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促甲状腺素受体抗体检测技术的回顾与展望
促甲状腺素受体抗体(TRAb)与多种自身免疫性甲状腺疾病的发病密切相关,是临床诊断这些疾病的重要指标.目前已建立了两种较为成熟的TRAb检测技术,即根据TRAb可竞争抑制125I标记促甲状腺素(TSH)与受体结合的原理设计的放射受体分析法(RRA)和根据TRAb可模拟或阻断TSH作用影响体外细胞系cAMP产生的原理设计的生物分析法.RRA法简单易操作,灵敏度和特异度也比较高,在临床上应用广泛;而生物分析法则能够进一步区分甲状腺刺激性抗体和甲状腺刺激阻断性抗体,成为TRAb检测技术发展的重大突破.本文将对上述两种方法不同的诊断价值、局限性以及临床实用性作一综述.
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045 第二代TSH受体抗体的测定对Graves病的诊断有更高的敏感性
[英]/Costagliola S…//J Clin Endocrinol Metab .1999，84.-90～97 报道了一种使用人重组促甲状腺激素受体(TSHR)的第二代TSHR抗体的检查方法，它对Graves病的诊断有更高的敏感性。该方法依据Graves病人血清中的TSHR 抗体与促甲状腺素(TSH)竞争TSHR，通过测量已结合的125I 或吖啶酯标记的牛TSH的量来间接反映Graves病人血清中TSHR抗体的量。 对象和方法 将328例Graves病患者分为3组：第1组86人，为未经抗甲状腺药物治疗或治疗不超过4周的患者；第2组126人，接受治疗超过4周的患者；第3组116人，已缓解的患者。另520例对照分成4组：包括54例桥本甲状腺炎，69例非甲状腺性自身免疫病，115例甲状腺肿及282例健康对照。方法如下：①将含有人TSHR(hTSHR)cDNA基因和抗新霉素基因的二顺反子转染白血病K526细胞，培养该细胞后，从中提取hTSHR。②将羊抗鼠的单克隆抗体(moAb BA8)包被在试管中，然后加入提取的hTSHR，冻干4℃保存(moAbBA8仅与TSHR结合，而不干扰自身抗体或TSH的结合)。③从牛垂体中纯化出高亲和力的bTSH，用125I或吖啶酯标记。④分别以传统的放射受体分析法(RRA)及新法测量TSHR抗体：RRA方法依据说明书，而包被试管(CT)法，则是在含moAbBA8和hTSHR的试管中加入病人血清，然后再加入125I 或吖啶酯标记的bTSH，用γ计数器或荧光测量器来检查。统计分析用Yates校正χ2检验和Mann-Whitney秩和检验。 结果 CT法的特异性为99.6％，敏感性为99.8％，而传统方法的特异性为99.6％，敏感性为80.2％。在3组Graves病人中，CT法比传统方法更敏感(P＜0.05)，而在4组对照组间，这些方法没有明显不同(χ2=1.62，P=0.23)。 讨论 结果显示，在3组Graves病患者中，在特异性相同的条件下，CT检查方法比传统的检查方法更敏感。由于TRAb的活性与Graves病的复发有关，故使用更敏感的第二代TSHR抗体的测定方法可以很好地预示Graves病的复发与缓解。(戴亚丽摘 施秉银校)
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两种促甲状腺激素受体抗体检测方法的临床应用比较
目的:探讨促甲状腺激素受体抗体(TRAb)在自身免疫性甲状腺疾病诊断中的临床价值;对放射受体分析法(RRA)与酶免疫法检测结果进行分析. 方法:采用RRA法和酶免疫法,测定Graves病(GD)患者、桥本甲状腺炎(HT)患者和正常人血清TRAb的活性. 结果:用RRA测定,GD和甲低患者血清TRAb,阳性率分别为85.7%和64.3%,与正常对照组有显著性差异(P<0.01).用酶免疫法测定GD和甲低患者血清TRAb,阳性率为25.0%和21.4%,与正常对照组无显著性差异(P>0.05). 结论:血清TRAb的检测有助于GD的诊断.RRA与酶免法相比,具有灵敏度高、特异性好等优点,适合临床应用.
关键词： 促甲状腺激素受体抗体 放射受体分析法 Graves病 -
促甲状腺激素受体抗体和甲状腺过氧化物酶抗体检测对Gravse病的诊断意义
目的 探讨促甲状腺激素受体抗体(Thyrotropin Receptor Antibody,TRAb)和甲状腺过氧化物酶抗体(Thyroid Peroxidase Antibody,TPOAb)测定对格雷夫斯病(Gravse病,GD)的诊断价值.方法 用放射受体分析法(Radio Receptor Assay,RRA)对75例初诊GD患者,99例未控制的GD患者,112例经抗甲状腺药物治疗缓解的GD患者,23例GD复发患者,56例健康体检者分别进行TRAb和TPOAb的测定.结果 GD初诊组、未控制组、复发组TRAb水平和阳性率均显著高于GD控制组(P＜0.05),GD控制组TRAb水平和阳性率显著高于正常对照组(P＜0.05),差异均有统计学意义.GD患者各组TPOAb水平和阳性率均显著高于正常对照组(P＜0.05).结论 检测血清TRAb和TPOAb水平在GD发病、进展及复发具有重要的临床意义.
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聚乙二醇化重组人生长激素的性质及活性
目的研究聚乙二醇化重组人生长激素的性质及活性.方法通过分子筛高效液Size exclusion HPLC)、毛舷细管等电聚焦(cIEF)、圆二色谱(cD)以及荧光光谱等方法检测单聚PEG-GH的纯度、等电点、二级结构以及分子构象;采用妊娠兔肝细胞放射受体分析法(RRA)检测单聚PEG-GH的体外受体亲和力,采用未成年去垂体大鼠体重增加法检测体内生物活性.结果分子筛高效液相图谱上仅出现一个峰,表明样品纯度很高,等电点范围为5.1～5.2,与未修饰的rhGH的等电点相一致;CD谱与荧光光谱均表明单个mPEG-ALD的修饰对rhGH的二级结构以及分子构象没有明显影响;与未修饰的rhGH相比,单聚PFG-GH体外受体亲和力明显降低;但体内作用时间更长,且更加有效.结论此结果为进一步研究和开发长效重组人生长激素提供了理论依据.
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舟山眼镜蛇毒蕈碱样多肽的分离及其对M胆碱受体的激动效应
目的 从舟山眼镜蛇Naja atra蛇毒中分离毒蕈碱样多肽,探讨其与M胆碱受体的关系.方法 应用分子筛凝胶Sephadex G-50、Sephadex G-100、离子交换凝胶CM-Sepharose F.F.分离纯化目的组分;SDS-PAGE鉴定目的蛋白的纯度并测定其相对分子质量;放射受体分析法测定该物质与大鼠脑组织M胆碱受体的亲和力;选用离体豚鼠回肠纵行肌观察其对M胆碱受体的效应.结果 从舟山眼镜蛇蛇毒中获得一种与大鼠脑组织M胆碱受体具有高亲和力的多肽(Ki为10.12 nmol/L),其相对分子质量约14 kD.该多肽可引起离体豚鼠回肠纵行肌收缩,此效应可被阿托品阻断.结论 舟山眼镜蛇蛇毒中获得与M胆碱受体具有高亲和力的多肽,该多肽对M胆碱受体具有激动效应.
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正常中国人心血管系统内皮素受体及其亚型的分布
目的:用放射受体分析法测定了正常中国人意外死亡者心脏各种部位心升主动脉起始段内皮素受体及其亚型的分布.方法:用[I125]-ET1结合物及αF-PCR.同位素掺入,自然影方法从蛋白质和mRNA二个水平观察内皮素多体以变.
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Graves患者血清TRAb检测的临床意义
目的:探讨促甲状腺受体抗体(TRAb)的检测在Graves病诊断、疗效观察等方面的意义.方法:用放射受体分析法检测Graves病患者及正常对照组的血清TRAb.结果:92例未经治疗组、76例治疗控制组和40例正常对照组的TRAb结果分别为(32.52±25.23)、(11.91±7.62)和(4.38±2.09)U/L,未经治疗组明显高于正常对照组和治疗控制组,未经治疗组和治疗控制组的TRAb阳性率分别为88.0%和47.3%.结论:TRAb活性的高低在判断Graves患者的病情和疗效方面有重要意义.
