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5-乙炔基-2'-脱氧尿苷文献资料
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基于5-乙炔基-2'-脱氧尿苷渗入法的不同细胞增殖检测方法比较
[目的]基于5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(5-ethynyl-2'-deoxyuridine,EdU)掺入法,比较利用荧光成像和流式细胞术检测细胞增殖的两种方法.[方法]细胞株采用小鼠巨噬细胞系RAW264.7,在六孔细胞培养板中用盖玻片爬片,EdU标记后,细胞爬片用荧光成像法,其余细胞用流式细胞术分别检测细胞增殖率.应用Bland-Altman法检测两种方法测量细胞增殖率的一致性,组内相关系数(interclass correlation coefficient,ICC)检测两种方法的重复性.[结果]荧光显微镜下观察呈现明亮绿色荧光的细胞为EdU标记的处于增殖状态的RAW264.7细胞,其余无绿色荧光的为非增殖期细胞.荧光成像半定量分析的结果显示,约(46.75±16.87)％的细胞处于增殖期;流式细胞术定量结果显示(49.50±3.74)％的细胞处于增殖期,与荧光成像半定量结果比较,未见统计学显著性(P=0.4120).Bland-Altman一致性检验表明,96.30％的点落在95％一致性区间内,偏倚为-2.750;重复性检测表明荧光成像法所得细胞增殖率的组内相关系数为0.562,小于0.75;流式细胞术所得细胞增殖率的组内相关系数为0.869,大于0.75.[结论]荧光成像法和流式细胞术分析均可用于EdU标记法检测细胞增殖,与荧光成像相比,流式细胞术分析法操作简便、重复性好.
关键词： 5-乙炔基-2'-脱氧尿苷 细胞增殖 荧光成像 流式细胞术
