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等度洗脱HPLC分析冻存与新鲜心肌线粒体心磷脂含量的比较

魏稼黎;段忠心;喻田;李李;刘镭

摘要: 目的 建立稳定、快速检测心磷脂(cardiolipin,CL)的等度洗脱(HPLC)检测法,并检测线粒体冻存前后CL含量变化.方法 雄性SD大鼠心脏30个,分成C、I、IR 3组,每组10个.C组于Langendorff装置灌注80 min;Ⅰ组灌注20 min后,缺血30 min;IR组灌注20 min,缺血30 min,再灌注30 min.提取其线粒体,均分成2份,1份即可提取总磷脂,1份冻存3个月后提取总磷脂.采用等度洗脱正相HPLC分析心磷脂.结果 CL保留时间为为9.697 min,小检测限为0.156 25 μg(S/N≥3),线性范围0.31~40 μg,回归方程为CL(μg)=0.003 582×峰面积-0.728 0(r=0.988).线粒体CL含量缺血后显著减少,但再灌注未进一步加重CL丢失.冻存线粒体CL含量无明显变化.结论 正相等度洗脱分析大鼠心肌线粒体CL快速、有效,线粒体冻存不影响CL检测.

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