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抗磷脂抗体靶抗原-β2糖蛋白Ⅰ的原核表达和鉴定

程烽;卢爱薇;谢飞;兰风华

摘要: 目的构建β2糖蛋白Ⅰ(β2-GPI)的原核表达载体并诱导其表达.方法利用PCR技术从β2-GPI昆虫表达载体中扩增出编码β2-GPI目的DNA片段,将其插入GST融合表达载体pGEX-2T多克隆位点,以IPTG诱导GST融合β2-GPI的表达.结果凝胶电泳显示昆虫表达载体的PCR扩增产物的分子量大小与目的片段大小相符.对重组质粒(pGEX-2T-β2-GPI)分析表明,插入片段的序列与发表的β2-GPI基因编码序列一致.在IPTG的诱导下,BL21重组菌高效表达出一个分子量约为64kDa产物,与预期相符.结论β2-GPI编码序列已被克隆至GST融合表达载体pGEX-2T.

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