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基因重组卡介苗高效电转化条件的实验研究

王靖宇;李丽君;韩瑞发
关键词: 卡介苗 DNA 重组 电转化

摘要: 目的 探讨卡介苗(BCG)电转化中影响转化效率的因素.方法 利用电转化仪将穿梭质粒pYL-hB7-2 转入BCG中,考察其影响因素并优化转化条件.转化子利用卡那霉素抗性筛选和聚合酶链反应(PCR)及酶链免疫吸附试验(ELISA)鉴定.结果 重组BCG获得较高的转化效率,高可达8/9.外加电场强度和质粒浓度是决定电转化效率的关键因素,感受态细胞的状态,如生长期和冰浴时间均可影响转化效率.结论 成功解决了基因重组BCG构建过程中电转化的问题.

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