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敲低膜联蛋白A7对胃癌细胞MGC-803增殖的影响
目的：：应用RNA干扰技术，靶向敲低人胃癌MGC-803细胞膜联蛋白A7(Annexin A7，ANXA7)的表达，观察ANXA7低表达对MGC-803细胞增殖的影响。方法：实验分为3组，以靶向ANXA7的siRNA转染MGC-803细胞为siRNA干扰组，另设阴性对照组和空白对照组，以Western blot法检测转染后MGC-803细胞ANXA7的表达，应用MTT法、克隆形成实验检测ANXA7低表达对MGC-803细胞的增殖能力的影响。结果：siRNA干扰组细胞ANXA7的表达较阴性对照组和空白对照组明显降低(P＜0.05)。敲低ANXA7表达后， MGC-803细胞的增殖活性和克隆形成能力明显降低(P＜0.05)。结论：ANXA7低表达可抑制胃癌MGC-803细胞的增殖。
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eEF1A1低表达对肝癌细胞凋亡、增殖与迁移的影响及eEF1A1/A2与ANXA7间的相互作用
[目的]研究shRNA抑制eEF1A1表达对肝癌Hea-P细胞凋亡、增殖、迁移的影响,并通过分别下调eEF1A1和ANXA7的表达,探讨肝癌Hca-P细胞中eEF1A1、eEF1 A2与ANXA7表达的相关性及潜在的相互作用.[方法]构建靶向eEF1A 1基因的shRNA质粒表达载体,瞬时转染至小鼠肝癌Hca-P细胞中,设无处理组(CON) 、eEF1A1-shRNA组(eEF1A 1-shRNA)、转染pGPU/GFP/Neo-NC的阴性埘照组(NC)三组细胞进行实验.采用实时荧光定量PCR和Western blot技术检测eEF1A1的抑制效果,并分别检测各组eEF1 A2、ANXA7在mRNA和蛋白水平的表达.CCK-8法、流式细胞仪、Transwell小室分别检测对细胞增殖、凋亡、迁移的影响.此外,复苏已稳定低表达ANXA7的Hca-P细胞,通过实时荧光定量PCR和Western blot技术检测无处理组(CON)、ANXA7-shRNA转染组(ANXA7-shRNA)、阴性对照组(NC)三组Hca-P细胞中eEF1A1、eEF1A2在mRNA和蛋白水平的表达.[结果]eEF1A1靶向shRNA成功下调小鼠肝癌Hca-P细胞中eEF1A1基因的表达.流式细胞仪检测显示,CON组、eEF1A1-shRNA组、NC组细胞凋亡率分别为2.85％±0.37％、4.71％±0.21％和3.01％±0.33％,eEF 1A1-shRNA组的细胞凋亡较CON组和NC组明显增加(P＜0.05):CCK-8实验发现,eEF1 A1-shRNA转染细胞后细胞增殖能力较CON组和NC组明显下降;Transwell实验显示,CON组、eEF1A1-shRNA组、NC组迁移细胞数目为123.75±9.26、66.84±17.47、115.31±12.59,eEF1A 1-shRNA组细胞迁移能力较CON组和NC组显著减弱(P＜0.05).qRT-PCR和Western blot检测显示,eEF1A1-shRNA组eEF1A2、ANXA7在mRNA和蛋白水平的表达量较CON组和NC组明显降低(P＜0.05),相较其无处理组的蛋白表达水平,eEF1A2和ANXA7分别下降了57％和21％;ANXA7-shRNA组中eEF1A1、eEF1A2在mRNA和蛋白水平的表达量较CON组和NC组亦明显降低(P＜0.05).[结论]通过靶向eEF1A1的shRNA使eEF1A1低表达,可诱导细胞凋亡,抑制细胞的增殖能力及迁移能力.eEF1A1 、eEF1A2与ANXA7的表达密切相关,且eEF1A1与ANXA7存在相互作用,可能共同参与调控肿瘤的发生与发展.
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膜联蛋白7在转移性激素敏感前列腺癌原发灶组织中的表达及其意义
目的 检测膜联蛋白7(ANXA7)在转移性激素敏感前列腺癌(HSPC)原发灶组织中的表达,探讨对其预后意义.方法 取转移性HSPC原发灶组织106例,免疫组化检测标本ANXA7蛋白表达,分析其表达与常见临床病理指标和疾病无进展生存时间(PFS)及总生存时间(OS)的相关性.对照组为前列腺增生20例,去势抵抗性前列腺癌(CRPC)22例.结果 转移性HSPC原发灶组织ANXA7阳性表达率为50/106(47.2％),前列腺增生组织ANXA7全部阳性表达,CRPC组织为3/22(13.6％),差异比较均有显著统计学意义(P＜0.05).ANXA7表达减少与T分期、N分期级别高及Gleason评分高相关,生存分析显示ANXA7表达减少与较短的PFS和OS相关,ANXA7阳性和阴性表达者PFS中位值分别为24.4月和15.5月,OS中位值分别为56.4月和36.1月.结论 ANXA7在转移性HSPC原发灶组织中表达减少,其参与疾病进展过程,表达异常往往与患者不良预后相关.
关键词： 转移性激素敏感前列腺癌 ANXA7 疾病进展 预后
