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miR-200a靶向调控AP-2γ表达抑制神经母细胞瘤SK-N-AS细胞增殖
目的 明确miR-200a具有靶向调控转录因子活化蛋白(AP)-2γ表达而抑制神经母细胞瘤细胞增殖的能力,进一步揭示miR-200a抗瘤的分子机制.方法 通过双荧光素酶报告基因分析检测miR-200a对AP-2γ3'UTR-荧光素酶活性的影响;将miR-200a模拟物转染神经母细胞瘤细胞,利用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western blot)方法检测AP-2γ表达水平的改变;将AP-2γshRNA转染SK-N-AS细胞,MTS细胞增殖活性检测分析干扰AP-2γ表达对神经母细胞瘤细胞增殖能力的影响;将AP-2γ重组质粒与miR-200a模拟物共转染神经母细胞瘤细胞,通过MTS检测细胞增殖能力.结果 miR-200a处理组细胞活性(66.33±5.13)与对照组的(100±0)相比,细胞增殖受到明显抑制(F=114,P<0.05).与未转入的相对荧光素酶活性(0.982±0.119)相比,miR-200a转染明显抑制AP-2γ的3'UTR驱动的荧光素酶活性(0.624±0.051).且miR-200a模拟物明显降低神经母细胞瘤细胞中AP-2γ的mRNA和蛋白表达水平;此外,与对照组相比,shRNA干扰AP-2γ表达能明显抑制SK-N-AS细胞的增殖(62.5±2.4),它能部分模拟miR-200a的抑制增殖能力.后,发现过表达AP-2γ能部分逆转miR-200a对SK-N-AS细胞的增殖抑制作用(92.4±1.4).结论 miR-200a通过靶向下调AP-2γ表达而抑制神经母细胞瘤细胞的增殖.
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精原细胞瘤中M2A、AP-2γ、OCT3/4、PLAP和CD117的表达及其意义
目的:检测精原细胞瘤中M2A、AP-2γ、OCT3/4、PLAP和CD117的表达情况,探讨这些标记物在该肿瘤病理诊断及鉴别诊断中的意义.方法:采用免疫组化SP法,检测40例睾丸精原细胞瘤中M2A、AP-2γ、OCT3/4、PLAP和CD117的表达情况.结果:M2A、AP-2γ、OCT3/4 、PLAP和CD117阳性表达率分别为95.0 %、87.5 %、72.5%、67.5 %和75.0%,在13例PLAP表达阴性的精原细胞瘤中M2A和AP-2γ的阳性表达率分别为84.6%和76.9%.M2A、AP-2γ表达与OCT3/4、PLAP、CD117的表达比较,差异有显著性;M2A与 AP-2γ表达之间比较,差异无显著性,OCT3/4、PLAP与CD117间比较,差异也无显著性.结论:精原细胞瘤中M2A、AP-2γ高水平表达,可以作为诊断精原细胞瘤、特别是PLAP标记阴性的精原细胞瘤的免疫组化标记物,可作为鉴别诊断的有用指标.
