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HSP70基因转染对缺氧-再复氧肠上皮细胞生长能力影响的研究
目的:研究重组腺病毒介导的热休克蛋白70转染对缺氧再复氧损伤后肠上皮细胞生长能力的影响.方法:将重组含人全长HSP70基因的腺病毒转染体外培养的肠上皮细胞株I-EC6,检测转染细胞HSP70的mRNA表达水平.I-EC6细胞经缺氧再复氧处理后,对未转染组,转染24 h、48 h及72 h组细胞的细胞活力、生长曲线、增殖能力进行检测分析.结果:腺病毒转染组细胞HSP70 mRNA表达呈阳性.经缺氧再复氧处理后,I-EC6转染细胞活力较未转染组活力明显增强(P<0.01),生长能力提高(P<0.05),分裂指数增高(P<0.05).结论:重组腺病毒介导的HSP70转染可增强肠上皮细胞生长及增殖能力,从而保护其抵抗缺氧再复氧损伤.
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不同缺氧时间对神经细胞中外源性HSP70表达的影响
目的:探讨不同缺氧时间刺激对神经细胞中外源性HSP70基因表达的影响.方法:采用重组腺病毒vAd-HSP70感染体外原代培养的神经细胞,48h后给予感染细胞不同缺氧时间(缺氧0h,0.5h,1h,2h,3h,4h)刺激,再复氧处理后,用RT-PCR和Westernblotting检测重组腺病毒介导的HSP70基因在神经元和胶质细胞中的转录表达.结果:重组腺病毒vAd-HSP70感染的神经细胞可检测到外源性HSP70基因的转录表达.经缺氧再复氧处理后,随着缺氧时间延长,HSP70转录水平和蛋白表达都增加,缺氧1h时高(1.1539±0.0315,0.9699±0.0023),其次是缺氧2h时(1.0398±0.0723,0.9622±0.0026),随后依次降低,缺氧4h组(0.7477±0.0328,0.9335±0.0034)HSP70表达低,与其他各组比较有统计学意义(P<0.05).结论:缺氧2h内给予神经细胞再复氧处理外源性HSP70表达水平较高,有利于神经细胞功能的恢复.
