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三乙烯四胺文献资料
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两种方法检测TETA与卡铂联用对肿瘤细胞作用的比较
检测药物对肿瘤细胞作用活性的方法是抗肿瘤药物筛选的基本途径.四甲基偶氮唑蓝(3-(4,5-dimethyl-2thiazoly)2,5-diphenl-2H-tetrazolium bromide,MTT)在不含酚红的培养液中溶解后呈黄色.活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶能将MTT黄色溶液还原为紫色的不可溶性甲瓒结晶,沉积于活细胞中.
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三乙烯四胺对c-myc启动区转录活性的调节作用
目的 探讨三乙烯四胺 (TETA) 如何调节c-myc基因表达.方法 利用圆二色谱分析TETA对c-myc启动区核酸酶超敏元件Ⅲ1(c-myc NHE Ⅲ1)碱基序列形成的G-四链体DNA(G4-DNA)结构稳定性的影响.同时,分别构建含c-myc NHE Ⅲ1的野生型和突变型的c-myc启动区荧光报告质粒,并分别转染HEK293细胞24 h后,再接种到96孔板,TETA以终浓度0, 0.1,1.0,10及100 μmol·L-1处理8 h,测定荧光素酶活性,计算TETA对其转录活性抑制率.结果 圆二色谱实验结果表明,TETA 5 μmol·L-1就能够进一步增强c-myc NHE Ⅲ1在240 nm处的负峰和260 nm处的正峰的形成,即增强G4-DNA结构的稳定性.报告基因分析结果表明,TETA能够浓度依赖性地抑制野生型c-myc启动区荧光素酶基因的表达,但对突变型c-myc启动区荧光素酶基因的抑制能力明显下降.在TETA 1 nmol·L-1作用时,对突变型c-myc启动区荧光素酶基因抑制率仅为4.3%, 而对野生型的抑制率还高达30.4%.结论 TETA可能通过稳定c-myc NHE Ⅲ1序列形成的G4-DNA结构调节基因的表达.
