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不同类别抗瘤中药制剂逆转结直肠癌NK免疫功能抑制的比较研究
目的 比较研究不同类型抗瘤中药制剂对结直肠癌所致NK免疫功能抑制的影响.方法 分别制备三氧化二砷(As2O3)、川芎嗪(LHC)、黄芪(AMB)、氧化苦参碱(MOX)、猪苓多糖(PUPS)、蒿甲醚(ART)等6种中药制剂作用后的结直肠癌细胞Colon 26再培养上清,以不经中药制剂作用的相应上清为对照;MTT法检测不同中药制剂作用后再培养上清对小鼠脾细胞NK杀伤活性的影响,直接免疫荧光FCM法检测对小鼠脾细胞CD 3ε-ζ+表达的影响.结果 对NK杀伤抑制的下调,As2O3、PUPS及ART之间未见显著差异(均P>0.05,下调49.65%±8.86%),LHC及AMB之间未见显著差异(P>0.05,下调78.15%±9.81%);AMB的下调作用强.对CD 3ε-ζ+表达抑制的下调,LHC和PUPS的初始下调幅度未见差异(P>0.05,下调88.04%±7.57%),AMB和ART的初始下调幅度未见差异(P>0.05,下调50.00%±8.24%),MOX与其他中药制剂的作用之间均有差异(均P<0.01,完全消除抑制并明显促进表达);LHC的下调作用强.结论 逆转结直肠癌细胞产生的NK免疫功能抑制是中药制剂发挥抗瘤效应的机制之一.临床可考虑联合使用扶正祛邪类及活血化瘀类抗瘤药物组方,以调整患者不利于临床治疗的NK免疫抑制状态.
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青蒿琥酯影响L 929和Colon 26肿瘤细胞免疫抑制的体外研究
目的 研究青蒿琥酯对L 929和Colon 26肿瘤细胞培养上清免疫抑制作用的影响.方法 制备体外经青蒿琥酯作用后,彻底洗去青蒿琥酯,再以新鲜培养液培养L 929及Colon 26,收取再培养上清,同时以不经青蒿琥酯作用的L 929及Colon 26同步处理的相应上清作对照.实验研究这些上清对小鼠脾细胞MTT法测定的NK杀伤和Con A诱导转化,以及流式细胞计数分析的CD 4+及CD 8+表达的影响.结果 与对照组上清相比,青蒿琥酯作用L 929和Colon 26后,其第一次(A-L 1、A-C 1)及第二次48 h再培养上清(A-L 2、A-C 2)对Con A诱导小鼠脾细胞转化的抑制率均明显降低(分别为37.50%±6.58%,P＜0.01;27.83%±5.50%,P＜0.05;48.71%±3.52%,P＜0.01;5.48%±1.22%,P＜0.01);CD 4+CD 8-细胞表达百分率均明显升高(分别为15.30%±3.51%,P＜0.01;27.68%±2.78%,P＜0.05;10.69%±3.42%,P＜0.01;28.02%±1.08%,P＜0.01);A-L 1、A-L 2及A-C 1上清作用后,NK杀伤活性均明显升高(杀伤率分别为67.58%±4.83%,P＜0.01;66.14%±4.10%,P＜0.01;57.21%±3.38%,P＜0.05),A-C 2对NK杀伤未产生明显改变(杀伤率为45.42%±8.98%,P＞0.05).结论 青蒿琥酯可下调L 929及Colon 26肿瘤细胞培养上清的免疫抑制,下调肿瘤免疫抑制可能是青蒿琥酯的抗肿瘤新机制之一.
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抗瘤中药调变结直肠癌细胞免疫抑制分子分泌的比较研究
目的 比较研究不同类型抗瘤中药制剂对结直肠癌细胞分泌免疫抑制分子的影响.方法 分别制备三氧化二砷(As2O3)、川芎嗪(LHC)、黄芪(AMB)、氧化苦参碱(MOX)、猪苓多糖(PUPS)、青蒿琥酯(ART)等6种中药制剂作用后的小鼠结直肠癌细胞Colon 26再培养上清;以不经中药制剂作用的相应上清为对照.定量酶联免疫吸附法(ELISA)测定上清中TGF-β1、VEGF、IL-4、IL-6、IL-10和PGE2含量.结果 在6种中药制剂对Colon 26分泌免疫抑制分子的影响中,AMB时TGF-β1的下调作用强(55.75%);As2O3、LHC对IL-6的下调幅度均约5%,但作用时相不同;As2O3对IL-10的下调作用强(7.35%);对VEGF、IL-4及PGE2的影响之间差异无统计学意义(均P>0.05).结论 TGF-β1可能是结直肠癌细胞分泌的优势免疫抑制分子,是各种中药制剂下调免疫抑制的重要靶分子;下调肿瘤细胞免疫抑制分子的分泌,应是中药制剂发挥抗瘤效应的机制之一.
