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肾阴虚证cDNA文库的构建

赵晓山;罗仁;张曦倩;罗云坚;黄穗平;李玉萍;崔丽娟

摘要: 目的 探讨肾阴虚证的相关基因.方法 以辨病与辨证相结合,从糖尿病、慢性肾炎、狼疮性肾病以及亚健康状态等肾阴虚证入手,应用RNA微量扩增、抑制性消减杂交、基因克隆等技术和方法,分别构建肾阴虚证的cDNA子消减文库,再运用核酸分子杂交原理和PCR进一步筛选上述消减文库中的相同部分,以构建肾阴虚证的共同文库,然后将PCR产物与U载体连接,经蓝白斑筛选后,再用PCR方法插入片段筛选出阳性重组质粒.结果 该研究成功地构建了肾阴虚证的cDNA文库,其中正向消减文库共获得625个阳性克隆,反向消减文库获得736个阳性克隆.结论 该研究初步构建了肾阴虚证的cDNA文库,为进一步克隆肾阴虚证的相关基因奠定了基础.

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