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血红蛋白为基础的红细胞代用品以[p(O2)]50测定方法的研究
目的 对血红蛋白(Hb)为基础的红细胞代用品以人脐带血Hb及其聚合Hb氧合曲线的测定方法进行研究.方法 Hb与氧结合的能力通常用氧分压[p(O2)]和Hb氧饱和度(Y)构成的氧合曲线来表示.制备人脐带血纯化Hb、聚合Hb,测定高铁Hb浓度,用高效液相色谱(HPLC)测定各种Hb浓度,做氧合曲线.结果 改进检测方法和装置后,得到S形的氧合曲线,测得人脐带血纯化Hb样品的[p(O2)]50为(0.934 ± 0.009) kPa[(7.17 ± 0.07) mmHg],5′-磷酸吡哆醛(PLP)修饰的聚合Hb [p(O2)]50为(2.727 ± 0.033) kPa[(20.50 ± 0.25) mmHg].结论 该方法设备简单、操作方便、结果可靠、重复性和重现性较好.
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DBBF修饰提高人脐带血红蛋白P50的理化条件研究
目的 提高人脐带血血红蛋白(HbF)P50以使血红蛋白(Hb)能更好地向组织供氧.方法 采用双(3,5-二溴水杨基)延胡索酸酯(DBBF)修饰人脐带血血红蛋白(HbF)提高P50到血液生理值96 torr,以影响修饰反应溶液的pH、HbF浓度以及DBBF与HbF反应的摩尔比为3个主要条件,血氧分析仪测定氧合曲线得到P50和希尔系数,按三者各自较佳反应条件试验得到DBBF修饰后HbF优工艺,检测其所得样品P50、希尔系数及波尔效应等.结果 Hb的底物浓度为7g/dL,反应溶液pH为8.00,DBBF与HbF反应的摩尔比为2∶1,能提高HbF的P50接近血液生理值26 torr.结论 筛选修饰工艺中反应溶液的pH、Hb浓度及DBBF与HbF反应的摩尔比等3个条件,可使DBBF修饰提高HbF的P50,有助于修饰后HbF能更好地向组织供氧.
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脐带血与成人血波尔效应及协同效应差异的研究
目的 探讨脐带血与成人血波尔效应及协同效应的差异.方法 收集新鲜脐带血与成人血各3份,用氧平衡曲线仪,按先检测氧离曲线,加10μl 1 mol/L HCl后继续检测氧离曲线,加15μl 1 mol/L NaOH后再次检测氧合曲线的顺序,检测各样本的氧离(合)曲线,并读取各样本氧离(合)曲线的P50与希尔系数(HC).比较两组样本P50的变化值(△P50)与变化率(％△P50).根据各组均值用希尔方程绘制曲线比较移动幅度.结果 在HCl及NaOH作用下,脐带血P50、HCHCI、HCNaOH、△P50HCI、％△P50HCI、△P50NaOH、％△P50NaOH均显著低于成人血(P＜0.05),氧离(合)曲线移动幅度不及成人血.结论 在酸(碱)环境下,脐带血氧亲和力高于成人血,而波尔效应及协同效应均差于成人血.
