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Vero毒素-1的LD50的测定
1977年Konowachuk等人首次描述了致病大肠杆菌可以产生使Vero细胞发生病变的一种毒素, 并命名为Vero毒素. 当产Vero毒素的大肠杆菌侵袭人体或动物时, 细菌依靠菌毛黏附在盲肠、结肠壁上并大量繁殖、释放毒素, 导致肠壁毛细血管内皮细胞损伤, 使得单位时间内血液循环减少, 引起肠壁毛细血管内凝血, 并使中枢神经系统、肠道、肾等器官内纤维蛋白沉着, 导致多处毛细血管病变, 引发一系列疾病, 如血栓形成性血小板减少性紫癜、出血性结肠炎以及溶血性尿毒症等. 为进一步研究该毒素的作用机制, 笔者以小鼠为模型测定Vero毒素-1的LD50, 现将结果报道如下.
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检出山梨醇阳性肠出血性大肠杆菌 O157:H7一例及特征分析
目的:肠出血性大肠杆菌O157:H7(entro-hemorrhaguc E Coli O157:H7 or EHEC O157:H7)是具有强致病力的条件致病菌,该菌可通过污染的食物、水、以及直接接触感染的人或动物而感染.加强对该菌的检验,对预防与控制由该菌所致的感染流行十分重要.方法:本文参照中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 0973-2000方法进行检验.结果:从进口冻猪肚中检出一例EHEC O157:H7,并用PCR方法检测VERO毒素呈阳性.结论:该菌株的生化特征与相关文献报道的EHEC O157:H7生化特征不同的是山梨醇阳性,棉籽糖阴性,检验过程中应慎重鉴别.
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Vero毒素-1B亚基基因克隆及表达
目的:构建表达Vero毒素-1B亚基的重组质粒.方法:用PCR法扩增并用低熔点琼脂糖法回收Vero毒素-1B亚基基因,将其与质粒pGEX-4T-2重组,通过酶切图谱和序列分析法筛选出重组质粒.将含重组质粒的宿主菌诱导表达后,提取全菌总蛋白进行SDS-PAGE电泳分析.结果:获得了克隆有Vero毒素-1B亚基基因的重组质粒,经诱导后表达分子量为 34 kDa 的新蛋白.结论:重组质粒pVT1B的构建和表达成功说明克隆的Vero毒素-1B亚基基因具有完整的阅读框架,使简便获得Vero毒素-1B亚基成为可能,为以后研究新型的肠出血性大肠杆菌疫苗及治疗用药奠定了基础.
关键词： 大肠杆菌O157:H7 Vero毒素 基因表达 -
Vero毒素及其检测
Vero毒素是肠出血性大肠杆菌和致病性大肠杆菌产生的一种毒素,它可导致出血性结肠炎、溶血性尿毒症、血栓形成性血小板减少性紫瘢等痰病,本文就Vero毒素的结构、生物学活性、致病作用及其检测方法等方面进行了综述.
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肠出血性大肠杆菌Vero毒素-1B亚基克隆及序列分析
[目的]克隆肠出血性大肠杆菌Vero毒素-1B亚基基因. [方法]用PCR法扩增并回收Vero毒素-1B亚基基因,将其与质粒pGEX-4T-2重组,通过酶切图谱筛选出重组质粒,并测序验证. [结果]PCR扩增出290 bp左右特异性条带,将其克隆至载体中,双酶切鉴定和PCR鉴定,获得重组质粒pVT1B,DNA序列分析结果显示,所克隆基因序列和Genbank所收录相同. [结论]成功构建了重组质粒pVT1B,为研究新型肠出血性大肠杆菌疫苗及治疗用药奠定了基础.
