有毒动植物中毒及预防

有毒动植物中毒,包括将有毒食物与无毒食物混淆而误食,或食用方法不当而引起人类中毒,如河豚鱼含有河豚毒素、毒蕈含有毒蕈碱等.还有些食品,在一般情况下,并不含有毒物质,但由于贮存不当,则可形成某种有毒物质,如马铃薯发芽后可产生龙葵素,食用后也可引起中毒.因此,对于有毒动植物及预防食物中毒加以了解,可以让我们吃得更加安全、健康.

1.11胃肠平滑肌细胞的离子通道及其调制

膜片箝技术的问世促进了离子通道研究的飞速发展.但是消化道平滑肌细胞离子通道的研究相对滞后于神经和心肌等其它可兴奋细胞.1离子通道的分类胃肠平滑肌细胞的离子通道有三种类型:①电压门控通道:电压门控的钠通道、钾通道、钙通道等;②配体门控通道:乙酰胆碱受体通道、毒蕈碱受体通道、谷氨酸受体通道等;③机械门控通道:牵张敏感通道和容积敏感通道等.

毒蕈碱型乙酰胆碱受体的鼻黏膜效应

副交感神经参与鼻黏膜腺体和血管的功能调节.当各种异物、细菌、病毒或真菌侵入机体时, 鼻黏膜微环境发生改变, 这种变化刺激副交感神经释放乙酰胆碱.后者与调节鼻腺体和血管的毒蕈碱型乙酰胆碱受体 (M-ChR) 结合,导致鼻炎流涕和鼻塞.这种整体调节反射对下呼吸道起重要的防御性保护作用. 目前发现五种M-ChR亚型(M1-至M5- ChR),鼻黏膜有M1-至 M3- ChR亚型.高密度的M1-和M3- ChR共存于黏膜下腺黏液和浆液细胞, M3-ChR主要分布于血管.M-ChR对鼻腺体和血管的直接调节作用是通过细胞内腺苷酸环化酶和磷酯酶C激活.

盐酸戊乙奎醚用于麻醉前用药的临床体会

盐酸戊乙奎醚(长托宁)由成都力思特制药股份有限公司生产,是一种新型长效抗胆碱药物,具有中枢及外周抗毒蕈碱(M)和抗烟碱(N)样作用,能选择性作用于M1和M3亚型,而对M2亚型(主要分布在心肌和神经突触前膜)无明显拮抗作用,与传统的抗胆碱药物阿托品相比较,长托宁具有较强而持久的腺体分泌作用,持久的中枢镇静和外周肌松协同作用,心率双向调节作用.

下尿路梗阻伴膀胱过度活动症药物治疗的研究进展

在临床上，下尿路梗阻导致下尿路症状的患者越来越普遍；而在男性中，导致下尿路梗阻为常见的疾病便是前列腺增生。临床上治疗一般予以抗毒蕈碱药物如托特罗定、索利那新等。而对于那些同时伴有膀胱过度活动症（overactive bladder，OAB）的患者而言，抗毒蕈碱药物则可能减弱膀胱逼尿肌的收缩力，从而引起尿潴留。因此，下尿路梗阻伴OAB的患者临床上究竟应如何予以药物治疗，这一直是临床医师经常面对而又困惑的问题。本文将对下尿路梗阻伴OAB的药物治疗作一综述，旨在为临床医师更好地治疗此类疾病提供参考。

改良ELISA法检测3型毒蕈碱乙酰胆碱受体抗体的应用价值

慢性阻塞性肺疾病患者肺组织胆碱能M受体及其亚型的变化

目的了解慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)患者肺组织M受体及其亚型的变化。方法采用肺手术切除标本，分为COPD组和对照组，进行放射配体结合饱和实验和竞争抑制实验。结果对照组与COPD组M受体密度分别为(64±10) fmol/mg*protein和(42±18) fmol/mg*protein，COPD组明显低于对照组(P<0.01)，平衡解离常数(KD)差异无显著性。对照组M1受体比例(67.2±2.7)%低于COPD组(74.2±4.8)%(P<0.05)；对照组M2受体比例(29.3±1.7)%高于COPD组(16.8±4.4)%(P<0.01)；对照组M3受体比例(3.6±2.9)%低于COPD组(9.3±4.1)%(P<0.05)。结论 COPD患者M受体密度减低，但M1和M3受体比例增加，M2受体比例减少，M受体亚型分布的变化是COPD患者的重要的病理生理改变。

慢性阻塞性肺疾病的气道毒蕈碱M受体变化与抗胆碱治疗的研究

慢性阻塞性肺疾病(COPD)支气管阻塞的重要病理生理机制包括由迷走神经控制的黏液高分泌以及由胆碱能机制诱发的支气管平滑肌张力的增加,因此,抗胆碱治疗已成为其第一选择.

老年扩张型心肌病与心脏β1和M2受体自身抗体的研究

目的探讨心脏β1和M2受体的自身抗体在老年扩张型心肌病发生、发展中的临床意义.方法以细胞外第二环表位肽段的合成肽作为抗原,应用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术,检测32例老年扩张型心肌病(senile dilat～ed cardiomyopathy,SDCM)、26例非老年扩张型心肌病(non-senile DCM,NSDCM)和20名正常对照的老年人.结果SDCM组心脏β1受体自身抗体的阳性率为28.1%(9/32),NSDCM组为53.8%(14/26),对照组为15.0%(3/20,P＜0.05);SDCM组心脏M2受体自身抗体的阳性率为31.3%(10/32),NSDCM组为57.7%(15/26),对照组为20.0%(4/20,P＜0.01);SDCM组心功能Ⅱ～Ⅲ级的两种抗体阳性率及抗体滴度与心功能Ⅳ级比较无明显差异.NSDCM组心功能Ⅱ～Ⅲ级的阳性率及抗体滴度明显高于心功能Ⅳ级.结论心脏β1与M2受体自身抗体的产生与SDCM相关,但相关程度低于NSDCM组;提示在SDCM患者心功能状态多属晚期的病程中,心脏β1和M2受体自身抗体的产生,可能是病理性免疫机制的参与和生理性老化细胞凋亡的共同作用.

随机、双盲安慰剂对照研究评价抗毒蕈碱制剂Solifenacin治疗膀胱过度活动症的疗效

可视法脑片膜片钳技术观察大鼠前庭内侧核神经元毒蕈碱样胆碱能受体的电生理特性

目的 建立大鼠前庭内侧核脑片可视法膜片钳实验技术,探讨前庭内侧核神经元毒蕈碱样胆碱能受体(muscarinic cholinergic receptor,M受体)介导电流的生物学特性.方法 选用15只Wistar大鼠用于制备前庭内侧核脑片,应用红外微分干涉相差(infrared differential interference contrast,IR-DIC)技术结合电荷耦合式感光成像(charge coupled device-camera,CCD-camera)系统,在可视法膜片钳全细胞记录模式下对20个正常功能状态的前庭内侧核神经元M受体的通道电流性质进行观察和分析.结果 可视法脑片膜片钳技术可对神经元直接进行准确定位和功能状态的筛选.前庭内侧核神经元给予毒蕈碱后电流-电压(I-V)曲线斜率增加,毒蕈碱引发效应电流的反转电位为(-88.4±4.9)mV((-x)±s,下同),表明M受体去极化效应是由钾电导的减少所介导;M受体介导电流的电压敏感性测试显示:毒蕈碱引发的效应曲线呈线性关系,反转电位为(-86.7±3.5)mV,提示毒蕈碱所阻断的钾电流为非电压敏感性的漏钾电流.结论 可视法脑片膜片钳实验技术克服了盲法脑片膜片钳技术的缺陷,提高了神经元封接的成功率.通过对前庭内侧核神经元M受体通道电流性质的分析,进一步揭示毒蕈碱样胆碱能机制的兴奋性调节作用,为临床抗胆碱药物的应用提供新思路.

环戊硫酮治疗干眼的临床疗效评价

目的 探讨口服环戊硫酮对干眼的治疗效果.方法 采用前瞻性随机双盲对照研究方法,将2006年12月至2008年8月在厦门大学附属厦门眼科中心眼表疾病专科门诊确诊为干眼的80例患者(80只眼)随机分为两组:口服环戊硫酮组40例、口服维生素C安慰剂对照组40例,各组依评定标准再分为轻度干眼和中重度干眼两个亚组.两组均加用0.05%羧甲基纤维素钠眼液滴眼治疗;分别在治疗前和治疗后3、7、28 d各时间点检测并评定患者干眼主观症状、视力、角膜荧光素染色(F1)、泪膜破裂时间(BUT)及基础泪液分泌试验(SⅠT),治疗前后及两组的各亚组之间均进行重复测量多因素方差分析和样本均数或中位数差值分析.结果 除流泪和眼红外,治疗7 d后,两组的轻度干眼亚组其他干眼症状、F1染色、BUT及SⅠT值均较治疗前有所改善.治疗7 d后,除流泪和眼红外,仅环戊硫酮组中重度干眼亚组的样本均数差值[0.96(视疲劳)、1.26(干涩感)、0.82(异物感)、1.28(烧灼感)、1.05(畏光)、1.48(疼痛)],以及样本中位数差值[0.30(视力)、4.00(F1染色)、5.00(BUT)、5.00(SⅠT)],均较治疗前明显改善[F=15.30(视疲劳),15.68(干涩感),13.56(异物感),20.91(烧灼感),18.90(畏光),27.22(疼痛),10.54(视力),188.21(F1染色),261.76(BUT),269.05(SⅠT);均P<0.05].在全部28 d观察期间内,安慰剂组中重度干眼亚组的样本均数差值[0.10(视疲劳)、0.16(干涩感)、0.09(异物感)、0.38(烧灼感)、0.24(畏光)、0.36(疼痛)、0.23(眼红)],以及样本中位数差值[0.10(视力)、0.50(F1染色)、0.50(BUT)、0.50(SⅠT)],均较治疗前无明显改善[F=1.76(视疲劳),1.61(于涩感),1.02(异物感),2.39(烧灼感),2.42(畏光),2.73(疼痛),2.55(眼红),1.46(视力),2.35(F1染色),2.90(BUT),2.76(SⅠT);均P>0.05].环戊硫酮组SⅠT值较安慰剂组改善更为明显(F=13.77,P<0.05),SⅠT值达正常范围.结论 环戊硫酮可显著改善泪腺功能尚存的中重度十眼的症状和体征,具有临床应用价值.

大鼠不稳定膀胱与毒蕈碱受体亚型密度关系的实验研究

为了探讨毒蕈碱受体(MR)亚型密度变化与不稳定膀胱发生之间的关系,建立不稳定膀胱大鼠模型,采用RT-PCR方法测定不稳定膀胱及对照组逼尿肌MR亚型密度.结果显示,对照组和不稳定膀胱组逼尿肌组织均含有m2RNA和m3RNA,没有检测到m1、m2和m3亚型的mRNA.正常对照组膀胱逼尿肌m2RNA含量(1.67±0.42)明显高于m3RNA(0.64±0.19),两者之比约2.59:1;不稳定膀胱逼尿肌中m2和m3受体密度均增加,分别为(2.03±0.65)和(1.53±0.46),m3增加更明显(P＜0.01),两者比值显著缩小,约1.4:1.提示不稳定膀胱的产生与MR亚型上调及M2R、M3R亚型之间的比例失调有关.

M受体-G蛋白信号转导途径研究进展

毒蕈碱乙酰胆碱受体(mAChR)是G蛋白偶联受体超家族中的一员,具有该家族特征性的结构和信号转导方式.GTP结合蛋白(G protein)是一类具有GTP酶活性的蛋白质,由α、β和γ三个亚基构成.mAChR可以与G蛋白偶联,引起GTP与et亚基结合,导致Gα与Gγβ分离.近年来发现,不但Gα-GTP可以调节效应分子,Gγβ,也可以调节许多效应分子如腺苷酸环化酶、磷脂酶c、K+通道、ca2+通道、MAPK和受体激酶等,介导一系列的生物学效应,在信号转导过程中发挥重要的作用.

丙泊酚静脉输注对老年大鼠海马内M受体和NMDA受体的影响

目的:观察静脉持续输注丙泊酚(P)于给药后不同时间对老年大鼠大脑海马组织中胆碱能毒蕈碱样受体(M-R)和N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NMDA-R)的影响.方法:在18月龄雄性或雌性SD大鼠,尾静脉注射丙泊酚10 mg·kg-1诱导麻醉,然后恒速输注25或45 mg·kg-1·h-1维持2 h或4 h;于丙泊酚给药后1 d(近期影响组)或6,12 d(远期影响组)急性处死大鼠,分离脑组织海马,用放射配体结合分析法测定M-R与[3H]-QNB以及NMDA-R与[3H]-MK-801的特异性结合量.结果:近期影响组和远期影响组分别与其对照组比较,M-R与[3H]-QNB特异性结合量及NMDA-R与[3H]-MK-801特异性结合量均无统计学差异.结论:丙泊酚静脉给药对老年大鼠海马M-R与[3H]-QNB特异性结合量及NMDA-R与[3H]-MK-801特异性结合量无近期和远期影响.

东莨菪碱抗抑郁研究进展

抑郁症往往与胆碱能系统的异常紧密相关.长期以来不断有研究人员尝试通过改变胆碱能系统活动来逆转人或动物的抑郁症状.近发现,在抑郁症患者中静脉注射毒蕈碱型乙酰胆碱受体拮抗剂东莨菪碱4.0 μg·kg-1可以起到快速、强劲且持续的抗抑郁作用.本文综述了东莨菪碱抗抑郁的研究进展以及若干解释其抗抑郁效应的假说或机制.

不同配体对m5乙酰胆碱受体-G蛋白亚单位G11融合蛋白表达和功能的影响

目的制备毒蕈碱乙酰胆碱受体m5亚型与G-蛋白亚单位G11(m5AChR-G11)融合蛋白,探索m5AChR与G11之间的耦联功能、相互作用及其影响因素.方法两步PCR法建立m5AChR与G11融合cDNAs,并在Sf9细胞内表达.[3H]QNB和[35S]GTPγS结合实验检测m5AChR与G11融合蛋白的功能.结果m5AChR-G11融合蛋白的表达水平为(60.4±2.0)nmol·g-1膜蛋白.不同配体存在使融合蛋白中G11与GDP的亲和力发生变化.乙酰胆碱(ACh)、卡巴胆碱、毛果芸香碱、异丙铵、异丙嗪及阿托品存在时,GDP的IC50值分别为135,63,182,4.1,8.9和5.9 μmol·L-1,无配体存在时,GDP的IC50值为23.4 μmol·L-1.结论杆状病毒Sf9细胞系统表达的m5AChR-G11融合蛋白具备m受体配体结合特性和组分间耦联的功能.m5AChR-G11融合蛋白对GDP亲和力取决于m受体配体的性质,分析GDP的亲和力的变化有利于筛选和鉴别m5受体亚型特异性配体.

牵拉对毒蕈碱受体和5-羟色胺受体介导大鼠离体胃平滑肌收缩功能的影响

目的：研究牵拉对毒蕈碱（m）受体及5-羟色胺（5-HT）受体介导大鼠离体胃平滑肌收缩功能的影响。方法大鼠离体胃底、胃体、胃窦、贲门和幽门环行肌标本分别给予1.0，1.5，2.0，2.5和3.0 g 的前负荷，除胃窦环肌给予单浓度卡巴胆碱（ CCh）（0.3μmoI·L-1）外，其余标本采用累积给药法给予 CCh 0.001~30μmoI·L-1，5-HT 0.0001~30μmoI·L-1，记录收缩反应。结果大鼠胃底、胃体和幽门环肌在1.0 g前负荷下，CCh 诱发收缩反应的-Log EC50值大，-Log EC50值随前负荷升高而显著减小（P﹤0.05，P﹤0.01）；5-HT诱发胃底环行肌收缩反应结果类似。与1.0 g前负荷相比，3.0 g 前负荷时 CCh 和5-HT 诱发贲门环肌收缩反应的 Emax 值分别增大117.4%和75.7%；5-HT 诱发胃体环肌收缩反应的 Emax 值亦增大115.9%。CCh 诱发各环行肌收缩的 Emax值（g）分别为：贲门10.453±2.956（3.0 g 前负荷）、胃底13.878±2.618（2.5 g 前负荷）、胃体10.244±1.843（2.5 g 前负荷）、幽门2.585±1.098（2.5 g 前负荷）。5-HT 诱发各环肌收缩的 Emax值（g）分别为：贲门4.363±1.705（3.0 g 前负荷）、胃底3.931±0.615（3.0 g 前负荷）、胃体3.161±0.680（3.0 g 前负荷）。结论0.5 g 或1.0 g 前负荷不适于研究 m 受体和5-HT 受体介导的大鼠离体贲门、胃底、胃体和幽门环肌的收缩反应，2.0 g 前负荷可能是研究 m 受体和5-HT 受体介导大鼠离体胃环肌收缩反应的理想条件。

腹侧被盖区注射M5受体反义寡脱氧核苷酸对大鼠海洛因敏化的抑制作用

目的 观察中脑腹侧被盖区(VTA)毒蕈碱受体亚型5(M5)在海洛因诱导大鼠行为敏化中的作用.方法 Sprague-Dawley成年雄性大鼠sc海洛因0.25 mg·kg-1*d-1,连续8 d,制备海洛因敏化模型,每次给药后15 min测定大鼠60 min内的自主活动.之后停药10 d,第18天VTA内微量注射M5受体反义(M5AS-ON)或正义寡脱氧核苷酸(M5S-ON)2 μg.24 h后大鼠sc海洛因0.25 mg·kg-1激发,15 min后测定大鼠60 min内的自主活动.用免疫组化法检测大脑蓝斑核(LC)和杏仁核(LA) 磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(pCREB)表达水平.结果 海洛因模型组戒断10 d后大鼠自主活动较对照组显著增加,表明成功制备海洛因敏化模型;在海洛因激发前24 h VTA微量注射M5AS-ON能抑制大鼠海洛因的行为敏化, 而VTA中微量注射M5S-ON组与模型组无显著差异;同时,模型组大鼠脑内LC和LA区神经元pCREB免疫反应阳性表达增加,VTA中微量注射M5AS-ON能明显抑制LC及LA区神经元pCREB阳性表达的增加,而VTA中注射M5S-ON后大鼠LC和LA区神经元pCREB表达较海洛因敏化大鼠无显著差异.结论 VTA内M5受体参与了海洛因的行为敏化,其作用机制可能与LC和LA神经元CREB蛋白的磷酸化改变有关.

用细胞膜色谱法研究药物和毒蕈碱受体的亲和作用

目的观察细胞膜色谱法是否可以反映药物和毒蕈碱受体结合的特异性和选择性.方法将大鼠心房肌细胞膜固定于硅胶载体表面制备成富含毒蕈碱受体的心房肌细胞膜固定相,用细胞膜色谱法研究不同药物和细胞膜固定相上毒蕈碱受体的亲和力.结果不同药物在细胞膜固定相上的保留因子顺序为:左旋羟苯乙酸奎宁酯>哌仑西平>阿托品>4-DAMP>AF-DX116>毛果芸香碱>氯化乙酰胆碱.保留因子与亲和力之间存在一定的正相关关系(r=0.9, P<0.05),但是有些药物的保留因子异常.结论细胞膜色谱法可以作为初步观察药物和受体的亲和作用的方法, 但其准确性需用传统的放射配体结合实验方法验证.