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HBx突变体特异性抗血清的制备及临床研究
目的 探讨HBx突变体特异性抗血清的制备及临床效果.方法 通过多肽合成的方法制备HBx-d431、HBx-d382缺失型突变体特异性多肽抗原,免疫动物制备相应抗血清.产生的抗体经纯化、酶标后,建立检测HBx-d431、HBx-d382特异性多肽抗原及其抗体的ELISA方法.通过对肝细胞癌患者和非肝细胞癌患者临床标本的检测,研究HBx-d431、HBx-d382缺失型突变体多肽抗原及其抗体的临床意义.结果 ELISA法研制的兔抗体HBx-d431、HBx-d382多克隆抗体均能与相应的抗原发生反应,并随着兔抗血清稀释的增加,A值会逐渐下降,肝细胞癌组HBxAg-w、HBxAg-m、HBxAb-w和HBxAb-m明显高于正常健康组,差异有统计学意义.结论 建立的ELISA方法将可用于HBV相关肝细胞癌的早期诊断、HBV携带者及慢性乙肝患者的监测.
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亚洲地区快速检测人肠道病毒71型可能出错,改进引物可解决
手口足病(hand,foot and mouth disease,HFMD)是由人肠道病毒感染引起的综合征,常见于儿童.典型表现为手掌、脚底和口腔出现水疱疹,并引起不适和进食困难等.常见的病原为肠道病毒成员之一的柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CVA16),其他还有CVA8、CVA10等.HFMD的病原诊断传统上依靠病毒分离,并用Lim-Beyeesh-Melnck混合或单价特异性抗血清的中和试验进行鉴定.由于人肠道病毒至少有66种,病原诊断花费的人力多、代价高,多数临床医生认为,由上述这些肠道病毒引起的HFMD较轻,病原诊断并非必需.
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大鼠抗凝血酶Ⅲ的纯化及其抗血清制备
抗凝血酶Ⅲ(Antithrombin AT-Ⅲ)是人血浆凝血系统中一种重要的生理性丝氨酸蛋白酶抑制物,是抗凝血系统中的重要成份,AT-Ⅲ对维持机体正常血液循环,防止血栓形成有重要作用.1975年Miller-Andersson首先用肝素-Sepborose 4B凝胶(HS凝胶)亲和层析法分离AT-Ⅲ获得成功,使大规模制备AT-Ⅲ成为可能1,我们参照Wickerhauser(1979)的方法[2],纯化了大鼠血浆AT,Ⅲ,并制备了特异性抗血清.
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罗汉果甜苷V特异性抗血清的制备与应用
目的 制备罗汉果甜苷V(MogV)特异性抗血清,建立MogV含量竞争性抑制酶联免疫检测法.方法 用罗汉果甜苷V-丁二酸酯-牛血清蛋白(MogV-HS-BSA)结合比约为44∶1为免疫抗原制备抗血清,用罗汉果甜苷V-丁二酸酯-人血清蛋白(MogV-HS-HSA)结合比约为64∶1为包被抗原,建立MogV含量竞争性抑制酶联免疫检测法.结果 包被抗原工作浓度为1 μg·mL-1,血清佳稀释倍数为1∶8000,在此工作浓度下,MogV浓度在1×10-4~1 μg·mL-1内回归方程Y=-0.158X+0.298,r=0.9910.结论 成功制备了MogV抗血清,MogV浓度在1×10-4~1 μg·mL-1内对抗血清的OD(405 nm)值抑制作用呈良好的线性关系.