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  • Krupple 样因子6调控诱导型一氧化氮合酶介导铜绿假单胞菌感染小鼠肺组织细胞凋亡的研究

    作者:喻志芳;韩彬;柴文戍

    目的:通过研究 Krupple 样因子6(KLF6)在铜绿假单胞菌感染肺组织中表达水平的变化,探讨 KLF6调控诱导型一氧化氮合酶(iNOS)介导铜绿假单胞菌感染小鼠肺组织细胞凋亡的机制。方法于2014年10—12月,30只小鼠随机分为对照组和低感染组,每组15只,低感染组注射铜绿假单胞菌1.0×107 CFU 制作动物模型,感染后3、9、24 h,分别随机取各组5只小鼠留取标本。另10只小鼠随机分为中感染组和高感染组,每组5只,分别注射铜绿假单胞菌5.0×107、1.0×108 CFU,均在感染后9 h 留取标本。在各时间点处死动物后无菌分离肺组织,左肺结扎后测定湿干重之比。采用 TUNEL 法检测肺组织细胞凋亡指数,采用硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)水平,化学比色法测定 iNOS 活性,采用 Western blotting 法检测肺组织 KLF6水平。结果光镜下可见低感染组小鼠肺组织大量炎性细胞浸润,肺泡隔增厚,肺泡壁结构破坏,局部有肺泡膨胀不全或肺泡塌陷,并扩散到肺间质内,24 h 时炎症改变为严重。3 h 时,对照组和低感染组肺组织湿干重之比比较,差异无统计学意义(P >0.05);9、24 h 时,低感染组肺组织湿干重之比大于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。低感染组不同时间肺组织凋亡指数比较,差异有统计学意义(P <0.05)。不同剂量铜绿假单胞菌感染9 h 后肺组织凋亡指数比较,差异有统计学意义(P <0.05)。3、9、24 h时,低感染组肺组织 NO 水平、iNOS 活性均高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。不同剂量铜绿假单胞菌感染9 h 后肺组织 NO 水平、iNOS 活性比较,差异均有统计学意义(P <0.05)。低感染组不同时间肺组织 KLF6表达水平比较,差异有统计学意义(P <0.05)。不同剂量铜绿假单胞菌感染9 h 后肺组织 KLF6表达水平比较,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论铜绿假单胞菌感染能诱导 KLF6的表达,并有可能通过 iNOS 调控介导细胞凋亡。

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