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CARDsTX文献资料
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重组CARDs TX融合蛋白的表达纯化与复性
目的:构建pET28α-CARDs TX重组质粒,诱导CARDs TX融合蛋白表达,并对其进行纯化与复性研究.方法:将CARDsTX基因(MPN 372)克隆入pET28α载体,经8次点突变获得pET28α-CARDs TX重组质粒.转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达.利用亲和层析技术纯化蛋白并通过SDS-PAGE和Western blot检测CARDs TX的表达和纯化效果.利用尿素梯度复性法和扩大体积透析法对蛋白进行复性研究.结果:酶切和测序结果证明pET28α-CARDs TX重组质粒的DNA序列完全正确,在BL21中CARDsTX融合蛋白可高效表达,并可获得高纯度目的蛋白.利用扩大体积透析法对目的蛋白复性有较好的效果.结论:成功构建出pET28α-CARDs TX重组质粒,且CARDs TX可在大肠杆菌中高效表达,并可获得高纯度的目的蛋白,为深入研究CARDs TX的生物学特性奠定了基础
