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野生型PTEN过表达对体外活化肝星状细胞内钙离子浓度的影响

郝礼森;宋小杰;王玉兰;刘玉龄;宋洁;张明婷;靳丽敏;张朋垒

摘要: 目的 探讨野生型第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)过表达对体外活化肝星状细胞(HSC)内钙离子浓度的影响.方法 体外培养活化大鼠肝星状细胞系(HSC-T6),利用腺病毒载体,将野生型PTEN基因转染活化HSC;Western blot及实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测HSC的PTEN蛋白及mRNA表达;采用钙离子荧光探针Rhod-2/AM,于激光扫描共聚焦显微镜下检测HSC内钙离子浓度变化.实验分组:①Control组:腺病毒转染时以DMEM代替病毒液;②Ad-GFP组:转染表达绿色荧光蛋白(GFP)的对照空病毒Ad-GFP;③Ad-PTEN组:转染携带野生型PTEN基因并表达GFP的重组腺病毒Ad-PTEN.结果 野生型PTEN在活化大鼠HSC大量表达,3组HSC内钙离子浓度比较,差异有统计学意义(P<0.05),Ad-PTEN组HSC内钙离子浓度(251.60±90.88)低于Control组(1953.95±132.99)及Ad-GFP组(1937.57±115.17),而Control组与Ad-GFP组之间HSC内钙离子浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 野生型PTEN过表达可降低体外活化大鼠HSC内钙离子浓度.

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