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反义RNA逆转耐药肝癌基因工程细胞株多药耐药性的实验研究

李波;叶田;李德华;陈永兵;张孟瑜;贺凯;冯春红;陈星;徐松波;倪建彬;罗亮;夏先明

摘要: 目的 通过重组腺病毒表达出mdr1基因的反义RNA,观察反义RNA对人肝癌基因工程细胞株HepG2/K多药耐药性的逆转效应.方法 利用真核表达载体构建可以稳定表达mdr1基因和P糖蛋白的肝癌基因工程细胞株HepG2/K,通过腺病毒载体AdEasy系统生成重组腺病毒pAdEasy-GFP-ASmdr1,将此病毒感染HepG2/K,用KT-PCR检测mdr1 mRNA的表达强度,流式细胞仪检测细胞膜p-糖蛋白的表达和柔红霉素的蓄积率,HepG2/K细胞对阿霉素的耐药性用MTT法检测.结果 HepG2/R细胞感染重组腺病毒后,RT-PCK检测表明mdr1 mRNA表达下降,流式细胞仪检测证实P-gP表达下降和柔红霉素的蓄积率增加,MTT法表明HepG2/K细胞对阿霉素的IC_(50)从25μg/mL下降到3μg/mL.结论 反义RNA通过抑制mdr1 mRNA和P-gp的表达.

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