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甲氨喋呤和三磷酸腺苷诱导U937细胞凋亡机制探讨

卢青;肖广芬;陈艳华
关键词: p73 细胞凋亡 U937细胞

摘要: 目的:探讨甲氨喋吟、三磷酸腺苷诱导髓性白血病细胞系U937细胞凋亡过程中P73mRNA的表达变化,以进一步了解P73基因在U937细胞凋亡中的作用.方法:用上述药物诱导U937细胞凋亡,凋亡指标采用细胞形态学、DNA片段电泳、流式细胞术检测DNA含量等方法;采用半定量逆转录PCR(RT-PCR)检测P73mRNA的表达变化.结果:甲氨蝶呤、三磷酸腺苷均可诱导U937细胞凋亡.5μmol/L的甲氨蝶呤和0.25g/L的三磷酸腺苷分别作用于U937细胞6h、24h,光镜下见细胞明显聚集、体积缩小,Wright's+Giemsa染色见染色质明显浓缩、核碎裂等现象,而对照组未出现上述现象;DNA片断电泳见清晰的梯形条带;流式细胞仪检测:5μmol/L的甲氨蝶呤作用于U937细胞6h、8h、10h,细胞的凋亡率分别为:5.15%、11.43%、14.7%,0.25g/L的三磷酸腺苷作用于U937细胞24h、36h、48h细胞的凋亡率分别为:2.33%、11.90%、35.49%,而对照组的细胞凋亡率分别为:0.00%和1.09%;半定量RT-PCR结果:与对照组相比,仅三磷酸腺苷处理48h组P73mRNA的表达下调.结论:在U937细胞凋亡过程中P73的mRNA表达差异无统计学意义.

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