年轻血液对小鼠脊髓损伤的影响
摘要： 目的 通过建立连体小鼠模型,研究年轻小鼠血液对小鼠脊髓损伤的影响.方法 对12月龄C57BL/6小鼠实施脊髓损伤手术,并于损伤7d后将脊髓损伤C57BL/6小鼠与年轻(3月龄)或同龄(12月龄)EGFP转基因小鼠连体配对.连体配对14d后,通过脾脏细胞分离和荧光显微镜检测对小鼠连体模型进行血液嵌合检测.连体配对28 d后,对连体模型中的脊髓损伤C57BL/6小鼠进行BBB运动功能评分和HE染色.结果 血液嵌合分析显示,脊髓损伤C57BL/6小鼠-EGFP转基因小鼠连体模型可形成稳定的血液嵌合.BBB评分显示,与年轻EGFP小鼠连体配对的脊髓损伤C57BL/6小鼠运动功能恢复情况显著优于与同龄EGFP小鼠连体配对者.与年轻EGFP小鼠连体配对的脊髓损伤C57BL/6小鼠脊髓组织空洞面积较与同龄EGFP小鼠连体配对者明显缩小.结论 年轻血液可显著促进小鼠脊髓损伤恢复.
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氟西汀抑制野百合碱诱导的大鼠右心室肥厚及GATA结合蛋白4的表达
目的 研究氟西汀(Fluoxetine,Flu)抑制野百合碱(Monocrotaline,MCT)诱导的大鼠右心室肥厚与(GATA binding protein 4)结合蛋白4(GATA-4)表达的关系.方法 建立MCT诱导的慢性肺动脉高压大鼠模型.灌胃给予大鼠不同剂量的Flu,检测右心室肥厚指标和心室GATA-4蛋白表达水平.结果 MCT诱导的大鼠右心指数及右心室cATA-4蛋白表达均比正常对照组显著增加,Flu剂量依赖地抑制了右心指数及右心室GATA-4表达增加,而各组间左心室和室间隔的GATA-4表达没有明显变化.结论 选择性5-羟色胺再摄取抑制剂Flu抑制MCT诱导的大鼠右心室肥厚可能与抑制GATA-4表达有关.
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畲族中小学生体质测量的研究
目的 为了解畲族中小学生身体发育状况及体质特征,积累人类学资料,为促进畲族中小学生健康成长提供科学依据.方法 按活体测量要求,对身高、体重、胸围、腰围、臀围、体脂百分率进行测量,计算出体重、胸围、腰围、臀围的标准指数.结果 畲族中小学生男生14岁、女生13岁,身高、体重生长速度较快,16岁后生长速度缓慢；男女生8-18岁期间身高、体重生长出现两个生长高峰期.结论 畲族中小学生身高、体重与年龄增长具有相关性,但女生体重16岁后反而呈现负增长.
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干扰素-β转染对胶质瘤的治疗和细胞因子的调节作用
目的 探讨干扰素-β(IFN-β)基因转染对胶质瘤的生长抑制和诱导凋亡的作用,明确IFN-β在SK-MG-1细胞系中对其他细胞因子的调节作用.方法 用IFN-β基因转染和蛋白刺激胶质瘤细胞系SKMG-1,通过MTT方法检测细胞增殖情况,并运用流式细胞技术检测其对凋亡的影响,同时用RT-PCR的方法检测细胞因子的表达变化.结果 IFN-β基因转染可以明显抑制细胞增殖,转染后48h和72h对肿瘤细胞的生长抑制率达到37.3%和46.0%.IFN-β基因转染还可以诱发细胞凋亡,转染后48h和72h肿瘤凋亡率达到31.7%和48.2%.RT-PCR结果显示在胶质瘤细胞系中IFN-β上调白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA表达,同时一过性下调自细胞介素-6(IL-6)的mRNA表达,而后在24h后上调IL-6的表达.结论 IFN-β基因转染可以抑制胶质瘤细胞系SK-MG-1的增殖,诱发细胞的凋亡,IFN-β对胶质瘤的生长抑制作用可能与其对其它细胞因子的调节作用有关.
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HINT1基因在喉鳞状细胞癌中的表达和意义
目的 组氨酸三聚体核苷结合蛋白1(histidine triad nucleotide-binding protein 1,HINT1)基因在喉鳞状细胞癌组织中的表达情况及其与患者临床病理特征的关系,探讨HINT1基因在喉鳞状细胞癌发病过程中的作用.方法 通过实时定量PCR和免疫组织化学检测82例喉鳞状细胞癌组织和56例癌旁组织中HINT1mRNA和蛋白水平的表达,分析其蛋白表达与患者临床病理特征的关系.结果 喉鳞状细胞癌组织HINT1mRNA水平显著低于癌旁组织(P＜0.01),HINT1蛋白表达阳性率显著低于癌旁组织(P＜0.05).晚期喉鳞状细胞癌组织中HINT1蛋白表达显著低于早期喉鳞状细胞癌组织(P＜0.05).结论 HINT1在喉鳞状细胞癌中可能发挥抑癌基因的作用.
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人4-1BBL基因重组腺病毒载体的构建及其在HEK293细胞的表达
目的 体外构建含有人4-IBBL基因的重组腺病毒载体,并检测其在HEK293细胞中的表达.方法 设计一对含有Sfil酶切位点的4-1BBL因上下游引物,以质粒pCR4-TOP0-4-1BBL为模板,通过PCR扩增获得4-1BBL基因全序列.片段回收后经酶切处理,连接到穿梭质粒pShuttle-CMV-EGFP上,获得重组穿梭质粒pShuttle-ECFP-4-1BBL.经Sfil酶切、PCR及插入片段测序鉴定正确后,将其用I-Ceul和I-Scel双酶切处理,转移到pAdxsi载体上,得到pAdxsi-GFP-4-1BBL病毒质粒,PCR鉴定正确后,经HEK293细胞包装成复制缺陷型腺病毒Ad-4-1BBL,通过观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达,Western blot检测目的 基因人4-1BBL的表达.结果 酶切鉴定和序列分析证实,重组腺病毒质粒含有人4-1BBL全长cDNA编码序列,病毒滴度为1.2×10<'10>pfu/mL.转染HEK293细胞后荧光显微镜下观察到CFP的表达,Western blot检测可见4-1BBL蛋白的正确表达.结论 人41BBL基因重组腺病毒载体的成功构建和在HEK293细胞中的表达,为下一步将其应用于前列腺癌的免疫治疗奠定了基础.
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牙周炎牙龈组织MMP-2、TIMP-1的免疫组化研究
目的探讨来源于宿主的基质金属蛋白酶MMPs及其抑制因子在牙周炎发病中的作用机制.方法本研究利用免疫组化方法检测15例牙周炎患者牙龈组织中和4例健康牙龈中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、组织抑制因子1(TIMP-1)的蛋白表达.结果15例成人牙周炎组牙龈组织中MMP-2在上皮内及上皮下的炎性组织中均有阳性表达,而且阳性率明显高于正常牙龈(P＜0.05);TIMP-1在牙周炎以及正常的牙龈组织中表达无明显差异.结论本研究提示基质金属蛋白酶MMP-2参与牙周组织破坏过程,参与牙周炎的病理生理机制.
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老龄小鼠胸腺内皮细胞的变化
目的 研究老化引起胸腺萎缩和功能减低的相关机制.方法 用组织化学和免疫荧光染色方法分析胸腺皮质和髓质结构;用BrdU标记流式细胞仪方法研究胸腺内皮细胞增殖;细胞凋亡测定用TUNNEL流式细胞仪方法.结果 老龄小鼠胸腺内皮细胞增殖阳性率6.7%,对照年轻小鼠为9.2%.老龄小鼠胸腺内皮细胞凋亡率为11.3%,对照年轻小鼠为2.6%.老龄小鼠胸腺结构出现退行性改变.结论 老化引起胸腺内皮细胞增殖能力下降、凋亡率增加和胸腺结构出现退行性改变,可能是老年胸腺萎缩免疫力降低的原因之一.
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神经鞘瘤D22S268杂合缺失与组织学类型的相关性研究
目的探讨神经鞘瘤组织学类型与NF2基因微卫星标记D22S268杂合性缺失(LOH)的相关性.方法选择与NF2基因密切相关的微卫星标记D22S268,应用PCR方法检测35例神经鞘瘤患者的新鲜肿瘤组织标本.结果病理分型为Antoni A型20例, 其中LOH 15例;Antoni B型15例,LOH 0例.两种病理分型中D22S268 LOH发生率存在着显著差异(P<0.01 ).结论 NF2基因的LOH可能在Antoni A型的神经鞘瘤发生过程中起决定性作用.
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脱细胞同种异体神经移植物的制备及成分分析
目的探讨脱细胞同种异体神经移植的制备方法及其含有的成分.方法采用组织工程化低渗脱细胞方法制备神经异体移植物,光电镜观察其结构特征;用免疫组织化学法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析神经异体移植物的成分.结果正常的(天然的)周围神经经脱细胞处理后,清除了雪旺细胞、神经外膜和束膜的细胞,以及神经纤维的髓鞘和轴突,保存了由雪旺细胞基底膜管以及神经外膜和束膜的细胞外基质构成的三维支架结构.成分分析结果显示,含有LN、FN以及生长相关蛋白GAP-43和65kDa蛋白等促进和诱导受体损伤神经再生的重要成分.结论脱细胞异体神经移植物含有诱导和促进神经再生的相关蛋白,有利于受损神经的再生.
关键词： 神经组织工程 脱细胞神经异体移植物 神经再生 大鼠 -
受体Megalin和Cubilin在Opossum肾小管细胞的表达及定位
目的检测肾小管细胞膜大分子糖蛋白受体Megalin和Cubilin在Opossum肾小管(OK)细胞的表达及亚细胞分布.方法采用Western印迹法、免疫荧光双标记法及免疫细胞化学双标记法.结果受体Megalin及Cubilin在分离的OK细胞膜上有表达,荧光双标记显示两种受体十分相似地分布在细胞周边部,电镜下,标记金颗粒的两种受体相近地分布在细胞顶部胞质的细胞内吞系统.结论两种受体在OK细胞上的分布特征与两种受体在体内肾近端小管小皮细胞的分布相似,提示OK细胞可成为研究两种受体介导可能的、未知的配体细胞内吞功能的有效细胞株,二者可能在一些大分子的重吸收中起到相互作用.
关键词： megalin cubilin OK细胞 Western印记法 免疫细胞化学技术
