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肺表面活性物质参与尼古丁诱导支气管上皮细胞高迁移率族蛋白1释放
目的 本研究旨在探讨支气管上皮细胞肺表面活性物质蛋白(SP-A)在尼古丁诱导支气管上皮细胞高迁移率族蛋白1(HMGB1)释放中的作用.方法 尼古丁(6×10-6mol/L)刺激支气管上皮细胞株16HBE,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测刺激6 h、12 h、24 h后细胞培养上清中HMGB1浓度.预先加入SP-A siRAN孵育1 h,再加入尼古丁刺激16HBE 24 h,ELISA方法检测HMGB1的分泌.结果 尼古丁刺激24 h后HMGB1的分泌量较未给予尼古丁刺激的正常对照组明显增加,刺激6 h和12 h后分泌量较正常对照组稍增加,但分泌量差异无统计学意义.加入SP-A siRAN后尼古丁刺激24 h组,HMGB1的分泌量显著增加.结论 SP-A参与了尼古丁诱导支气管上皮细胞HMGB1释放.
关键词： 气道上皮细胞 尼古丁 肺泡表面活性物质蛋白 高迁移率族蛋白1 -
肝细胞生长因子对高氧暴露早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖与凋亡的影响
目的:观察肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)对高氧暴露体外培养的早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(Type Ⅱ alveolar epithelial cells,AEC Ⅱ)增殖、凋亡及功能的影响,探讨HGF对高氧肺损伤保护作用的机制.方法:原代培养早产鼠AEC Ⅱ,纯化后随机分为4组:空气组(Air)、高氧组(HO)、空气+HGF组(Air+HGF)、高氧+HGF组(HO+HGF).采用流式细胞术及免疫印迹(Western blot)法观察AEC Ⅱ的增殖和凋亡情况,RT-PCR分析各组肺泡表面活性物质蛋白(surfactant associated protein,SP)SPA,SPB,SPC mRNA表达.结果:(1)各组细胞周期比例及细胞凋亡显示,与Air组比,HO组Sub G1(代表凋亡细胞比例),G0期/G1期细胞比例明显增高(P＜0.01),G2期/M期细胞比例明显降低(P＜0.01);Air+HGF组S期细胞比例明显增高(P＜0.01).与HO组比,HO+HGF组G0期/G1期细胞比例显著降低(P＜0.01),S期和G2期/M期细胞比例明显增高(P＜0.01).(2)各组增殖细胞核抗原表达显示,HO组显著低于Air组(P＜0.01),Air+HGF组明显高于Air组(P＜0.05);HO +HGF明显高于HO组(P＜0.05).(3)各组SPA,SPB,SPC mRNA表达显示,HO组强度较Air组弱(P＜0.01),而HO+HGF组较HO组明显增加(P＜0.05).结论:高氧导致早产鼠AEC Ⅱ增殖抑制,凋亡增加,SPA,SPB,SPC mRNA表达降低,HGF可部分抑制这种变化,提示HGF对高氧肺损伤起一定的保护作用.
关键词： 肝细胞生长因子 肺泡Ⅱ型上皮细胞 高浓度氧 肺泡表面活性物质蛋白 早产大鼠
