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抗人成骨肉瘤杂交瘤细胞系的建立及单克隆抗体特性

何大为;张惠中;范清宇;裘秀春;马保安;周勇;刘明

摘要: 目的:建立抗人成骨肉瘤单克隆抗体杂交瘤并对杂交瘤细胞及抗体特性进行研究.方法:利用我室自建的成骨肉瘤细胞系(OS-9607)免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0融合,经筛选和克隆化,制备杂交瘤细胞系,用免疫组化ABC方法研究杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体特性.结果:制得2株能持续、稳定分泌抗体的杂交瘤细胞系.其中6E7和5D3株杂交瘤细胞经过100 d连续培养,单克隆抗体6E7 mAb和5D3 mAb分泌稳定、特异性强、效价高.免疫组化检测结果发现,6E7 mAb和5D3 mAb相应抗原在成骨肉瘤组织及成骨肉瘤细胞系呈高度表达(80%),10种正常组织中未见阳性反应;中度以上染色者占阳性总数的80%以上,6E7 mAb主要分布于细胞核上,5D3 mAb主要分布于细胞质内.结论:此2株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体具有成骨肉瘤细胞特异亲合性,它们的成功研制为发现新的成骨肉瘤生化标志、成骨肉瘤的早期诊断及免疫治疗提供了可能性.

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