首页 > 文献资料
-
MKP-4与胰岛素抵抗
丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-4(MKP-4)是双位点特异性磷酸酶家族中的成员,能够使丝裂原活化蛋白激酶去磷酸化而失活.新近研究发现在肥胖状态下,MKP-4在胰岛素的靶组织如脂肪组织、肝脏、骨骼肌等表达量增加,并参与了胰岛素信号转导中两条途径间的对话,提示与胰岛素抵抗的发生有一定关系.
关键词： 丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶 胰岛素信号转导 胰岛素抵抗 肥胖 -
MKP-1在血管紧张素Ⅱ导致心肌肥大反应中的调控作用
本研究主要从丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)角度, 研究丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号途径在血管紧张素Ⅱ介导的新生大鼠心肌细胞肥大反应中的作用及调控机制.实验以心肌细胞蛋白合成速率、蛋白含量及细胞表面积作为心肌肥大反应的指标, 以凝胶内MBP原位磷酸化测定MAPK活性, 以免疫印迹法(Western boltting)分别测定MKP-1及磷酸化p44MAPK、p42MAPK蛋白表达.结果发现: (1)AngⅡ(10-7 mol/L)处理48 h, 心肌细胞～3H-亮氨酸掺入率、蛋白含量及细胞表面积明显增加, AngⅡ增加～3H-亮氨酸掺入的作用可被血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1受体)拮抗剂CV11974(10-6 mol/L)明显抑制(抑制85%), 被MAPK激酶(MEK)特异性抑制剂PD098059(5×10-5 mol/L)部分抑制(抑制32.5%);(2) CV11974或PD098059可明显抑制AngⅡ介导的磷酸化MAPK蛋白表达及MAPK酶活性(以γ-32P-ATP掺入表示);(3)以磷酸化MAPK蛋白表达反映MAPK活性, 可见AngⅡ处理心肌细胞 5 min, MAPK活性即开始增加, 30 min左右达到高峰, 2 h后基本恢复正常;而MKP-1蛋白表达30 min即见增加, 持续2 h以上;(4) 用放线菌素D (actinomycin D)处理心肌细胞30 min可明显抑制MKP-1的表达, 同时使AngⅡ致磷酸化MAPK蛋白表达时间延长至2 h以上.以上结果表明, MAPK激活在AngⅡ导致的心肌肥大反应中具有重要作用, MKP-1通过使活化的MAPK去磷酸化而使MAPK失活, 从而参与对心肌肥大反应的调节.
关键词： 丝裂原活化蛋白激酶 丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶 心肌细胞 肥大反应 血管紧张素Ⅱ -
胰岛素信号转导通路相关蛋白在肺气肿患者肺组织中的表达
目的:研究胰岛素治疗对慢性阻塞性肺疾病(CO PD)患者肺组织的作用机制.方法:择期行肺减容手术患者99例,术前2周开始即给予极化液(含胰岛素液)治疗.术中取肺减容切除肺组织,Western blot 印迹法检测肺组织蛋白激酶 B(Akt)、p38丝裂原活化蛋白激酶(P38-M A PK)、核转录因子-κB(N F-κB)表达的变化.结果:胰岛素治疗后肺气肿患者肺组织内磷酸化蛋白激酶B(pAkt)表达水平较其对照组增加(P<0.05).胰岛素治疗后肺气肿患者肺组织内 P38-M A PK表达与其对照组比较无统计学差异(P>0.05).胰岛素治疗后肺气肿患者肺组织内N F-κB表达较其对照组增加(P<0.05).结论:胰岛素可能通过在COPD患者的肺组织中激活PI3/Akt信号转导途径并激活其下游的转录因子N F-κB抑制多种刺激所诱发的细胞凋亡.
关键词： 肺气肿 胰岛素 细胞凋亡 丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶 NF-κB -
MKP1对他莫昔芬耐药MCF7细胞耐药性的影响研究
目的:研究MKP1对他莫昔芬耐药MCF7细胞耐药性的影响及其分子机制.方法:应用Real-time PCR和Western blot分析MKP1在MCF7和他莫昔芬耐药MCF7细胞中的表达变化;West-ern blot 分析MKP1 siRNA在他莫昔芬耐药MCF7细胞中对他莫昔芬诱导MAPK成员活化的影响;M T T比色法分析细胞活力;流式细胞仪分析细胞凋亡;SP600125抑制JNK活化.结果:与MCF7细胞相比,MKP1在他莫昔芬耐药MCF7细胞中表达上调;MKP1 siRNA可增加他莫昔芬对耐药MCF7细胞活力的抑制作用;MKP1 siRNA组与对照组相比,他莫昔芬介导的耐药MCF7细胞的凋亡显著增加;siRNA组与对照组相比,他莫昔芬诱导的JNK活化显著增强;SP600125抑制JNK活化后,MKP1 siRNA 组他莫昔芬耐药MCF7对他莫昔芬的耐药性部分恢复.结论:MKP1通过抑制他莫昔芬诱导的JNK活化维持MCF7他莫昔芬耐药细胞对他莫昔芬的耐药性.
关键词： 药物耐受性 丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶 他莫昔芬 @ MCF7 细胞凋亡
