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Pokemon对NF-κB/p65基因在胶质瘤细胞中的表达调控

罗国轩;张煦;赵芝香;许丹;张勇;罗唯师

摘要: 目的:旨在研究原癌基因Pokemon对核因子-κB/p65(nuclear factor-kappa B,NF-κB)基因在胶质瘤细胞中的表达及调控作用.方法:采用小干扰RNA(siRNA)瞬时转染,抑制Pokemon在胶质瘤细胞的表达,采用实时荧光定量-PCR(Real-time PCR)和蛋白印迹法(Western blot)分别检测Pokemon、NF-κB/p65 mRNA和蛋白在胶质瘤细胞的表达情况.结果:在A172细胞中瞬时转染Pokemon siRNA后(36h,48h,60h),分别使用Real-time PCR和Western blot检测Pokemon与NF-κB/p65的mRNA和蛋白水平,结果显示,在Pokemon基因的mRNA(对照组1.0±0.0517(无效RNA片段),36h 0.712±0.1627,48h 0.634±0.0961,60h 0.562±0.0762差异具有统计学意义P<0.05)和蛋白(对照组vs实验组:36h 0.8±0.3517vs0.45±0.2991,48h 0.82±0.0842vs0.247±0.0723,60h 0.965±0.0762 vs0.149±0.0223差异具有统计学意义P<0.05)水平下降的同时,NF-κB/p65基因的mRNA(对照组1.0±0.0833(无效RNA片段),36h 0.405±0.0319,48h 0.364±0.0412,60h 0.355±0.0692差异具有统计学意义P<0.05)和蛋白(对照组vs实验组:36h 0.625±0.0547vs0.15±0.0792,48h 0.764±0.0426vs0.127±0.0842,60h 0.75±0.0587 vs0.519±0.0273差异具有统计学意义P<0.05)水平也明显下降,呈时间梯度改变,具有统计学差异(P<0.05).结论:原癌基因Pokemon在胶质瘤A172细胞中对NF-κB/p65有正向调控作用,与胶质瘤发生、发展过程关系密切.

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