HPLC法同时测定熊去氧胆酸片中有关物质的研究
摘要: 目的:探讨熊去氧胆酸片中有关物质的测定方法.方法:使用ZORBAX SB-C18柱(150mm×4.6mm,5μm);以0.02mol/L磷酸氢二钠溶液(用磷酸调节pH值至3.0)-甲醇(40:60)为流动相;检测波长为210 nm.结果:各杂质测定结果具有良好的线性(r=0.999 1-0.999 5),方法回收率、精密度、稳定性、重复性均符合要求.结论:本方法准确可行,适用于熊去氧胆酸片中有关物质的测定.
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多潘立酮自乳化软胶囊Beagle犬体内药物动力学研究
目的:对自制多潘立酮自乳化软胶囊进行Beagle犬体内药物动力学研究.方法:Beagle犬采用随机双交叉试验方法,对受试制剂(自制多潘立酮自乳化软胶囊)及参比制剂(法国杨森多潘立酮片剂)采用HPLC-MS法测定给药后不同时间的血药浓度,并用DAS 2.0拟合药物动力学参数.结果:受试制剂:T1/2z=89±12min,Cmax=59.20±9.66μg/L,Tmax=90±21 min,AUC(0-∞)=11849.71±1884.22μg/(L·min).参比制剂:T1/2z=107±54min,Cmax=41.80±8.83 μg/L,Tmax=120±21min,AUC(0-∞)=6376.02±1341.95 μg/(L·min).结论:多潘立酮软胶囊AUC曲线下面积明显高于法国杨森产品,其口服生物利用度有所提高.
关键词: 药物动力学 多潘立酮自乳化软胶囊 HPLC-MS 生物利用度 -
肉苁蓉对帕金森病模型大鼠PI3K、 Akt、 Bcl-2、Bax蛋白表达的影响
目的:观察肉苁蓉对帕金森病(PD)模型大鼠行为学及中脑黑质-纹状体组织PI3K、Akt、Bcl-2、Bax蛋白表达的影响,探讨其对神经细胞的保护作用机制.方法:将48只健康SD雄性大鼠随机分为正常组、溶剂对照组、模型组、肉苁蓉低、中、高剂量组6组,采用颈背部皮下注射鱼藤酮葵花油乳化液建立PD大鼠模型,给予肉苁蓉水煎剂后,第3、7、14天分别进行行为学步幅试验;第14天行为学检测后,处死大鼠,提取黑质-纹状体蛋白,Western Blot检测PI3K、Akt、Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果:肉苁蓉干预14天后,与模型组比较,中、高剂量组步幅明显增大(P<0.01),低、中、高剂量组PI3K、Bcl-2蛋白表达、Bcl-2/Bax值明显升高(P<0.01或P<0.05),中剂量组Akt蛋白表达明显升高(P<0.01),低、中、高剂量组Bax表达明显降低(P<0.01).结论:肉苁蓉能改善帕金森病模型大鼠的行为障碍,其对多巴胺神经细胞的保护作用可能是通过影响PI3K/Akt信号通路,上调Bcl-2表达,下调Bax表达,升高Bcl-2/Bax值,进而抑制神经细胞的凋亡实现的.
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补肾健骨汤干预PMOP小鼠BMSCs成骨分化机制的实验研究
目的:观察去除卵巢小鼠股骨中骨髓间充质干细胞的成骨分化机制来探究补肾健骨汤治疗绝经后骨质疏松症的临床疗效.方法:本实验研究采取去除小鼠双侧卵巢的方法复制绝经后骨质疏松症模型,将实验小鼠随机分为假手术组、补肾健骨汤组和生理盐水组,手术后一周开始给药干预,2次/天,连续给药15天后通过碱性磷酸酶染色和茜素红染色来检测三组小鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化机制.结果:补肾健骨汤组的碱性磷酸酶检测水平明显高于生理盐水组(P<0.05),补肾健骨汤组的茜素红染色检测水平也明显高于生理盐水组(P<0.05).结论:运用补肾健骨汤来治疗绝经后骨质疏松症模型小鼠取得了良好的效果,因此,认为补肾健骨汤中的药物成分对骨髓间充质干细胞的增值和分化具有推动作用,它能够促进骨骼的修复和生成,对治疗绝经后骨质疏松症具有良好的效果.
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毛竹笋醇提物对D-氨基半乳糖致小鼠急性肝损伤的保护作用
目的:研究毛竹笋醇提物对D-氨基半乳糖诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用.方法:60只昆明种小鼠雌雄各半随机分为6组,正常组、模型组、阳性药物组、毛竹笋醇提物高、中、低剂量组,每组10只.正常组和模型组灌胃生理盐水,其余各组灌胃相应药物,连续给药7天;末次给药后,正常组腹腔注射等量生理盐水,其余各组均腹腔注射500mg/kg,10%D-氨基半乳糖,复制急性小鼠肝损伤模型;12h后眼眶取血,利用比色法检测血清谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)活性,并对肝组织切片观察肝组织细胞的病理变化.结果:与正常组相比,模型组小鼠血清ALT、AST活性均显著升高(P<0.05).与模型组相比,毛竹笋醇提物各剂量组对小鼠血清ALT、AST活性均有降低作用;HE染色结果显示与模型组相比,不同浓度的毛竹笋醇提物均能使肝细胞的损伤减轻.结论:毛竹笋醇提物对D-氨基半乳糖诱导的急性肝损伤具有明显的保护作用.
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高效液相色谱法检测生物体内羟基喜树碱的方法学研究
目的:探索高效液相色谱法测定在生物样品基质中羟基喜树碱的含量的可行性及条件.方法:采用高效液相色谱法测定生物样品基质中羟基喜树碱的含量,检测该方法的特异性和选择性、线性范围、定量下限(LOQ)、精密度、准确度、回收率及稳定性进行考察.结果:羟基喜树碱定量检测方法采用的流动相为甲醇∶水=50∶50,流速恒定为1.0mL/min.保留时间内未见干扰峰;该方法准确度高,回收率及稳定性好.结论:该方法能够高效检测生物基质中羟基喜树碱的含量.
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基于TLR4/NF-κB通路探讨滋阴潜阳方对两肾一夹高血压大鼠肾损伤保护作用的机制
目的:探讨滋阴潜阳方对两肾一夹高血压大鼠肾损伤保护作用的机制.方法:复制两肾一夹高血压大鼠模型随机分为滋阴潜阳组、贝那普利组、模型组,各8只;另选8只同龄SD大鼠为假手术组.造模后2周,中药组、西药组分别给予2g/mL滋阴潜阳方水煎剂、0.1 mg/mL贝那普利混悬液灌胃,持续8周;用尾动脉搏动法测大鼠手术后2周,灌胃4周、8周血压.给药结束后,观察肾脏组织学变化,并用ELISA测定肾组织上清液中IL-6、IL-8、TNF-α的表达水平、实时PCR技术测定TLR4-mRNA含量、Western-Blot法测定TLR4、NF-κBp65核蛋白表达.结果:造模2周后与假手术组相比,模型组、西药组、中药组血压明显升高(P<0.05);灌胃4、8周后,与治疗前相比,治疗组血压在治疗后均显著降低(P<0.05).与假手术组相比,模型组IL-6、IL-8、TNF-α的表达水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,两治疗组表达水平显著降低(P<0.05).与假手术组相比,模型组TLR4-mRNA表达明显增强(P<0.01);与模型组相比,滋阴潜阳组、贝那普利组表达明显减少(P<0.01).与假手术组相比,模型组TLR4、NF-κBp6表达均明显升高(P<0.01);灌胃8周后,与模型组相比,滋阴潜阳组、贝那普利组蛋白具有显著性差异(P<0.01).治疗组肾脏组织病理损伤程度较模型组明显减轻.结论:滋阴潜阳方可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路的激活来降低炎症因子的释放,从而改善对高血压对肾脏的损伤.
关键词: TLR4/NF-κ信号通路 滋阴潜阳 两肾一夹 肾损伤 机制 -
清热止咳方对肺炎支原体感染BALB/c小鼠NLRP3炎性体mRNA表达的影响
目的:探讨清热止咳方对肺炎支原体(MP)感染小鼠NLRP3炎性体mRNA表达及IL-18分泌的影响.方法:将96只雌性BALB/c小鼠按随机数字表随机分为正常对照组、MP模型组、罗红霉素组及清热止咳方组,每组24只.滴鼻法建立MP感染小鼠模型,每组小鼠灌胃给药2周,其中正常对照组及模型组分别灌服相同容量蒸馏水.于造模后7d、14d、28d留取小鼠肺组织及肺泡灌洗液(BALF),分别用荧光定量PCR及ELISA方法检测NLRP3、ASC、Caspase-1mRNA及IL-18在肺组织或肺泡灌洗液中的表达量.结果:给药后7d、14d罗红霉素组和清热止咳方组可下调MP模型小鼠肺组织NLRP3、ASC、Caspase-1mRNA表达及BALF IL-18分泌(P<0.05).结论:清热止咳方抗肺炎支原体感染与下调NLRP3炎性体相关mRNA表达,并抑制IL-18分泌有关.
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佛波酯诱导小鼠慢性炎症模型考察肤光方抗炎作用的研究
目的:研究肤光方对佛波酯诱导的小鼠慢性炎症模型的抗炎疗效.方法:采用佛波酯(TPA)诱导昆明种小鼠耳部的慢性炎症模型,外用阳性药物吲哚美辛、肤光方,每日2次,连续给药3日后,观察药物对实验小鼠的耳厚度、耳重量、组织病理和髓过氧化物酶(MPO)的改变.结果:造模给药后的耳厚度、耳重量及MPO酶活性方面,阳性药吲哚美辛组同模型组比较,具有显著性差异(P<0.01);肤光方高剂量组同模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);皮损病理切片方面,模型组和正常空白对照组比较,棘层明显增厚,有明显的炎症细胞浸润,用药后,阳性药物组和肤光方高剂量组中增厚的棘层有所恢复,炎症细胞浸润有所改善.结论:佛波酯诱导的小鼠慢性炎症模型稳定,操作简单,可用于炎症的药效学研究,同时提示肤光方具有较强的抗炎作用.
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妊娠小鼠子宫内注射影响因素的研究
目的:探讨注射天数、孕鼠经初产等因素对子宫内注射成功率的影响.方法:将初产及经产孕鼠各随机分为4组,实验组分别在孕14d、15d、16d进行胎鼠腹腔注射,并设假手术组,观察手术并发症及妊娠结局.结果:孕14d注射组经产孕鼠较初产孕鼠的胚胎丢失率明显降低,而注射天数对胚胎丢失率无显著影响.结论:采用经产孕鼠可显著提高子宫内注射后胎鼠存活率,孕14~ 16d可作为后续研究优化胎鼠腹腔注射时间的选取范围.
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液质联用法检测苯二氮卓类药物的临床应用
目的:针对生物样本(全血、尿液、唾液),建立含苯二氮卓类药物成分的QuEChERS-超高效液相色谱(UPLC)-多重反应监测(MRM)-条件触发(IDA Criteria)-增强子离子扫描(EPI)的检测方法.方法:色谱柱为Waters Atlantis T3 C18,100 mm×2.1 mm,3μm;柱温为加℃;流动相为含0.1%甲酸的5mmol/L甲酸铵水溶液及乙腈,梯度洗脱;流速为0.2mL/min;以优化后的质谱参数采集信号.结果:检出限浓度为0.5 ng/mL;定量限浓度为1.0 ng/mL;线性范围为定量限浓度~200 ng/mL;在线性范围内相关系数在0.999以上;加标回收率在86.0%~98.2%.结论:本方法准确,灵敏度高,专属性好;能用于生物样本(全血、尿液、唾液)中苯二氮卓类药物化学成分的同时定性及定量检测.