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SIRT1∕NF-κB信号通路在小鼠海马神经元氧糖剥夺-复氧复糖损伤中的作用
目的 评价沉默信号调节因子1(SIRT1)∕NF-κB信号通路在小鼠海马神经元氧糖剥夺-复氧复糖损伤中的作用.方法 培养HT22小鼠海马神经元,以5×104个∕ml的密度接种于培养板(96孔板,100μl∕孔;6孔板,2 ml∕孔)或培养皿(6 cm),采用随机数字表法分为4组(n=24):对照组(C组)、氧糖剥夺-复氧复糖组(OGD组)、SIRT1抑制剂EX-527预处理组(EX组)和SIRT1激动剂SRT1720预处理组(SRT组).C组在37℃常氧培养箱中培养,OGD组、EX组和SRT组将细胞培养基更换为缺氧液,置于37℃培养箱(5％CO2-95％N2)中培养12 h,随后将缺氧液更换为培养基,置于37℃常氧培养箱中继续培养24 h制备氧糖剥夺-复氧复糖损伤模型.EX组和SRT组于氧糖剥夺前12 h时分别加入SIRT1抑制剂EX-5271μmol∕L和SIRT1激动剂SRT172010μmol∕L孵育.采用CCK-8法测定细胞活力,采用化学比色法测定LDH活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用Western blot法检测SIRT1、NF-κB、IκBα、Bcl-2和Bax的表达水平,计算Bcl-2∕Bax比值.结果 与C组相比,OGD组、EX组和SRT组细胞活力降低,LDH活性和细胞凋亡率升高,SIRT1、IκBα及Bcl-2表达下调,NF-κB和Bax表达上调,Bcl-2∕Bax比值降低(P<0.05);与OGD组相比,SRT组细胞活力升高,LDH活性和细胞凋亡率降低,SIRT1、IκBα及Bcl-2表达上调,NF-κB和Bax表达下调,Bcl-2∕Bax比值升高,EX组细胞活力降低,LDH活性和细胞凋亡率升高,SIRT1、IκBα及Bcl-2表达下调,NF-κB和Bax表达上调,Bcl-2∕Bax比值降低(P<0.05).结论 SIRT1∕NF-κB信号通路抑制参与了小鼠海马神经元氧糖剥夺-复氧复糖损伤的过程.
