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结核分枝杆菌耐异烟肼基因突变的快速检测

程晓东;别良峰;苏明权;段艳;岳乔红;杨柳;张建芳;刘家云;郝晓柯;于文彬

摘要: 目的: 探讨编码过氧化氢-过氧化物酶的katG基因突变与结核分枝杆菌异烟肼(INH)耐药性的相关关系. 方法: 根据结核分枝杆菌genebank中katG序列,自行设计特异性寡聚核苷酸引物,采用聚合酶链反应-单链构象多态性(polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism, PCR-SSCP)分析和直接测序法(direct sequencing, DS)分析结核分枝杆菌中katG基因突变情况. 以H37 Rv标准株为对照. 结果: 所有23株敏感菌均未有SSCP结果异常; 35株耐药菌中,有2株(5.7%) katG基因扩增阴性,且发生在高度耐药菌中. 进一步分析发现,SSCP法突变检出23株(65.7%),测序法突变检出24株(68.6%),符合率为95.8%(23/24). 结论: 参照测序法对耐药菌突变序列的分析结果,PCR-SSCP敏感、特异,可快速检测结核分枝杆菌katG耐药基因突变,有利于耐药结核分枝杆菌耐药性的快速检测.

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