深圳地区铜绿假单胞菌医院感染及耐药性
摘要： 目的了解铜绿假单胞菌(PA)引起医院感染的特点以及对抗生素的耐药性的变化趋势.方法对2001～2003年分离出的317株铜绿假单胞菌选用12种抗生素进行药敏实验,按NCCLS标准判断.结果该菌主要来源于痰液和咽拭子(65%),主要分布在呼吸科(12%)、脑外科(12%)、ICU(10%)、新生儿科(9%)、呼吸科ICU(7%)、老年病科(7%).2001年～2003年铜绿假单胞菌对环丙沙星耐药率呈上升趋势,2001年～2002年对头孢噻肟耐药呈直线上升,2003年稍有下降.2001年～2003年对哌拉西林(PIP)、哌拉西林/他唑巴坦(TZP)、庆大霉素(GEN)、阿米卡星(AMK)、头孢吡肟(FEP)、氨曲南(ATM)、头孢他啶(CAZ)耐药率呈下降趋势.2001年～2002年对亚胺培南(IPM)、美罗培南(MEM)耐药率呈显著下降趋势,2002年～2003年稍有上升.对头孢曲松(CRO)耐药率相对稳定.结论了解铜绿假单胞菌的耐药现状,有利于为临床合理用药提供依据.
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神经肽Y活化大鼠心肌细胞内Ca2+及钙调素依赖的钙调神经磷酸酶途径
目的 观察神经肽 Y (NPY)对心肌细胞内Ca2+及钙调素(CaM)依赖的钙调神经磷酸酶(CaN)信号传导途径的影响.方法 以NPY刺激心肌细胞.用环胞素A(CsA)特异性抑制CaN活性.应用Western印迹测细胞内CaN-α蛋白表达.采用组织化学法测CaN酶活性.用Fluo3-AM荧光标记法观察心肌细胞胞质及核内钙离子浓度变化.结果 加入100 nmol/L NPY刺激后,心肌细胞CaN酶活力较对照组明显增高(P＜0.05),10 nmol/L NPY组和CsA 组(100 nmol/L NPY + 5 μg/ml CsA) CaN酶活性与对照组相比,差异无统计学意义.100 nmol/L NPY组心肌细胞内CaN-α蛋白表达较对照组显著增高(P＜0.05). 加入100 nmol/L NPY在10 min内,心肌细胞胞浆及核内钙含量与对照组相比,差异无统计学意义.经100 nmol/L NPY刺激24 h后,心肌细胞胞浆及核内钙含量明显高于对照组(P均＜0.01).结论 NPY可活化心肌细胞内Ca2+及CaM-CaN途径.NPY刺激下产生的细胞内钙增加,可能是其活化CaN途径的始动环节.
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老年高血压患者血压变异性对左心室肥厚的影响
目的观察血压变异性(BPV)对老年性高血压患者左心室肥厚的影响 .方法老年性高血压患者100例,根据左室重量指数[LVMI]分为两组: 左室肥厚组和非左室肥厚组,进行24小时动态血压监测,以各时段(日间、夜间及24小时)血压的标准差作为血压变异性的量化指标.结果左室肥厚组日间、夜间及24小时收缩压BPV显著高于非左室肥厚组(p<0.01),日间、夜间及24小时收缩压 BPV与LVMI呈正相关,舒张压BPV与LVMI无相关性.结论收缩压B PV与高血压左室肥厚的发生和肥厚程度有关,老年性高血压患者更容易出现左室肥厚,在治疗老年性高血压时,要注意平稳降压.
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放射活性103Pd粒子近距离照射治疗肿瘤初步研究
目的研究放射活性103钯(103Pd)粒子近距离照射各种肿瘤的治疗效果及应用价值. 方法 31例确诊为恶性肿瘤患者通过不同方式植入103Pd粒子,观察肿瘤大小变化、局部复发和远处转移情况;并按RTOG/ EORTC急性或后期放疗副作用评分标准进行评分. 结果近期疗效观察理想,副作用小,安全可行.RTOG/EORTC评分0分有28/31例.2/31例死亡患者在行此治疗前均已经发生远处转移,后死于重要脏器衰竭. 结论 103Pd 粒子适用于对射线低至中性敏感的肿瘤永久性植入治疗.
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活化CDC42相关激酶1表达与食管鳞状细胞癌侵袭转移的相关性研究
目的：探讨活化CDC42相关激酶1（ACK1）表达与食管鳞状细胞癌侵袭转移的相关性。方法采用RT?PCR技术、免疫组化检测了45例新鲜深低温保存的食管鳞癌组织及癌旁正常粘膜组织样本中ACK1 mRNA、ACK1蛋白表达情况；分析5株食管鳞癌细胞系中ACK1的表达状况，可使用Western印迹进行检测。分析ACK1在mRNA水平和蛋白水平差异表达与食管鳞癌各临床病理特征之间的关系。结果 ACK1 mRNA和蛋白在食管癌旁正常粘膜组织中仅有较低水平的表达，而在食管鳞癌组织中，ACK1 mRNA在60%（27/45）的食管鳞癌组织中表达上调，ACK1蛋白在64.4%（29/45）食管鳞癌组织中表达上调，而且这种表达变化具有良好的一致性（P=0.02）。统计学分析显示ACK1 mRNA和蛋白的高表达均与病人的淋巴结转移、肿瘤分期相关（P<0.05）。免疫组化结果显示ACK1在大多数食管鳞癌细胞的胞浆中表达上调，在癌巢周边外侵的肿瘤细胞中ACK1蛋白表达更为丰富，这个现象也表明ACK1高表达与肿瘤细胞侵袭能力正相关。结论 ACK1高表达与食管鳞癌的恶性表型和不良预后呈正相关。通过检测ACK1也许可以预期食管鳞癌侵袭和淋巴结转移发生的概率，判断肿瘤预后转归，为肿瘤个体化治疗提供依据。
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下呼吸道感染产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药基因检测及亲缘性分析
分析下呼吸道感染患者气道分泌物或痰液标本分离的产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBL)肺炎克雷伯菌耐药基因的特点及亲缘性。方法 2009年1月至2010年8月由本院呼吸病区住院的下呼吸道感染患者气道分泌物或痰液标本分离得到53株肺炎克雷伯菌,采用K-B纸片扩散法测定其对常用抗菌药物的敏感性;三维实验检测AmpC酶;PCR检测ESBL、质粒介导的AmpC酶、喹诺酮类耐药基因、耐消毒剂-磺胺基因qacE△1-sul1、Ⅰ类整合酶基因Int Ⅰ 1的携带情况,并进行聚类分析。结果 53株肺炎克雷伯菌未发现对亚胺培南、美罗培南、厄他培南耐药;对环丙沙星、左旋氧氟沙星耐药率均＞80％;对其他抗菌药物也有不同程度的耐药。53株肺炎克雷伯菌中Int Ⅰ 1基因阳性率60.4％(32/53),qnrA基因阳性率54.7％ (29/53),qnrS基因阳性率13.2％ (7/53),qnrB基因阳性率5.7％(3/53),qacE△1-sul1基因阳性率71.7％(38/53),TEM基因阳性率92.5％ (49/53),CTX-M基因阳性率100％(53/53),SHV基因阳性率9.4％(5/53),AmpC基因阳性率92.5％(49/53);其中4株同时携带qnrA、qnrS、intⅠ 1、qacE△1-sul1、AmpC、CTX-M基因。聚类分析显示40、41、10与18号,25与42号,8与35号菌株有亲缘关系。结论 产ESBL肺炎克雷伯菌的多重耐药与整合子相关,且携带多种耐药基因,聚类分析显示存在克隆传播和医院内感染。
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多层螺旋CT灌注成像对脑肿瘤瘤周水肿的临床应用
目的 探讨瘤周水肿的多层螺旋CT灌注成像(CTPI)在脑肿瘤诊断方面的应用价值.方法 采用Sensation 16层螺旋CT机对本院29例脑肿瘤患者(胶质瘤14例,转移瘤7例,脑膜瘤8例)行CTPI,分别测量不同瘤周水肿区以及对侧正常脑组织的脑血流量(CBF)、脑血容量(CBV)、肿瘤表面渗透性(PS)、对比剂峰值时间(time to peak,TTP),并进行比较.结果 转移瘤和脑膜瘤瘤周水肿的CBV、CBF显著低于对侧正常脑组织(P＜0.05),PS差异则无统计学意义(P＞0.05).与对侧正常脑组织比较,胶质瘤瘤周水肿的CBV差异无统计学意义(P＞0.05),而PS明显升高(P＜0.05),CBF降低(P＜0.05).胶质瘤、转移瘤及脑膜瘤3者瘤周水肿的TTP甲值均较对侧正常脑组织显著延长(P＜0.05).结论 脑肿瘤的CTPI检查能定量反映瘤周水肿区的血流动力学状况,对脑肿瘤的鉴别和预测预后有重要临床意义.
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强直性脊柱炎患者血清白细胞介素18检测的意义
目的 探讨白细胞介素18(IL-18)在强直性脊柱炎(AS)发病中的作用及其血清水平检测的临床意义.方法 采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测53例活动期AS患者与40例健康对照组血清IL-18及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,并动态观察治疗前后IL-18及TNF-α的变化及其与病情活动指标之间的关系.结果 AS患者治疗前血清IL-18水平明显高于健康对照组[(415.7±30.4)ng/L比(45.7±10.4)ng/L,P＜0.05)],并与TNF-α、Bath强直性脊柱炎病情活动性指数(BASDAI)、晨僵时间、Bath强直性脊柱炎功能指数(BASFI)和Bath强直性脊柱炎脊柱活动测量指数(BASMI)呈正相关(r分别为0.52、0.63、0.48、0.58和0.48,P均＜0.01).治疗12周、24周后AS患者血清IL-18水平分别为(323.6±85.8)和(220.1±15.1)ng/L,均较治疗前明显下降,且治疗24周后下降更明显.结论 IL-18可能参与AS发病机制,血清IL-18的检测可作为反映AS病情活动的指标之一.
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亚低温联合尼莫地平对兔全脑缺血再灌注损伤的保护
目的 探讨亚低温及尼莫地平对脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制.方法 健康新西兰大耳白兔24只,随机分为健康对照组(Ⅰ组)、常温缺血再灌注损伤组(Ⅱ组)、亚低温缺血再灌注损伤组(Ⅲ组)、亚低温+尼萸地平组(Ⅳ组),每组6只.采用双侧颈总动脉夹闭低血压脑缺血模型,除健康对照组外,各组均行脑缺血30 min,再灌注3 h;Ⅲ组在双侧颈总动脉夹闭的同时行局部脑组织亚低温处理,Ⅳ组在夹闭的同时行局部脑组织亚低温+尼萸地平10μg·kg-1·h-1静脉输注并维持至再灌注后3 h.常规监测鼓膜温度、创伤性平均动脉压(MAP)和中心静脉压(CVP).分别于缺血前、缺血30 min、再灌注30、60、120、180 min采血标本,血气分析仪检测颈静脉血氧饱和度(SjvO2).再灌注3 h后处死动物,取脑称干湿重比计算脑含水量.ELISA方法检测血清烯醇化酶(NSE)含量.结果 脑含水量Ⅱ组>Ⅲ组>Ⅳ组.Ⅱ组全脑缺血冉灌注后60 min,血清NSE含量明显升高至(14.07±0.67)μg/L,120 min达高峰(18.53±0.85)μg/L,而SjvO2降低至(66±7.6)%.Ⅲ组冉灌注60min时血清NSE含量下降至(7.27±0.25)μg/L;180 min时至(9.17±0.57)μg/L,SjvO2升高至(91±4.5)%,与Ⅱ组比较差异有统计学意义(P均<0.01).Ⅳ组的血清NSE含量显著低于Ⅲ组,差异具有统计学意义.再灌注30 min,颈静脉血氧饱和度升高,Ⅲ组与Ⅳ组差异无统计学意义(P>0.05).结论 局部脑组织亚低温联合尼莫地平静脉输注能显著减少兔全脑缺血再灌注后血清NSE表达,升高SjvO2,减轻缺血再灌注损伤所致的脑水肿.
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强直性脊柱炎核素骨显像与病理
目的利用核素骨显像与CT导引下骶髂关节穿刺的病理活检结果,探讨核素骨显像骶髂关节与骶骨核素比值测定在强直性脊柱炎(AS)诊断和监测中的价值. 方法 10例临床诊断AS的患者,共19个骶髂关节(正常关节1个,CT诊断为 0、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期骶髂关节炎18个).先行核素全身骨显像、骶髂关节显像及其核素比值测定 ,1～3日后均行CT导引下骶髂关节穿刺活检,病理组织学检查. 结果病理活检显示18个为骶髂关节炎关节分别有滑膜炎、软骨及软骨下骨板血管翳侵入、骨质破坏等病变.核素骶髂关节显像发现核素比值升高者15个.10例患者均有全身其他关节或脊柱病变. 结论核素骨显像及其核素比值测定,有利于AS的骶髂关节炎的早期诊断,及对AS的活动性监测具有重要的应用价值.
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HBsAg逆转录病毒表达质粒的构建及其在真核细胞中的表达
目的构建乙型肝炎表面抗原(HBsAg)逆转录病毒表达质粒并探讨其在真核细胞中的表达.方法用限制性内切酶从重组质粒pBKS-S中切出HBsAg基因,并亚克隆到逆转录病毒表达质粒pLXSN,构建成重组质粒pLXSN-S;经限制性内切酶消化和DNA序列测定鉴定无误后,用阳离子脂质体转染法将重组质粒pLXSN-S分别转染HepG2、K562和EB病毒转化B淋巴母细胞(EBVC);用ELISA法检测HBsAg在细胞培养上清中的表达.结果经酶切和DNA序列测定鉴定证实重组质粒构建正确;质粒pLXSN-S转染细胞培养上清均可检测到HBsAg.结论逆转录病毒表达质粒pLXSN-S构建成功并可在真核细胞中稳定表达.
