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临沂市消除丝虫病防治技术研究

张纪霖;刘庆文;张永建

摘要: 山东省临沂市12县(区)均为丝虫病流行区,人群平均微丝蚴阳性率为15.3%.经反复查治,1983年达到基本消除丝虫病标准.1984年开展病原学、血清学及蚊媒3项监测,达到消除丝虫病标准.

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    作者:李锴;吴宏烨;范俊杰;王芬;刘许诺;张静;叶彬

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    目的 探讨复杂性肝多房棘球蚴病的临床治疗策略,总结治疗经验.方法 回顾性分析2015年10月至2017年10月青海大学附属医院收治的复杂性多房棘球蚴病患者资料,根据病灶分布情况,将中晚期或晚期患者纳入本研究,排除肝细粒棘球蚴病患者、早期肝多房棘球蚴病患者、仅行阿苯达唑药物治疗的患者.按照治疗方式分为准根治性切除组、姑息性切除组、肝移植组,分析患者的手术时间、术中出血量、术后并发症及复发随访情况.应用SPSS 20.0统计学软件对数据进行统计分析.结果 符合纳入标准的患者98例,其中男40例,女58例,男女性别比1∶1.45;患者年龄5~72岁,平均年龄38岁.准根治性切除组术后并发症发生率为55.7% (34/61),其中低蛋白血症伴胸腔积液18例、肺部感染9例、切口感染3例、胆漏4例;术后复发率14.8%(9/61),随访期间死亡3例.姑息性切除组术后并发症发生率41.4% (12/29),其中胆漏合并残腔感染5例、肺部感染伴胸腔积液3例、2例梗阻性黄疸、1例切口感染、1例胆管-支气管漏;术后复发率17.2% (9/29),随访期间死亡3例.准根治性切除与姑息性切除组术后并发症和复发率相比较无统计学意义(P>0.05),但在手术时间及出血量方面的差异具有统计学意义(P<0.05).肝移植组8例患者中,有4例死亡,包括1例急性排斥反应后多器官功能衰竭、2例凝血功能障碍致消化道出血、1例肝肾综合症,余4例患者均获得长期生存.结论 复杂性肝多房棘球蚴病应针对患者病情制定个体化治疗方案,结合多学科诊疗模式,遵循损伤控制外科原则,以使患者大化获益.

  • 大片形吸虫排泄分泌产物对体外培养LO2人肝细胞的影响

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    目的 初步探讨大片形吸虫排泄分泌产物(FgESP)对体外培养LO2人肝细胞的增殖及对肝细胞损伤相关的生化指标的影响.方法 将LO2人肝细胞分为5个密度组(1 000、3 000、5 000、7 000、10 000个/孔),铺于96孔板中,空白对照组只加入培养基,根据LO2细胞生长曲线选择适细胞铺板密度.在96孔板中,以适细胞密度铺板,分为0.02、0.10、0.20、0.40、1.00 mg/ml FgESP等5组,每组设4个重复,以PBS作为阴性对照组,在培养箱中孵育4、8、12、24、48和72 h后进行MTT细胞活性检测,测吸光度(A490值).在24孔板中,分为0.02、0.10、0.20、0.40、1.00 mg/ml FgESP等5组,每组设3个重复,以PBS作为阴性对照组,分别在培养4、8、12、24、48和72 h后,收集LO2细胞上清,测定碱性磷酸酶(ALP)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、白蛋白(ALB)的含量.采用GraphPad Prism 6.0软件进行统计学分析.结果 根据LO2人肝细胞生长曲线,筛选出5 000个/孔为96孔板佳铺板密度.FgESP作用72 h后,MTT细胞活性检测结果显示,0.02、0.10、0.20、0.40、1.00 mg/ml FgESP等5组的A 490值分别为1.29±0.01、1.28±0.06、1.13±0.08、0.97±0.06、0.25±0.01,均低于对照组(1.45±0.05) (P< 0.01).生化指标检测结果显示,0.40、1.00 mg/ml FgESP作用细胞LO2人肝72 h后,ALT含量分别为2.00±0.00、3.67±0.58,AST含量分别为5.33±0.58、7.67±0.58,均高于对照组的(P<0.01);作用48 h后,1.00 mg/ml FgESP组ALT、AST含量分别为2.00±0.00、7.00±0.00,高于对照组的0.33±0.58、3.67±0.58 (P< 0.01);在12~72 h内,0.10、0.20、0.40、1.00 mg/mlFgESP作用后ALP含量升高(P<0.01),而0.02 mg/ml FgESP仅在作用72 h后ALP含量升高(P<0.01);各实验组ALB含量与阴性对照组差异无统计学意义(P>0.05).结论 FgESP体外作用可抑制LO2人肝细胞增殖能力,且细胞增殖的抑制及损伤程度与FgESP的浓度相关.

  • 屋尘螨3类变应原基因的克隆、表达及免疫原性分析

    作者:古霞;欧阳春艳;袁如意;袁谢芳;李国平;刘志刚

    目的 克隆、表达屋尘螨3类变应原(Der p 3)基因,纯化Der p 3重组蛋白,对其免疫原性及生物信息学特点进行分析.方法 取实验室纯培养的屋尘螨500只,提取总RNA,逆转录生成eDNA,RT-PCR扩增Der p 3基因.扩增的Der p 3基因经测序正确后,将目的条带连接至pMD-32T载体中进行扩增,并利用限制性内切酶EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切,酶切后的片段连接至pET-32a表达载体,转化至大肠埃希菌Rosetta中,经1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,蛋白质印迹(Western boltting)分析重组蛋白的免疫原性.分别采用BLAST、ProtParam、PSIPRED、SWISS-MODEL对重组蛋白的同源性、理化性质、二级结构、三级结构进行分析;通过BLAST和MEGA构建Der p 3的系统进化树;并利用IEBD和DNA Star对Der p 3重组蛋白的抗原表位进行预测.结果 RT-PCR扩增屋尘螨Der p 3基因,得到约1 000 bp的片段,经测序为Derp 3目的序列,其开放阅读框为786 bp,编码261个氨基酸.经IPTG诱导后大量表达Derp3重组蛋白.该蛋白主要以包涵体形式存在,相对分子质量(Mt)约30 000.Western blotting分析结果显示,重组蛋白Derp 3能与10份尘螨过敏性哮喘息者血清IgE抗体特异性结合.BLAST和MEGA分析结果显示,Der p 3基因与粉尘螨3类变应原(Der f 3)的序列一致性较高,约80%.Der p 3蛋白较稳定,二级结构由螺旋、延伸链、随机线圈组成;并预测到6个抗原表位肽序列.结论 纯化后的Derp 3重组蛋白能与尘螨过敏性哮喘患者血清IgE抗体特异性结合,具有较强免疫原性.

  • 2011-2017年内蒙古自治区棘球蚴病流行特征分析

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  • 新疆塔城地区棘球蚴病流行现状调查

    作者:阿达来提·托留汉;漫格库丽·哈提木拉提;阿合里江·卡依多拉;哈丽努尔·热西提;阿吉古丽·热合木吐;王钦琰;党希玲;阿布来提·阿不都开里木

    目的 了解和掌握新疆塔城地区棘球蚴病的流行现状.方法 于2015-2017年随机选择塔城地区塔城市、乌苏市、额敏县、沙湾县、托里县、裕民县和和丰县等7个县(市)的6岁及以上儿童和居民进行腹部B超检查棘球蚴病患病情况.每县随机抽取1~2所小学,B超检查6~12岁儿童棘球蚴患病情况,并采集血样,ELISA检测血清抗棘球蚴IgG抗体.各调查点采集家犬粪样,ELISA检测棘球绦虫粪抗原.采用内脏剖检法检查家畜棘球蚴感染情况.结果 共B超检查277 615人,人群棘球蚴病检出率为0.25% (683/277 615),均为细粒棘球蚴病病例.2015-2017年人群棘球蚴病检出率分别为0.15% (131/84 882)、0.23% (238/101 509)和0.34%(314/91 224),呈逐年上升趋势(P< 0.005).7个县(市)均存在棘球蚴病流行,以和丰县较高,人群棘球蚴病检出率为0.56% (65/11 606),不同县(市)检出率差异有统计学意义(P<0.01).男性和女性棘球蚴病检出率分别为0.24% (345/141 584)和0.25% (338/136 031),两者差异无统计学意义(P>0.05).不同年龄组中,人群棘球蚴病检出率以35~59年龄组较高,为0.35% (113/31 843);各年龄组检出率差异有统计学意义(P<0.01).不同职业中,人群棘球蚴病检出率以农民较高,为0.41% (365/88 411);不同职业人群检出率差异有统计学意义(P< 0.01).共检测儿童血清18 560份,血清抗棘球蚴IgG抗体阳性190份,阳性率为1.02%,呈逐年上升趋势(2015年:0.60%,49/8 167;2016年:0.71%,43/6 034;2017年:2.24%,98/4 359) (P<0.01);不同县(市)儿童血清抗体阳性率以和丰县较高,为3.16% (60/1 900) (P< 0.01).共检测犬粪34 343份,粪抗原阳性率为1.04% (356/34 343),以2016年较高,为1.71% (206/11 824),3年的犬粪抗原阳性率差异有统计学意义(P<0.01);各县(市)均检出犬粪抗原阳性,以和丰县较高,为3.16% (98/3 100) (P<0.01).共检查家畜(羊)4 008只,棘球蚴感染检出率为1.05% (42/4 008),其中,2015年家畜感染检出率较高,为1.67%(30/1 800),3年的感染检出率差异有统计学意义(P<0.01).结论 2015-2017年新疆塔城地区人群棘球蚴病检出率、儿童血清抗棘球蚴抗体阳性率、犬粪棘球绦虫抗原阳性率呈不同程度的上升趋势.

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    目的 了解广西壮族自治区宾阳县和灵山县水源中隐孢子虫和蓝氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)的污染情况.方法 利用质控标样检验碳酸钙絮凝和膜过滤富集隐孢子虫卵囊、贾第虫包囊的回收率,并与我国的国标方法比较.2016、2017年6-9月,采集广西壮族自治区宾阳县(自来水厂A、B、C、D和E)和灵山县(自来水厂F、G、H、I和J)10个自来水厂的进水和出厂水水样,应用碳酸钙絮凝法富集进水中隐孢子虫卵囊和贾第虫包囊,膜过滤法富集出厂水中隐孢子虫卵囊和贾第虫包囊;富集后用磁珠分选和荧光染色检测隐孢子虫卵囊和贾第虫包囊,计算水样中隐孢子虫卵囊和贾第虫包囊的密度.结果 碳酸钙絮凝法富集质控标样隐孢子虫卵囊和贾第虫包囊的回收率分别为48.5%和52.0%,膜过滤法为35.0%和36.5%,国标方法为15.0%和16.0%,碳酸钙絮凝法、膜过滤法的回收率均高于我国国标方法,差异具有统计学意义(碳酸钙絮凝法:x2=26.007、28.877,均P<0.01;膜过滤法:x2=8.167、11.019,均P<0.01).10个自来水厂中,每个自来水厂采集进水和出厂水水样各2份.检测结果显示:自来水厂A的进水、B的进水和出厂水、C和F的出厂水中检出隐孢子虫卵囊,密度分别为4.0、10.0、0.6、2.9、5.1个/10L;自来水厂F的出厂水中检出贾第虫包囊,密度为9.3个/10 L.其余自来水厂的进水和出厂水均未检出隐孢子虫和贾第虫.结论 广西壮族自治区宾阳县和灵山县部分自来水厂的进水或出厂水中存在隐孢子虫或贾第虫污染,需加强农村地区饮用水隐孢子虫和贾第虫的监测.

  • 上海市动物园蛇曼氏裂头蚴感染情况

    作者:卢艳;陈家旭;李浩;蔡玉春;艾琳;储言红;宋鹏;陈韶红

    目的 了解上海市动物园蛇曼氏裂头蚴感染情况.方法 2017年对上海市动物园送检的30条蛇进行解剖检查,分离曼氏裂头蚴,记录寄生部位和数量;新鲜虫体经盐酸卡红染色后,于显微镜下进行形态学鉴定.提取虫体基因组DNA,PCR扩增曼氏裂头蚴线粒体基因细胞色素c氧化酶亚单位1(cytochrome c oxidase subunit 1,cox1)、细胞色素b(cytochrome b,cytb),并进行测序分析.结果 上海市动物园送检蛇的裂头蚴总感染率为86.7% (26/30),共检获裂头蚴626条,感染度为24.1条/蛇.其中6条王锦蛇中有3条感染裂头蚴,感染度为1.33条/蛇;乌梢蛇的感染率为95.8% (23/24),感染度为27.0条/蛇.裂头蚴主要寄生于蛇肌肉组织,占总数的52.9% (331/626).显微镜下观察,所获虫体具有曼氏裂头蚴的形态特征.cox1基因和cytb基因的PCR扩增产物分别约为470 bp和1 400 bp.对26条蛇中分离的裂头蚴cox1和cytb基因序列一致性分析结果显示,cox1基因的序列一致性为96.4%~100%,cytb基因的为97.8%~100%.与GenBank中的绦虫序列进行比对,发现其与欧猥迭宫绦虫(GenBank登录号为KP738288、AB374543)的序列一致性为99.8%~100%,与其他种类绦虫的序列一致性为54.2%~84.4%.结论 上海市动物园送检蛇的曼氏裂头蚴感染率较高,蛇的曼氏裂头蚴可感染人类,需加强防控.

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    目的 分析浙江省1995年达到血吸虫病传播阻断标准后输入性疫情动态变化及其影响因素.方法 采用回顾性调查法收集1996-2017年浙江省输入性血吸虫病疫情、本地螺情等资料,建立数据库,对病例三间分布、感染状况、诊疗情况和螺情风险因素进行分析.结果 1996-2017年浙江省30个县(市、区)共报告输入性血吸虫病病例245例,包括急性病例41例.其中241例为国内其他省份输入,主要来自毗邻的江西省和安徽省,分别占37.3% (390/241)和29.9% (72/241);境外输入埃及血吸虫病病例3例和曼氏血吸虫病病例1例,均来自非洲的尼日利亚.输入性病例数在2005年之前呈上升趋势,之后呈下降趋势.每年下半年报告的输入性病例数较多,合计占总报告输入性病例数的80.8% (198/245).全省共30个县(市、区)有输入性血吸虫病病例报告,其中杭州、宁波、嘉兴、湖州、绍兴、金华、衢州和台州8个历史流行市25个流行县累计报告输入性病例230例,5个非流行县报告输入性病例15例.输入性血吸虫病病例报告多的为宁波市,占55.9% (137/245),杭州市和衢州市次之,分别占18.4% (45/245)和6.9% (17/245).245例病例中,男性180例,女性65例;学历以初中和小学为主,分别占49.4% (121/245)和29.8% (73/245);职业以农民、工人和学生为主,分别为42.0% (103/245)、23.3% (54/245)和14.7% (36/245).国内其他省份输入的241例病例中,85.1% (205/241)的病例感染地为当年的血吸虫病未控制地区或疫情回升地区,12.4% (30/241)的病例感染地为当年的血吸虫病传播控制地区.感染方式以游泳戏水和农业生产用水接触为主,分别占37.1% (91/245)和36.3% (89/245).疾病预防控制机构主动监测查病报告病例占51.4% (126/245),医院被动报病报告病例占48.6% (119/245).病例首诊医疗机构以县级多,为59.6% (146/245),被动报病中有49.6% (59/119)存在首诊误诊情况.全省除宁波、丽水市外,累计有7个市30个流行县发现有钉螺孳生,累计查到有螺面积1 739.0 hm2.结论 1996-2017年浙江省通过主动监测和被动报病共发现输入性血吸虫病病例245例,年病例数自2005后逐年下降,主要感染地为国内当年的血吸虫病未控制地区或疫情回升地区.

中国寄生虫学与寄生虫病

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