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放线菌16S rDNA 片段扩增方法的优化

金方;陈玉如;王颜颜;康颖倩

摘要: 目的:通过对放线菌PCR扩增方法的综合改进,找到某些用常规手段难扩增的放线菌16S rDNA的佳PCR扩增条件。方法(1)提取放线菌基因组DNA并对其进行PCR扩增以找到适退火温度;(2)改变PCR反应体系中模板DNA和Mg2+的浓度;(3)在反应体系中加入适量的二甲基亚砜。结果在25μL的PCR反应体系中,模板DNA浓度为10×、加入0.5μL的Mg2+和5%的二甲基亚枫、退火温度为59℃时对放线菌16S rDNA扩增效果为理想。结论本实验研究出一种扩增放线菌16S rDNA的优化条件,为今后大批量的放线菌的分子生物学研究提供了更加高效、方便、快捷、经济的实验方法。

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