首页 > 文献资料
-
原癌基因Pokemon与肿瘤的研究进展
Pokcmon基因定位于人类第19号染色体短臂1区3带中的第三亚带(19p13.3),具有2个外显子和2个内含子,其编码产物具有BTB域和锌指结构.在一些人类肿瘤如淋巴瘤、肺癌、结肠癌、前列腺癌和膀胱癌中表达水平很高.作为一种ARF的转录阻遏物,Pokcroon可以通过ARF-P53路径对细胞生长进行调节.并且还能与其它癌基因如Bcl-2,MDM2等联合作用显示其原癌基因的活性.因此,对Pokemon基因的进一步研究有助于对肿瘤的诊治提供新的途径和方法.
-
Pokemon癌基因控制细胞突变整个过程的研究
此过程的实现需要多个癌基因的激活.虽然已发现多个癌基因如c-myc、H-ras、N-ras等与肿瘤的发生有关,但目前尚没有一种基因被确定为大多数肿瘤的主要癌基因,因此寻找肿瘤的主要癌基因成为研究的热点.原癌基因Pokemon作为POK转录抑制因子中的一员,具有N端的BTB/POZ结构域和C端的Krüpple型锌指结构,初是作为特殊结合于人类免疫缺陷病毒I型(HIV-I)的启动子元件而被发现的.近来研究发现,Pokemon在肿瘤形成过程中发挥了重要的作用.2005年美国斯隆-凯特灵癌症中心研究人员发现该基因与肿瘤形成关系密切,并确定其为癌基因.Pokemon通过增强某些癌基因的表达或抑制一些抑癌基因和/或肿瘤抑制因子的表达,从而促进细胞的恶性转化,并且该基因控制着细胞突变的整个过程,此前发现的癌基因都不具备类似的功能[1].本文就Pokemon结构、功能及其与肿瘤的关系作一综述.
-
靶向Pokemon基因shRNA重组质粒的构建及其对HepG2细胞生长的影响
目的:观察携带shRNA的重组质粒对肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响,并初步探讨其分子机制.方法:设计3对针对Pokcmon基因不同位点的shRNA片段的真核表达载体,脂质体介导转染肝癌细胞株HepG2细胞.RT-PCR及Western blot检测转染前后Pokemon mRNA及蛋白质的 表达,MTT和流式细胞仪分析转染后细胞增殖及凋亡的变化,RT-PCR检测其可能的下游因子β-catenin及H-ras的表达.结果:成功构建含shRNA片段的重组质粒,依次命名为pshRNA1、2、3.转染HepG2细胞后,Pokemon基因的mRNA及蛋白质表达水平明显下调,以pshRNA2强,抑制率分别为75.2%(RNA水平)和72.6l%(蛋白质水平).MTT显示pshRNA2可明显抑制细胞增殖;流式细胞仪测定转染后细胞凋亡增加;RT-PCR显示下游因子H-ras的表达明显降低(P＜0.05),而β-catenin的表达没有变化(P＞0.05).结论:采用RNAi技术可以特异性阻断Pokemon 基因的表达;Pokemon基因有促进肝癌细胞株增殖及抑制其凋亡的作用,该效应可能与下调其下游因子H-ras的表达有关.
-
特殊的原癌基因pokemon
pokemon基因位于染色体19p13.3区域,是转录抑制因子POK(POZ and Kruppel)家族的一员,现已被确认为原癌基因,与肿瘤发生密切相关.它不仅参与细胞周期和细胞凋亡的调控,还能阻制关键的抑癌基因可变阅读框基因(ARF),在人类多种肿瘤中过度表达,并且缺少pokemon的细胞对致瘤转化不敏感.它还能控制其他癌基因的活性,并对肿瘤细胞的一些重要特性产生影响,可能是其他癌基因引发癌症所必需的.pokemon还在脂肪形成及人类免疫缺陷病毒(HIV)发生和发展中具有重要作用.
-
肾癌组织Pokemon基因表达及其生物学意义的研究
目的:探讨Pokemon基因在肾细胞癌组织中的表达及其生物学意义.方法:收集47例肾癌手术切除的癌、癌旁及邻近正常组织,用逆转录实时聚合酶链反应(Real time PCR)及蛋白质印迹法分别从核酸及蛋白水平检测标本中Pokemon基因的表达,并结合性别、年龄、肿瘤大小、病理分级和TNM分期等临床资料进行统计分析,对mRNA和蛋白表达的水平进行相关性研究.结果:Real-time PCR及蛋白质印迹法均检测出Pokemon在肾癌、癌旁及正常对照组织中的表达,差异有统计学意义,P＜0.05.肾癌组织中,Pokemon的表达与肿瘤病理分级有关,而与患者的性别、年龄、肿瘤大直径、TNM及病理类型无明显相关性.肾组织中,Pokemon的mRNA与蛋白的表达呈正相关,r=0.494,P＜0.05.结论:Pokemon表达和肾癌的发病及恶性程度有关,有望成为肾癌的预后指标和肾癌靶向治疗的有效靶点.
-
Pokemon和c-myc在结直肠癌中的表达及临床意义
目的 检测Pokemon和c-myc在结直肠癌、结直肠腺瘤和正常结直肠黏膜组织中的表达情况,研究结直肠癌组织中Pokemon和c-myc的表达与临床病理因素的关系.方法 收集86例结直肠癌患者肿瘤组织标本,60例结直肠腺瘤组织标本和40例正常结直肠黏膜组织标本.采用免疫组织化学法检测组织中Pokemon和c-myc蛋白表达情况,反转录聚合酶链反应检测组织中Pokemon和c-myc基因表达水平,并分析其与结直肠癌临床病理因素的关系.结果 结直肠癌组织中Pokemon和c-myc蛋白阳性表达率均明显高于结直肠腺瘤组织和正常结直肠黏膜组织[69.8％(60/86)比13.3％(8/60)和5.0％(2/40)、73.3％(63/86)比15.0％(9/60)和2.5％(1/40)],结直肠癌组织中Pokemon和c-myc基因表达水平均明显高于结直肠腺瘤组织和正常结直肠黏膜组织(0.915±0.247比0.358±0.102和0.277±0.085、1.272±0.360比0.398±0.153和0.255 ± 0.097),差异有统计学意义(P＜0.05).结直肠癌组织中Pokemon和c-myc基因的表达水平与肿瘤浸润程度、肿瘤分化程度、淋巴结转移、远处转移和Dukes分期有关,差异有统计学意义(P＜0.05),但与性别、年龄和肿瘤直径无关(P＞0.05).结论 Pokemon和c-myc在结直肠癌组织中高表达,且这种表达与结直肠癌临床病理特征有关,提示Pokemon和c-myc可作为结直肠癌患者临床治疗的评估指标.
-
Pokemon蛋白与肿瘤
Pokemon(POK erythroid ontogenic factor)蛋白,即POK红系髓性致癌因子,是POK转录抑制物家簇的一个成员,为ZBTB7基因所编码的产物.Pokemon蛋白作为转录因子参与一些细胞基因转录的调节,并在细胞分化过程中发挥着关键、多效性的功能.近来发现,Pokemon在致癌转化过程中发挥着至关重要的功能,并与肿瘤的发生密切相关.
-
原癌基因pokemon在人胶质瘤中的表达研究
目的 探讨原癌基因pokemon在胶质瘤中的表达水平.方法 分别使用Real-time PCR和western blot 技术检测胶质瘤(22例) 和正常脑组织(22例) 中pokemon的RNA水平和蛋白水平.结果 胶质瘤中pokemon的表达水平明显高于正常组织,差异有统计学意义(P <0.05).结论 原癌基因pokemon在胶质瘤发生发展过程中有着重要作用.
-
Pokemon蛋白在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达
目的:探讨Pokemon蛋白和p53、Bel-6蛋白在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的表达及相互关系.方法:采用免疫组化SP法检测Pokemon和p53、Bel-6在DLBCL中和反应性增生淋巴结(RLH)中的表达.结果:Pokemon在50例DLBCL和10例RLH中的表达分别为35例(70.0%)和1例(10.0%),Pokemon在DLBCL中的表达明显高于在RLH中的表达(P<0.01);Pokemon在20例GCB(Gernlinal Center origin ofB-cell)型(12/20,60.0%)和30例non-GCB(non-Geminal Center origin of B-cell)型DLBCL患者中(23/30,76.7%)的表达差异无统计学意义(P>0.05);而p53在GCB型DLBCL中的表达率(5/20,25.0%)明'显低于在non-CCB型DLBCL中的表达率(16/30,53.3%),P<0.05;35例Pokemon阳性DLBCL中p53阳性18例、Bel-6阳性16例,而在15例Pokemon阴性DLBCL中p53阳性3例、Bel-6阳性2例,在DLBCL中Pokemon表达分别与p53和Bcl-6的表达呈正相关.结论:Pokemon在恶性程度较高的non-GCB型的表达率较GCB型有更高趋势.Pokemon的阳性表达与突变型p53的阳性表达呈正相关,提示Pokemon蛋白和突变型p53蛋白共同参与了DLBCL的发生和发展,可能存在Pokemon-p53细胞转化通路在DLBCL的发病中起重要作用.
关键词： 弥漫性大B细胞淋巴瘤 Pokemon 免疫组织化学 -
Pokemon对NF-κB/p65基因在胶质瘤细胞中的表达调控
目的:旨在研究原癌基因Pokemon对核因子-κB/p65(nuclear factor-kappa B,NF-κB)基因在胶质瘤细胞中的表达及调控作用.方法:采用小干扰RNA(siRNA)瞬时转染,抑制Pokemon在胶质瘤细胞的表达,采用实时荧光定量-PCR(Real-time PCR)和蛋白印迹法(Western blot)分别检测Pokemon、NF-κB/p65 mRNA和蛋白在胶质瘤细胞的表达情况.结果:在A172细胞中瞬时转染Pokemon siRNA后(36h,48h,60h),分别使用Real-time PCR和Western blot检测Pokemon与NF-κB/p65的mRNA和蛋白水平,结果显示,在Pokemon基因的mRNA(对照组1.0±0.0517(无效RNA片段),36h 0.712±0.1627,48h 0.634±0.0961,60h 0.562±0.0762差异具有统计学意义P<0.05)和蛋白(对照组vs实验组:36h 0.8±0.3517vs0.45±0.2991,48h 0.82±0.0842vs0.247±0.0723,60h 0.965±0.0762 vs0.149±0.0223差异具有统计学意义P<0.05)水平下降的同时,NF-κB/p65基因的mRNA(对照组1.0±0.0833(无效RNA片段),36h 0.405±0.0319,48h 0.364±0.0412,60h 0.355±0.0692差异具有统计学意义P<0.05)和蛋白(对照组vs实验组:36h 0.625±0.0547vs0.15±0.0792,48h 0.764±0.0426vs0.127±0.0842,60h 0.75±0.0587 vs0.519±0.0273差异具有统计学意义P<0.05)水平也明显下降,呈时间梯度改变,具有统计学差异(P<0.05).结论:原癌基因Pokemon在胶质瘤A172细胞中对NF-κB/p65有正向调控作用,与胶质瘤发生、发展过程关系密切.
关键词： 胶质瘤 Pokemon 核因子NF-κB/p65 -
人肝癌细胞中原癌基因Pokemon上调Shp2的表达
目的 研究人肝癌细胞中Pokemon对Shp2表达的影响.方法 通过RT-PCR、Real time PCR和Western blot方法检测人肝癌细胞系QGY-7703和人正常肝细胞系HL-7702中Pokemon和Shp2的mRNA和蛋白表达水平差异；并通过瞬时转染si-Pokemon RNA沉默QGY-7703细胞中Pokemon使其低表达,再检测Shp2的mRNA和蛋白水平变化.结果 Pokemon在人肝癌细胞系QGY7703中的表达水平高于人正常肝细胞系HL-7702,Shp2的表达水平高低与Pokemon表达一致；在QGY-7703细胞中沉默Pokemon表达之后,Shp2的表达也相应降低.结论 原癌基因Pokemon作为一种转录因子,可能调控Shp2的表达.
-
Pokemon在卵巢癌中的表达及意义
目的 探讨卵巢癌中转录因子Pokemon的表达情况及意义.方法 采用免疫组化方法检测并比较30例卵巢癌癌组织及20例正常卵巢组织中Pokemon的表达情况,并分析Pokemon的表达与卵巢癌临床分期及组织分化程度的关系.采用蛋白免疫印记(Western blot)法检测10例卵巢癌及10例正常卵巢组织Pokemon的表达情况.结果 通过免疫组化方法,有52.63％ (19/30)的卵巢癌组织Pokemon呈阳性表达,正常卵巢组织Pokemon阳性表达为10％ (2/20) (P ＜0.05),卵巢癌组织中Pokemon的阳性表达在不同临床期别组中无统计学差异(P＞0.05),在不同分化程度组中无显著性差异(P＞0.05),但分级越差,表达率有升高的趋势.Western blot法中,10例卵巢癌组织中有9例呈强阳性表达,而10例正常组织中仅1例呈强阳性表达,Pokemon在两种组织中的表达水平差异显著.结论 Pokemon在卵巢癌组织中存在高表达.
-
Pokemon、mdm2蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义
目的 探讨Pokemon和mdm2蛋白与乳腺癌发生、发展的关系及其临床意义.方法 采用免疫组织化学S-P法检测54例乳腺癌及18例正常乳腺组织中Pokemon和mdm2蛋白的表达水平,分析其与乳腺癌临床病理学特征的关系,以及Pokemon与mdm2蛋白的相关性.结果 在乳腺癌和正常乳腺组织中,Pokemon蛋白的阳性表达率分别为74.1%(40/54)、16.7%(3/18);mdm2蛋白的阳性表达率分别为81.5%(44/54)、22.2%(4/18).两组中Pokemon与mdm2蛋白的阳性表达率均有统计学意义(P<0.05).Pokemon和mdm2蛋白的表达与乳腺癌腋窝淋巴结转移相关(P<0.05),与年龄、肿瘤大小、TNM分期、生存期无关( P>0.05 ).Pokemon蛋白表达与mdm2蛋白表达呈正相关(rs=0.588 ,P<0.05).结论 Pokemon与mdm2蛋白可能共同参与了乳腺癌的发生、发展和转移.Pokemon有望成为乳腺癌治疗的一个有效的靶基因,从而为乳腺癌基因治疗开辟新的途径.
-
大鼠肺鳞癌组织中Pokemon基因与MDM2基因表达的相关性
目的:探讨原癌基因Pokemon与癌基因MDM2在大鼠肺鳞癌发生发展过程中的表达及意义.方法:采用Wistar大鼠实验组灌注三甲基胆蒽与二乙基亚硝胺诱癌,对照组灌注碘油,采用原位杂交法检测肺鳞癌发生、发展各阶段的基因转录及表达水平.结果:实验组诱癌率为80％,其中支气管黏膜上皮增生28％,不典型增生17.3％,原位癌37.3％,侵袭癌26.7％,转移癌21.3％.Pokemon基因对照组与不典型增生组、鳞癌组比较差异有统计学意义;转移癌组和非转移癌组比较差异有统计学意义.MDM2基因对照组与不典型增生组、鳞癌组比较差异有统计学意义,转移癌与非转移癌比较差异有统计学意义.Pokemon基因与MDM2基因两者表达呈正相关.结论:Pokemon基因与MDM2基因在大鼠肺鳞癌的演进过程中呈现逐渐的高表达,两者可能共同参与了大鼠肺鳞癌的发生、发展过程.
-
调控Pokemon-p14ARF-p53通路对人结肠癌细胞增殖和凋亡的影响
背景:研究发现转录抑制因子Pokemon是一种关键性致癌因子,在多种人类恶性肿瘤中表达异常上调,在体内、外实验中均能促进细胞的肿瘤性转化.Pokemon对抑癌基因ARF具有特异性转录抑制作用.目的:应用RNA干扰技术抑制人结肠癌细胞株HT-29的Pokemon表达,观察其表达抑制对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响并探讨其可能的分子机制.方法:根据Pokemon cDNA序列设计干扰序列,构建重组干扰质粒,经脂质体介导转染入HT-29细胞.以real time RT-PCR和蛋白质印迹法检测Pokemon、p14ARF、p53表达,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡.结果:Pokemon siRNA能有效抑制HT-29细胞中的Pokemon mRNA和蛋白表达,mRNA相对表达量为0.29 ±0.04,同时p14ARF、p53 mRNA和蛋白表达明显上调,mRNA相对表达量分别为3.03 ±0.49和2.80±0.25.与转染无效序列siRNA的HT-29细胞相比,Pokemon表达抑制的HT-29细胞G0/G1期细胞比例增加(43.6％±2.3％对34.7％±1.9％,P ＜0.05),细胞凋亡增多(10.7％±1.9％对2.7％±0.4％,P＜0.05).结论:人结肠癌细胞中的Pokemon表达与p14ARF、p53表达之间存在负相关关系,抑制Pokemon可通过上调p14ARF-p53信号通路阻滞肿瘤细胞的细胞周期进程,并诱导细胞凋亡.调控Pokemon-p14ARF-p53信号通路有望作为结肠癌的治疗靶点.
-
原癌基因Pokemon的研究进展
Zbtb7基因位于人染色体19p13.3区带,其编码的产物POK家族具有BTB域和Kruppel锌指结构.通过早期小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)的实验,发现POK家族成员之一的Pokemon是ARF特异性转录抑制剂,通过ARF-P53路径对细胞生长进行调节.Pokemon过表达能使小鼠发生淋巴瘤,其还能与癌基因BCL-6联合作用显示原癌基因的活性,促进淋巴瘤的发生.所以认为该基因有望成为重要的肿瘤监视靶点.
-
POKemon和NF-κB p65在肝癌细胞中的信号调控
目的:旨在探讨原癌基因POKemon和核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB) p65在肝癌细胞中的信号调控作用.方法:采用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)和蛋白质印迹法分别检测POKemon、NF-κB p65 mRNA和蛋白在肝癌细胞株HepG2和SMMC7721及人胚胎肝细胞LO2中的表达情况;随后应用小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)法依次分别抑制POKemon和NF-κB p65在肝癌细胞中的表达,观察二者在肝癌细胞中的变化,并应用FCM法检测对肝癌细胞凋亡的影响.结果:POKemon和NF-κB p65在肝癌细胞HepG2和SMMC7721中的表达量明显高于人胚胎肝细胞LO2;特异性针对POKemon基因的siRNA抑制POKemon的表达后,NF-κB p65在HepG2和SMMC7721细胞中的表达量也明显下降,转染前后分别为2.12±0.14vs 1.37±0.11和2.08±0.16vs 1.35±0.13,差异有统计学意义(P＜0.05),且肝癌细胞凋亡明显增加分别为(5.07±0.46)％vs (39.65±3.75)％和(5.71±0.83)％vs (33.21±3.66)％,差异有统计学意义(P＜0.05);特异性针对NF-κB基因的siRNA抑制NF-κB p65的表达后,POKemon在HepG2和SMMC7721细胞中的表达则无明显变化,其表达量转染前后分别为1.86±0.12vs 1.90±0.13和1.91±0.11 vs 1.85±0.11,差异无统计学意义(P＞0.05),但明显提高HepG2和SMMC7721细胞的凋亡率,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:原癌基因POKemon可通过调控NF-κB p65的表达而阻遏肿瘤细胞凋亡,促进肝癌的发生、发展.
-
非小细胞肺癌中pokemon表达与p 14ARF、bcl-2的相关性及对预后的影响
目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)组织中pokemon表达和p 14ARF、bcl-2表达的关系及其对NSCLC临床病理特征和预后的判定价值.方法:应用SP免疫组织化学方法检测pokemon和p 14ARF、bcl-2三种蛋白在62例NSCLC肿瘤组织及20例癌旁正常组织中的表达,分析它们与NSCLC病理学特征的关系,以及pokemon与p 14ARF、bcl-2的相关性,并结合随访资料观察上述蛋白表达对NSCLC长期预后的影响.结果:正常肺组织中未见pokemon蛋白表达,p 14ARF和bcl-2蛋白阳性表达率分别为95.0%和15.0%;在NSCLC组织中pokemon、p14ARF和bcl-2阳性表达率分别为72.6%、66.1%和53.2%.Pokemon表达与p 14ARF表达呈负相关(r =-0.287,P＜0.05),与bcl-2表达呈正相关(r =0.293,P＜0.05).Pokemon和p 14ARF的表达与TNM分期相关(P＜0.05),bcl-2表达与病理分型相关(P＜0.05).Pokemon与bcl-2表达阳性组的5年生存率分别为10.95%和13.74%,显著低于阴性组(P＜0.05);p 14ARF表达阳性组的5年生存率为21.68%,显著高于阴性组(P＜0.05). 结论:NSCLC组织中存在pokemon和p 14ARF、bcl-2的表达,pokemon表达与p 14ARF表达呈负相关、与bcl-2表达呈正相关,它们对NSCLC的预后评估有一定的临床意义.
-
Pokemon基因表达与胃癌耐药性的关系
目的 探讨okemon基因表达与胃癌细胞药敏性及耐药基因的关系.方法 取60例胃癌组织和癌旁组织石蜡标本,采用免疫组化技术检测组织中pokemon蛋白及耐药相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、肺耐药蛋白(LRP)、生存素(survivin)的表达,并分析pokemon蛋白与其他4种蛋白的关系.采用磺酰罗丹明B(SRB)蛋白染色法检测5-氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂(DDP)、奥沙利铂(L-OHP)对胃癌细胞株SGC7901、胃癌耐药细胞株SGC7901/ADR、胃上皮细胞株GES-1的抑制作用;qPCR及蛋白质印迹法检测上述3种细胞株中pokemon和耐药基因的表达.合成针对pokemon的siRNA并转染SGC7901/ADR细胞,检测转染前后SGC7901/ADR细胞的化疗药敏性及耐药基因的变化.结果 胃癌组织中pokemon、P-gp、MRP1、LRP、survivin蛋白的阳性表达率均高于癌旁组织(P＜0.05);pokemon蛋白表达与P-gp、survivin蛋白表达间存在正相关关系(r=0.385 2,P=0.002;r=0.342 4,P=0.007).Pokemon、P-gp、MRP1、survivin蛋白在SGC7901/ADR细胞株中的表达高于细胞株SGC7901及GES-1;SGC7901/ADR细胞株的耐药性强,SGC7901次之,GES-1弱(P＜0.01).Pokemon-siRNA转染SGC7901/ADR细胞后细胞中pokemon mRNA的表达明显受到抑制;转染后化疗药物对细胞的抑制能力增强,P-gp、survivin表达减弱(P＜0.05).结论 Pokemon与P-gp、survivin通过相互调控而促进胃癌耐药性的形成.Pokemon可能成为胃癌靶向治疗的候选基因.
关键词： 胃肿瘤 Pokemon 药物敏感性 多药耐药相关蛋白质类 -
Pokemon在胃癌组织中的表达及其临床意义
目的 检测Pokemon基因在胃癌组织和癌旁正常胃黏膜组织中的表达水平,并分析其与临床病理特征之间的关系.方法 采用免疫组织化学Eli Vision法检测75例胃癌组织和35例癌旁正常胃黏膜组织中Pokemon蛋白的表达.应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测30例新鲜胃癌组织及相应癌旁正常胃黏膜组织中Pokemon mRNA的表达.结果 免疫组织化学分析结果显示,在胃癌和癌旁正常胃黏膜组织中,Pokemon蛋白的阳性表达率分别为78.7％ (59/75)和34.3％ (12/35),差异具有统计学意义(P＜0.05);RT-PCR结果显示,30例新鲜胃癌组织中Pokemon mRNA的表达水平显著高于相应癌旁正常胃黏膜组织,差异有统计学意义(P＜0.05);胃癌组织中Pokemon的表达与浸润深度、临床分期和淋巴结转移有关(P＜0.05).结论 Pokemon在胃癌的发生、发展和侵袭转移中具有重要作用,可能成为胃癌治疗的有效靶点.
关键词： Pokemon 胃癌 反转录-聚合酶链反应 免疫组织化学
