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双试剂苦味酸法测定血清肌酐的改进
苦味酸速率法测定肌酐时,受高胆红素负干扰而致结果明显偏低,甚至出现负值.常用消除干扰的强碱法、表面活性剂(Triton-100,SDS)只能不同程度地减弱干扰;另外,胆红素氧化酶法、肌酐酶法、双速率法因酶试剂价格高和对仪器要求高而难以普及应用.为此,我们根据胆红素易被氧化剂氧化的性质[1],于2004年1月建立了先将血清用铁氰化钾处理,使胆红素氧化后,再以苦味酸速率法测定,使肌酐测定结果准确可靠.
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肌酐酶促动力学法的测定及评价
目前,临床上肌酐酶的测定多采用不去蛋白的Jaffe苦味酸速率法(速率法),此方法有一定的局限性,不能排除一些药物如维生素C、头孢类抗生素及体内一些代谢物质,如丙酮酸、乙酰乙酸等对测定产生的干扰,常导致结果出现假阳性;样本中高胆红素的存在造成肌酐测定值降低,乳糜血也使测定值降低.而肌酐酶促动力学法(酶法)测定肌酐基本上排除了这类物质的干扰,使肌酐的测定结果更趋于准确.
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血清肌酐酶促动力学法的测定及评价
目前临床上肌酐的测定多采用不去蛋白的Jaffe苦味酸速率法,因此方法有一定的局限性,不能排除一些药物如维他命C(Vit c)、头孢类抗菌素及体内一些代谢物质如丙酮酸、乙酰乙酸等对测定产生的干扰[1],常使结果出现假阳性增高;样本中高胆红素的存在,使背景吸光度下降,造成肌酐测定值降低,同时乳糜也影响此法的肌酐测定,使结果偏低.酶促动力学法测定肌酐,基本排除了这类物质的干扰,使肌酐的测定结果更趋于真值.
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6种基于血肌酐的肾小球滤过率估算公式在健康人群中的应用评估
目的：评价基于酶法和苦味酸速率法的血清肌酐的6种估算的肾小球滤过率（eGFR）公式在表观健康人群中的适用性。方法从健康体检人群中筛选出694名表观健康人，分别用酶学方法和碱性苦味酸速率法检测血清肌酐，通过6种eGFR公式[Cockcroft-Gault（C-G）公式、简化肾脏病膳食改善（MDRD）公式、MDRD-中国人公式、同位素稀释质谱法（IDMS）-MDRD公式、慢性肾脏病流行病合作组（CKD-EPI）公式和EPI-亚洲人（EPI-Asian）公式]分别计算其eGFR并进行比较。结果694名表观健康人群的血肌酐检测结果分别为酶法（65．8±13．3）μmol/L（范围为36～117μmol/L），苦味酸速率法（83．0±12．7）μmol/L （范围为57～131μmol/L）。以eGFR值男性85～125 mL/min、女性75～115 mL/min作为参考区间，基于酶法检测肌酐的eGFR值在表观健康人群中的适用性依次为CKD-EPI公式（72．3％）＞IDMS-MDRD公式（69．9％）＞简化MDRD公式（61．3％）＞EPI-Asian公式（60．7％）＞C-G公式（54．8％）＞MDRD-中国人公式（27．3％）（P＜0．05），IDMS-MDRD公式在男、女性之间的适用性差异小（仅相差1．6％）；基于苦味酸速率法检测肌酐的eGFR值在表观健康人群中的适用性依次为MDRD-中国人公式（80．0％）＞EPI-Asian公式（70．1％）＞CKD-EPI公式（63．8％％）＞简化MDRD公式（59．1％）＞C-G公式（52．4％）＞IDMS-MDRD公式（40．7％）（P＜0．05），MDRD-中国人公式在男、女性之间的适用性差异小（仅相差1％）。结论以上6种eGFR公式计算结果有明显差异。如果用溯源至IDMS的酶法检测血清肌酐，可选用CKD-EPI公式、IDMS-MDRD公式来评价中国北方健康人群的eGFR；如果用苦味酸速率法检测血清肌酐，可选用MDRD-中国人公式来评价中国北方健康人群的eGFR。
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用氧化剂消除高胆红素对测定肌酐的影响
目的:为消除胆红素对肌酐苦味酸速率法测定时的负干扰,建立了氧化处理后苦味酸速率法.方法:以过硫酸钾氧化分解胆红素后,再以碱性苦味酸进行肌酐速率法测定.线性可达1800 μmol/L,精密度批内CV=2.2%,批间CV=3.1%.平均回收率98.6%.本法与除蛋白手工法比较测定结果符合临床要求.Y=0.9843X+0.1023,r=0.9900.操作简便.
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苦味酸速率法和酶法测定血清肌酐方法学评价
目的:用全自动生化分析仪对两种检测方法 ——苦味酸速率法和酶法测定血清肌酐项目的结果 比较,然后根据具体情况选择适合本科室的检测方法.方法:应用Cobas C501全自动生化分析仪对相关样品用两种方法进行检测,测得数据应用SPSS14.1统计学软件进行相关分析,并做出评估.结论:用肌氨酸氧化酶法测定血清肌酐较苦味酸法更准确可靠,建议条件许可的情况下优先选用酶法.
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酶法与苦味酸速率法测定肌酐的技术性能比较
目的 了解酶法与苦味酸速率法测定血清肌酐的优缺点,为实验室选用检测方法提供依据.方法 对酶法与苦味酸速率法测定血清肌酐分别进行线性、精密度、准确度(回收率和方法比较)和干扰五项试验,并对上述各项技术性能指标作出评价和比较.结果 两种方法测定肌酐的精密度均达到美国CLIA'88的规定,准确性均符合要求,而且两种方法测定结果有良好的相关性(r=0.998 5),但是酶法与苦味酸速率法比较,线性范围宽9倍,精密度和准确度均较高,抗胆红素和血红蛋白干扰能力均较强.结论 用酶法试剂盒测定血清肌酐是继苦味酸速率法后方法学上的又一大进步,而且不存在比色杯污染问题,但相对价格较高,建议各实验室根据自身实际情况选用检测方法.
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酶法与苦味酸速率法测定肌酐的优缺点比较
目的:了解酶法与苦味酸速率法测定血清肌酐的优缺点,为检验科选用检测方法提供参考依据.方法:对酶法与苦味酸速率法测定血清肌酐分别进行精密度、线性、干扰、准确度和灵敏度五项试验,并对上述各项指标作出评价.结果:两种方法测定肌酐的精密度、准确度均符合要求,而且两种方法测定结果有良好的相关性,但是酶法与苦味酸速率法比较,线性范围更宽,精密度、准确度、灵敏度也更高,特异性即抗干扰力也更强.结论:用酶法测定血清肌酐比苦味酸法更可靠,虽然价格相对较高,但为了给病人提供更准确的检验结果,建议各医院检验科还是选用酶法.
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用氧化剂消除高胆红素对肌酐测定的影响
目的消除胆红素对肌酐苦味酸速率法测定时的负干扰.方法以过硫酸钾氧化分解胆红素后,再以碱性苦味酸进行肌酐速率法测定.结果线性可达1800μmol/L, 批内精密度CV=2.2%,批间CV=3.1%.平均回收率为98.6%.结论本法测定结果符合临床要求,操作简便.
