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Caspase-3、ADAM10在肺癌中表达与生物学意义
目的 探讨Caspase-3和ADAM10在肺癌中表达情况与影响因素,分析其生物学意义.方法 选择肺癌石蜡包埋标本80例与同期正常肺组织20例,分别进行免疫染色检验,一抗分别为兔抗人多克隆抗体ADAM10和Caspase-3.结果 ADAM10和Caspase-3在正常肺组织和肺癌组织的表达阳性率分别为100％和50 ％.经过调查显示,ADAM10和Caspase-3在腺癌中的表达水平较鳞癌和小细胞癌低,同时在转移的肺癌表达水平也比较低.结论 Caspase-3、ADAM10在肺癌中表达都受到抑制,阳性率降低,可能与患者肿瘤的病理特点与转移情况有关,可作为预测肺癌发生发展的指标之一.
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肝癌中ADAM10、EGFR和E-cadherin的表达分析及其与临床病理关系的研究
目的 探讨ADAM10、EGFR和E-cadherin在肝细胞癌组织中的表达及意义.方法 运用免疫组化法和实时定量PCR检测ADAM10、EGFR和E-cadherin在肝癌组织中的表达,并分析及其与临床病理关系的研究.结果 EGFR和ADAM10在肝癌和癌旁组织中均有表达,但在癌组织中EGFR和ADAM 10的阳性表达率显著高于癌旁组织,而E-cadherin表达低于癌旁组织(P＜0.05).ADAM10、EGFR和E-cadherin在肝癌组织中的表达与门静脉癌栓形成、肝内转移、分化程度、肿瘤大小及肿瘤转移有关.结论 ADAM10、EGFR和E-cadherin的检测对了解肝癌的发生发展,指导治疗和判断预后有重要意义.
关键词： 肝癌 ADAM10 EGFR E-cadherin 表达 -
封闭N-cadherin解整合素金属蛋白酶水解位点的单链抗体的制备及鉴定
目的 制备封闭神经型钙黏素(N-cadherin)解整合素金属蛋白酶水解位点(ADAM)的单链抗体(scFv),并进行鉴定.方法 首先利用RT-PCR技术从分泌抗N-cadherin的ADAM水解位点单克隆抗体(mAb)细胞株中扩增出重链(VH)和轻链(VL)可变区基因片段,然后通过重叠延伸PCR法(SOE-PCR),构建成scFv基因片段.再将其克隆入原核表达载体pET-28a中,在大肠杆菌中诱导表达,通过镍柱纯化和复性后,用SDS-PAGE、ELISA和Western blot法等测定重组蛋白的生物学活性.结果 PCR、酶切和测序表明scFv片段长744 bp,编码248个氨基酸.scFv基因表达载体转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达出相对分子质量(Mr)约29 000的目的蛋白,主要为包涵体形式,经变性,纯化和复性后,获得纯度达90％以上的scFv蛋白,ELISA和Western blot法检测表明可溶性scFv可以与N-cadherin的ADAM水解位点序列多抗原短肽和全长N-cadherin结合.结论 成功构建并表达封闭N-cadherin的ADAM加工位点单链抗体.
关键词： ADAM10 N-cadherin 单链抗体 基因表达 -
ADAM10表达和垂体腺瘤海绵窦侵袭性的关系
目的 检测解聚素金属蛋白酶10(ADAM10)在垂体腺瘤组织中的表达,探讨其与垂体腺瘤海绵窦侵袭性的相关性.方法 收集手术切除的垂体腺瘤组织标本,应用免疫组化SP法检测90例腺瘤的ADAM10表达,应用RT-PCR方法检测42例组织的转录水平；分析其与临床资料的相关性.结果 ADAM10阳性率在侵袭性垂体瘤中高于非侵袭组(P＜0.05),ADAM10的表达与年龄、性别、腺瘤内分泌类型及肿瘤直径无相关性(P＞0.05)；ADAM10 mRNA水平在侵袭性垂体瘤组中高于非侵袭组(P＜0.05),与腺瘤内分泌类型无关(P＞0.05).结论 ADAM10的表达与腺瘤海绵窦侵袭性密切相关,侵袭性腺瘤中ADAM10表达高.为寻找侵袭性的分子标志物提供了新方向,以调控ADAM10的表达为靶目标,抑制肿瘤细胞的转移和侵袭,有望成为垂体腺瘤治疗的新策略.
