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信号调节蛋白-α文献资料
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整合素相关蛋白及其配体在糖脂代谢中的作用
整合素相关蛋白(CD47)是在体内广泛分布的跨膜蛋白,其主要配体包括信号调节蛋白-α(SIRP-α)与血小板反应蛋白(TSP)-1.近年来,CD47与其主要配体在糖、脂代谢方面的研究取得了多方面的突破,尤其是与饮食诱导的肥胖、1型糖尿病的发生以及胰岛素功能的调节都有一定的相关性.探索CD47及其配体在糖、脂代谢中的作用机制,将为治疗糖尿病及肥胖提供新思路和潜在靶点.
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信号调节蛋白-α基因真核表达质粒的构建及其在A549细胞中的表达
目的 构建信号调节蛋白-α(signal regulatory protein-α,SIRP-α)基因真核表达质粒,并于A549细胞中进行表达.方法 提取HepG2细胞总RNA,RT-PCR扩增SIRP-α基因片段,克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)-EGFP中,构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-SIRP-α/EGFP.将重组表达质粒转染A549细胞,转染24 h后,荧光显微镜下观察转染情况;转染48 h后,RT-PCR检测SIRP-α基因的转录水平;转染72 h后,Western blot法检测SIRP-α蛋白的表达.结果 经双酶切和测序鉴定真核表达质粒pcDNA3.1 (+)-SIRP-α/EGFP构建正确;转染pcDNA3.1(+)-SIRP-α/EGFP的A549细胞于荧光显微镜下可见绿色荧光;RT-PCR检测结果可见243 bp目的条带,Western blot检测显示SIRP-α存在.结论 成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1(+)-SIRP-α/EGFP,并于A549细胞中有效表达,为进一步研究SIRP-α与肺癌的相关性奠定了基础.
