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七氟醚对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响及Na+-2Cl--K+协同转运蛋白1和水通道蛋白2在其中的作用
目的 探讨七氟醚对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响及Na+-2Cl--K+协同转运蛋白1(BSC1)和水通道蛋白2(AQP2)在其中的作用.方法 健康雄性SD大鼠24只,8～12周龄,体重125 ～145 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=8)∶假手术组(S组)、肾缺血再灌注组(I/R组)和七氟醚组(Sev组).采用夹闭肾动脉45 min再灌注24 h的方法制备双侧肾脏缺血再灌注损伤模型.Sev组吸入1 MAC(2.2％)七氟醚,意识消失后开始制备模型,并吸入1 MAC(2.2％)七氟醚3h.于模型制备前24 h(T1)和再灌注24 h(T2)时采集尿样,记录尿量,测定尿比重、肌酐(Cr)水平,计算内生肌酐清除率(Ccr)；T2时采集下腔静脉血样,测定血清BUN和Cr、MDA浓度、SOD和髓过氧化物酶(MPO)活性浓度；取血后取左侧肾脏,观察肾组织病理学结果,进行肾小管损伤程度评分,测定肾组织SOD和MPO活性、MDA含量,分别采用免疫组化法和Western blot法测定AQP2和BSC1的表达.结果 与S组比较,I/R组和Sev组T2时尿量增加,血清BUN和Cr浓度升高,尿比重和Ccr降低,血清和肾组织MPO、MDA水平升高,SOD活性降低,肾小管损伤评分升高,肾组织AQP2和BSC1表达水平下调(P＜0.05)；与I/R组比较,Sev组Ccr升高,血清BUN和Cr浓度降低,血清和肾组织MPO、MDA水平降低,SOD活性升高,肾小管损伤评分降低,肾组织AQP2和BSC1表达水平上调(P＜0.05),尿量和尿比重差异无统计学意义(P＞0.05),肾组织病理学损伤减轻.结论 七氟醚可减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,其机制与上调BSC1和AQP2的表达有关.
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异丙酚后处理对脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经元K+-Cl-共转运体2表达的影响
目的 评价异丙酚后处理对脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经元K+-Cl-共转运体2(KCC2)表达的影响.方法 SD雄性大鼠72只,7～8周龄,体重250 ～ 280 g,采用随机数字表法,将其分为3组(n=24):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)和异丙酚后处理组(PP组).采用阻塞大脑中动脉的方法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型,PP组于再灌注即刻开始静脉输注异丙酚20mg· kg-1·h-1,输注时间2h,S组和I/R组输注等容量生理盐水.于再灌注24h时行改良神经功能缺损程度评分(mNSS),然后取脑组织,尼氏染色,进行海马CA3区神经元计数;采用免疫荧光法和Western blot法检测海马CA3区KCC2表达水平.结果 与S组比较,I/R组mNSS评分升高,海马CA3区神经元计数和KCC2表达降低,PP组mNSS评分升高(P＜0.05),PP组其它指标差异无统计学意义(P＞0.05);与I/R组比较,PP组mNSS评分降低,海马CA3区神经元计数和KCC2表达升高(P＜0.05).结论 异丙酚后处理减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的机制与上调海马神经元KCC2表达有关.
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钾-氯协同转运子1新的同分异构体的发现及其转录调控意义
目的寻找钾-氯协同转运子(KCC)1新的同分异构体及分析其意义.方法抽提正常人肾组织RNA,用已发表KCC1序列设计引物,进行cDNA末端快速放大(RACE)及RT-PCR,以Northern印迹分析证实新的同分异构体的存在,并用生物信息学方法比较新序列.结果RACE和Northern印迹分析结果证实在人肾组织中有3种KCC1的新的同分异构体,与野生型KCC1不同的是,新的KCC1同分异构体2含部分内含子1的序列(外显子1b),作为其外显子1,蛋白翻译起始密码子也位于该外显子中.新的KCC1同分异构体3含外显子1b、外显子2、内含子2及以后与野生型KCC1相同的序列,蛋白翻译起始密码子位于外显子4,导致一长的5'端非翻译区,内含子2靠外显子3的位置有一翻译终止密码子.新的KCC1同分异构体4含部分内含子3作为其5'端非翻译区.结论新的异构体的发现为KCC家族增添了新的成员,并为KCC1这一重要分子的转录和功能调节提供了新的线索,其特异性序列可用于分析它们在人类疾病中的病理意义.由于启动子类型的不同对同分异构体基因转录的选择起主动的调节作用,多个同分异构体及多个启动子的存在对理解KCC1复杂的生理功能、调节过程和致病机制具有重要意义.
关键词： 钠钾氯化物协同转运子 RNA剪接 立体异构体 基因调节
