶性壳聚糖纳米粒子呈球状且粒径均一,其中类透明质酸壳聚糖纳米粒子平均粒径为(255.40±39.10) nm,具有好的生物相容性及缓释性能.壳聚糖单向缓释膜外层膜致密,内层膜疏松,纳米粒子在内层膜中均匀分布,体外释放实验证明,壳聚糖单向缓释膜为单向释放,且具有较好的缓释性能.结论 包载纳米粒子的壳聚糖单向缓释膜具有较好的缓释和单向控释性能,在生长因子类药物载体方面有一定应用前景.
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壳聚糖纳米粒子携带反义增殖细胞核抗原寡核苷酸抑制血管移植后内膜增殖的实验研究
目的 探讨壳聚糖纳米粒子携带反义基因在血管外科领域中的应用.方法 雄性SPF级SD大白鼠54只,体重450～600 g,随机分为实验组和对照组(n=27).实验组取右侧颈静脉、颈动脉吻合口段灌注携带增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)的反义寡核苷酸(antisens oligo deoxy nucleotides,ASODN)粒子后,移植至同侧颈动脉;对照组用同样方法灌注生理盐水.取造模后血管通畅的48只大白鼠(n=24)分别于第1、2、3、4周超声多普勒监测血流动力学,取标本行免疫组织化学染色、Western blot蛋白印迹检测、血管壁组织病理变化检测等.结果 两组的血栓形成率差异无统计学意义(P＞0.05).在4周的观察期内,代表增殖的PCNA蛋白印迹条带显示:实验组移植静脉、吻合口的浓度较对照组低.术后1、2、3及4周,实验组移植静脉PCNA阳性细胞指数分别为0.13%±0.11%,0.79%±0.28%,0.45%±0.29%,0.43%±0.25%,吻合口分别为1.90%±0.84%,2.11%±0.98%,2.48%±0.77%,2.17%±0.36%,较对照组明显减少(P＜0.05);实验组移植静脉及吻合口的空腔面积分别为88.71±16.96、95.98±21.44、88.48±32.81、97.86±34.11 μm2和41.49±3.34、45.15±11.65、46.27±8.90、51.62±8.85 μm2,均较对照组大(P＜0.05),实验组移植静脉、吻合口的内膜面积/中膜面积分别为22.73%±3.11%、32.40%±4.55%、45.14%±3.19%、45.70%±5.01%和41.49%±3.34%、45.15%±11.65%、46.27%±8.90%、51.62%±8.85%,均较对照组小(P＜0.05).大血流速度比较,两组在第1周血流大速度相似,后3周出现不同变化.对照组静脉移植段和吻合口的大流速逐渐增加,在第3周达到高,至第4周时降低;实验组静脉移植段和吻合口大流速逐渐降低,在第3周达到低,至第4周时升高.第4周实验组和对照组移植静脉段和吻合口大流速均接近.各时间点两组内比较差异有统计学意义(P＜0.05),组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 壳聚糖纳米粒子携带PCNA-ASODN能有效抑制血管移植后内膜细胞增殖,从而抑制新生内膜过度增厚.
