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下调XB130表达对胃癌HGC-27细胞增殖及凋亡的影响
[目的]观察下调肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2(actin filament-associated protein 1-like 2,XB130)表达对胃癌细胞增殖及凋亡的影响并探讨其机制.[方法]以Western blotting及qRT-PCR检测4种胃癌细胞株(HGC-27、KATOⅢ、N87、SNU-1)中XB130表达水平;构建小RNA干扰质粒siXB130,转染HGC-27细胞,以Western blotting及qRT-PCR检测转染效率及转染后凋亡相关基因(Cleaved-PARP、Cleaved-Caspase3)表达水平;MTT法检测转染后细胞增殖,流式细胞术检测转染后细胞凋亡.[结果]4种胃癌细胞株中XB130蛋白及mRNA均有表达,其中以HGC-27细胞表达水平高.转染siXB130至HGC-27细胞后显示,siXB130组细胞增殖率在72 h及96 h低于MOCK组及siNC组(F=3.991,P＜0.05;F=2.804,P＜0.05),而凋亡率则高于MOCK组及siNC组(F=14.261,P＜0.001);与MOCK及siNC组对比,siXB130组中Cleaved-PARP蛋白及mRNA表达水平降低,Cleaved-Caspase3则升高.[结论]下调胃癌细胞XB130表达可抑制增殖和促进其凋亡,XB130可作为胃癌治疗靶向候选基因.
关键词： 肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2 胃癌 增殖 凋亡 -
AFAP-1L2在胰腺导管腺癌组织中的表达变化及意义
目的：观察胰腺导管腺癌（PDAC）组织中肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2（AFAP-1L2）的表达变化，并探讨其临床意义。方法采用免疫组化 SP 法检测73对配对的 PDAC 及癌旁正常胰腺组织石蜡标本中的 AFAP-1L2蛋白，分析其与 PDAC 临床病理特征的关系；采用 qRT-PCR 法检测21对配对新鲜 PDAC 及癌旁正常胰腺组织中的 AFAP-1L2 mRNA。结果 AFAP-1L2蛋白在 PDAC 及癌旁正常胰腺组织石蜡标本中的高表达率分别为67．1％及28．8％，P ＜0．01；AFAP-1L2蛋白高表达与肿瘤直径、TNM分期、血管浸润、淋巴转移及术后肝转移有关（P 均＜0．05）。新鲜 PDAC 组织及癌旁正常胰腺组织 AFAP-1L2 mRNA 相对表达量分别为1．429±0．317及0．672±0．298，P 均＜0．01。结论 AFAP-1L2蛋白及基因在 PDAC 组织中高表达，在 PDAC 的发生发展中起重要作用。
关键词： 胰腺导管腺癌 正常胰腺组织 肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2 -
AFAP-1L2对胰腺癌细胞侵袭及转移的影响及机制
目的:探讨AFAP-1 L2表达下调对胰腺癌细胞的影响及其机制.方法:人胰腺癌SW1990细胞分别转染靶向AFAP-1L2的干扰质粒siAFAP-1L2和阴性对照siRNA,以未处理的SW 1990细胞为空白对照,检测各组细胞的迁移与侵袭能力,以及肿瘤浸润相关分子的蛋白与mRNA变化;免疫共沉淀法检测AFAP-1L2蛋白与p85 α蛋白相互作用关系.结果:与空白对照SW1990细胞比较,转染siAFAP-1L2下调AFAP-1L2后,SW1990细胞的迁移与侵袭能力明显降低,p85 d及α-pAkt表达降低,d-Akt表达升高(均P＜0.05),MMP-9与E-cadherin表达无变化(均P＞0.05);转染阴性对照siRNA的SW1990细胞各项指标无明显变化(均P＞0.05).免疫共沉淀显示,胰腺癌SW 1990细胞中AFAP-1L2蛋白与p85α蛋白存在相互作用.结论:AFAP-1L2可能通过与p85α相互作用调控PI3K/Akt通路,从而影响胰腺癌细胞的迁移及浸润,下调AFAP-1L2表达能抑制胰腺癌细胞迁移与侵袭能力.
关键词： 胰腺肿瘤 肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2 肿瘤侵润 -
下调肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2表达对人肝癌Hep3B细胞增殖及凋亡的影响
目的 观察肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2在人肝细胞癌细胞中的表达及下调后对增殖生存的影响并探讨其机制.方法 以蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时定量逆转录聚合酶链反应法(qRT-PCR)检测肝细胞癌细胞株中肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2表达,并采用小干扰RNA转染Hep3B细胞株对肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2表达进行下调,Western blot和qRT-PCR检测转染效率、增殖凋亡相关基因表达;甲基噻唑基四唑检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期及凋亡.结果 肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2蛋白及mRNA在肝癌细胞株Hep3B、Huh7、HepG2、MHCC97H中均有表达,在Hep3B细胞株中表达量高(F=5.742,P＜0.01;F=3.452,P＜0.05);与空白对照(siNC)组比较,si肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2组中P-P21及磷酸化的蛋白激酶B蛋白表达下调(t=8.462,P＜0.01;t =9.742,P＜0.01),P21、蛋白激酶B及Cleaved Capase-9蛋白表达上调(t=12.247,P＜0.001;t =6.452,P＜0.01;t =11.634,P＜0.001;t =12.273,P＜0.001);与siNC组比较,在72 h和96 h,si肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2表达下调后Hep3B细胞增殖能力下降(t=8.176,P＜0.01;t =2.246,P＜0.05),Hep3B停留在G1期比例增高,G2及S期比例减少(t=4.23,P＜0.05;t =2.13,P＜0.05;t =5.72,P＜0.05),凋亡率升高(t=8.633,P＜0.01).结论 下调肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2表达通过P21磷酸化及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路抑制肝细胞癌细胞增值及生存,可作为肝细胞癌治疗的靶向候选基因.
关键词： 肝细胞癌 肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2 增殖 凋亡
